Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của loài Chaetoceros Muelleri và Tetraselmis Sp. phân lập tại Việt nam với mục đích ứng dụng trong nuôi trồng thuỷ sản
Tài liệu Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của loài Chaetoceros Muelleri và Tetraselmis Sp. phân lập tại Việt nam với mục đích ứng dụng trong nuôi trồng thuỷ sản: ... Ebook Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của loài Chaetoceros Muelleri và Tetraselmis Sp. phân lập tại Việt nam với mục đích ứng dụng trong nuôi trồng thuỷ sản
Tóm tắt tài liệu Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của loài Chaetoceros Muelleri và Tetraselmis Sp. phân lập tại Việt nam với mục đích ứng dụng trong nuôi trồng thuỷ sản, để xem tài liệu hoàn chỉnh bạn click vào nút DOWNLOAD ở trên
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… i
Bé gi¸o dôc vµ ®µo t¹o
Tr−êng ®¹i häc n«ng nghiÖp hµ néi
------------------
Ph¹m mü Dung
Nghiªn cøu mét sè ®Æc ®iÓm sinh häc
cña loµi chaetoceros muelleri vµ
tetraselmis sp. ph©n lËp t¹i viÖt nam
víi môc ®Ých øng dông trong nu«i
trång thñy s¶n
LuËn v¨n th¹c sÜ n«ng nghiÖp
Chuyªn ngµnh: Nu«i trång thñy s¶n
M· sè : 60.62.70
Ng−êi h−íng dÉn khoa häc: TS. NCVC. §Æng DiÔm Hång
Hµ néi - 2009
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… ii
Lêi cam ®oan
T«i xin cam ®oan ®©y lµ c«ng tr×nh nghiªn cøu cña riªng t«i. C¸c sè liÖu, kÕt qu¶
nªu trong luËn v¨n lµ trung thùc vµ ch−a tõng ®−îc ai c«ng bè trong bÊt kú c«ng
tr×nh nµo kh¸c.
T«i xin cam ®oan r»ng c¸c th«ng tin trÝch dÉn trong luËn v¨n ®Òu ®3 ®−îc chØ râ
nguån gèc.
Hµ Néi, ngµy 12 th¸ng 12 n¨m 2009
T¸c gi¶ luËn v¨n
Ph¹m Mü Dung
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… iii
Lêi c¶m ¬n
Trong suèt qu¸ tr×nh thùc hiÖn ®Ò tµi t«i ® nhËn ®−îc rÊt nhiÒu sù gióp ®ì vÒ
chuyªn m«n vµ c¬ së vËt chÊt cña phßng C«ng nghÖ T¶o, phßng ThÝ nghiÖm träng
®iÓm C«ng nghÖ Gen - ViÖn C«ng nghÖ Sinh häc.
T«i xin göi lêi c¶m ¬n s©u s¾c ®Õn TS.NCVC. §Æng DiÔm Hång - Tr−ëng
phßng C«ng nghÖ T¶o ng−êi ® trùc tiÕp h−íng dÉn t«i trong suèt qu¸ tr×nh lµm ®Ò
tµi. Qua ®©y, t«i xin göi lêi c¶m ¬n ®Õn NCS. Ng« ThÞ Hoµi Thu cïng c¸c c¸n bé
phßng C«ng nghÖ T¶o - ViÖn C«ng nghÖ Sinh häc ® tËn t×nh gióp ®ì vµ t¹o ®iÒu
kiÖn ®Ó t«i thùc hiÖn thµnh c«ng ®Ò tµi nµy.
Bªn c¹nh ®ã, t«i xin bµy tá lßng biÕt ¬n ®Õn c¸c thÇy c« gi¸o Tr−êng §¹i häc
N«ng nghiÖp Hµ Néi, §¹i häc Quèc Gia Hµ Néi, §¹i häc Quèc Gia TPHCM, ViÖn
Nghiªn cøu Nu«i trång Thñy s¶n 1, ViÖn Nghiªn cøu Nu«i trång thñy s¶n 3, ViÖn
nghiªn cøu H¶i D−¬ng häc ® truyÒn ®¹t kiÕn thøc vµ kinh nghiÖm cho t«i trong
suèt kho¸ häc nµy.
T«i còng xin bµy tá lßng biÕt ¬n s©u s¾c ®Õn Ban Gi¸m HiÖu Tr−êng §¹i häc
Vinh, Ban chñ nhiÖm khoa N«ng L©m Ng− vµ tæ bé m«n Nu«i trång Thñy s¶n ®
t¹o ®iÒu kiÖn gióp t«i hoµn thµnh tèt nhiÖm vô c«ng t¸c, häc tËp vµ nghiªn cøu khoa
häc trong hai n¨m qua.
T«i xin göi lêi c¶m ¬n tíi tËp thÓ líp Cao häc 9 – NTTS, cïng c¸c b¹n bÌ
®ång nghiÖp ® gióp ®ì t«i hoµn thµnh tèt ®Ò tµi nµy.
Cuèi cïng, t«i xin göi lêi c¶m ¬n s©u s¾c tíi bè mÑ, anh, chÞ, em ® ®éng
viªn vµ gióp ®ì t«i trong hai n¨m häc qua. §Æc biÖt lµ c¶m ¬n anh - ng−êi chång ®
lu«n ®éng viªn, chia sÎ vµ gióp ®ì em trong qu¸ tr×nh häc tËp, thùc hiÖn ®Ò tµi còng
nh− hoµn thµnh tèt kho¸ häc nµy.
Hµ Néi, ngµy 12 th¸ng 12 n¨m 2009
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… iv
Môc lôc
Lêi cam ®oan .................................................................................................................... ii
Lêi c¶m ¬n ....................................................................................................................... iii
Môc lôc............................................................................................................................ iv
Danh môc c¸c ch÷ viÕt t¾t vµ kÝ hiÖu................................................................................. vi
Danh môc c¸c b¶ng ......................................................................................................... vii
Danh môc c¸c h×nh......................................................................................................... viii
Më §ÇU.......................................................................................................................... 1
CH¦¥NG 1. TæNG QUAN TµI LIÖU......................................................................... 4
1.1. T×nh h×nh nghiªn cøu vi t¶o ngoµi n−íc................................................................... 4
1.1.1. Kh¸i niÖm vÒ t¶o, vi t¶o.................................................................................... 4
1.1.2. T×nh h×nh nghiªn cøu vÒ ph©n lo¹i t¶o .............................................................. 5
1.1.3. T×nh h×nh nghiªn cøu vÒ vai trß, gi¸ trÞ dinh d−ìng cña vi t¶o........................... 8
1.1.4. T×nh h×nh nghiªn cøu øng dông vi t¶o ............................................................ 11
1.1.5. T×nh h×nh nghiªn cøu vÒ l−u gi÷, b¶o qu¶n vµ nu«i trång vi t¶o ...................... 17
1.2. T×nh h×nh nghiªn cøu trong n−íc........................................................................... 21
1.3. T×nh h×nh nghiªn cøu vÒ chi Chaetoceros vµ Tetraselmis ...................................... 25
1.3.1. Nghiªn cøu ®Æc ®iÓm sinh häc cña chi Chaetoceros vµ Tetraselmis................. 25
1.3.2. øng dông cña VTB C. muelleri vµ Tetraselmis sp. trong NTTS....................... 26
CH¦¥NG 2. VËt liÖu Vµ PH¦¥NG PH¸P NGHI£N CøU ................................ 29
2.1. VËt liÖu nghiªn cøu............................................................................................... 29
2.1.1. VËt liÖu nghiªn cøu ........................................................................................ 29
2.1.2. §Þa ®iÓm nghiªn cøu ...................................................................................... 30
2.3. Ph−¬ng ph¸p nghiªn cøu ....................................................................................... 30
2.3.1 Ph−¬ng ph¸p thu thËp, ph©n lËp loµi Chaetoceros muelleri vµ Tetraselmis sp. 30
2.3.2. Ph−¬ng ph¸p l−u gi÷ vµ b¶o qu¶n loµi Chaetoceros muelleri vµ Tetraselmis sp.
................................................................................................................................ 32
2.3.3. §Þnh tªn khoa häc chÝnh x¸c ®Õn loµi Chaetoceros sp. vµ Tetraselmis sp. ph©n
lËp ®−îc ë ViÖt Nam................................................................................................ 34
2.3.4. Ph−¬ng ph¸p nghiªn cøu mét sè ®Æc ®iÓm sinh häc cña loµi Chaetoceros
muelleri vµ Tetraselmis sp. ..................................................................................... 36
2.3.5. Quy tr×nh nu«i thu sinh khèi Chaetoceros muelleri vµ Tetraselmis sp. trong ®iÒu
kiÖn phßng thÝ nghiÖm vµ ngoµi tù nhiªn theo ®Þnh h−íng øng dông lµm thøc ¨n cho
Êu trïng cña c¸c loµi h¶i s¶n .................................................................................... 39
2.3.6. Ph−¬ng ph¸p ph©n tÝch vµ xö lý sè liÖu........................................................... 40
CH¦¥NG 3. KÕT QU¶ NGHI£N CøU Vµ TH¶O LUËN ...................................... 41
3.1. Ph©n lËp, l−u gi÷, ®Þnh tªn khoa häc chÝnh x¸c loµi Chaetoceros sp. vµ Tetraselmis
sp. ph©n lËp ë ViÖt Nam .............................................................................................. 41
3.1.1. KÕt qu¶ ph©n lËp hai loµi Chaetoceros sp. vµ Tetraselmis sp. tõ vïng biÓn H¶i
Phßng ...................................................................................................................... 41
3.1.2. §Þnh tªn khoa häc chÝnh x¸c ë møc ®é sinh häc ph©n tö cña loµi Chaetoceros
sp. vµ Tetraselmis sp. ph©n lËp ë ViÖt Nam b»ng ph−¬ng ph¸p ®äc vµ so s¸nh trªn
tr×nh tù nucleotit cña gen 18S rRNA ........................................................................ 43
3.1.3. L−u gi÷ vµ b¶o qu¶n Chaetoceros muelleri vµ Tetraselmis convolutae ........... 49
3.2. Nghiªn cøu mét sè ®Æc ®iÓm sinh häc cña loµi C. muelleri vµ loµi Tetraselmis
convoluate ph©n lËp ë ViÖt Nam.................................................................................. 51
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… v
3.2.1. Tèi −u ho¸ ®iÒu kiÖn nu«i trång...................................................................... 51
3.2.2. Thµnh phÇn dinh d−ìng, lipÝt tæng sè, thµnh phÇn axÝt bÐo cña C. muelleri vµ
Tetraselmis convolutae ............................................................................................ 60
3.3. Nu«i thu sinh khèi C. muelleri vµ Tetraselmis convolutae trong ®iÒu kiÖn phßng thÝ
nghiÖm vµ ngoµi tù nhiªn theo ®Þnh h−íng øng dông lµm thøc ¨n cho Êu trïng cña c¸c
loµi h¶i s¶n .................................................................................................................. 65
3.3.1. Sinh tr−ëng cña C. muelleri ë c¸c thÓ tÝch nu«i kh¸c nhau.............................. 65
3.3.2. Sinh tr−ëng cña Tetraselmis convolutae ë c¸c thÓ tÝch kh¸c nhau ................... 66
KÕT LUËN Vµ §Ò NGHÞ............................................................................................ 68
1. KÕt luËn................................................................................................................... 68
2. §Ò nghÞ.................................................................................................................... 69
Tµi liÖu tham kh¶o............................................................................................. 70
PHô LôC ...................................................................................................................... 83
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… vi
Danh môc c¸c ch÷ viÕt t¾t vµ kÝ hiÖu
AA Arachidonic Acid
ANOVA Analysis of variance Ph©n tÝch ph−¬ng sai
cs Céng sù
DHA Docosahexaenoic acid, 22:6 (n-3)
DMSO Dimethylsulfoxide
DPA Docosapentaenoic Acid
EPA Eicosapentaenoic acid, 20:5 (n-3)
Erd Erdscheiber
M§TB MËt ®é tÕ bµo
NTTS Nu«i trång thñy s¶n
PCR Polymerase chain reaction
PTN Phßng thÝ nghiÖm
PUFAs Polyunsaturated fatty acids
OD Optical Density MËt ®é quang
SEM Scaning electronic microscope KÝnh hiÓn vi ®iÖn tö quÐt
SHPT Sinh häc ph©n tö
TLK Träng l−îng kh«
TLT Träng l−îng t−¬i
TB TÕ bµo
VTB Vi t¶o biÓn
18S rRNA 18S ribosomal Ribonucleic acid
TEM Transmission electron microscopy KÝnh hiÓn vi ®iÖn tö truyÒn qua
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… vii
Danh môc c¸c b¶ng
Sè
b¶ng
Tªn b¶ng Trang
1.1 Ph©n lo¹i c¸c nhãm ngµnh t¶o 6
1.2 Mét sè loµi t¶o ®−îc sö dông phæ biÕn trong NTTS 11
1.3 T×nh h×nh nghiªn cøu vÒ l−u gi÷, b¶o qu¶n vi t¶o 18
3.1 HÖ sè t−¬ng ®ång cña c¸c loµi thuéc chi Chaetoceros 46
3.2 HÖ sè t−¬ng ®ång cña c¸c loµi thuéc chi Tetraselmis 47
3.3 Thµnh phÇn dinh d−ìng v« c¬ vµ h÷u c¬ cña C. muelleri vµ T.
convolutae
61
3.4 Thµnh phÇn axÝt bÐo b o hoµ vµ kh«ng b o hoµ cña C. muelleri 63
3.5 KÕt qu¶ ph©n tÝch thµnh phÇn axÝt bÐo b o hoµ vµ kh«ng b o hoµ cña
T. convolutae
64
3.6 Sinh tr−ëng cña C. muelleri ë c¸c thÓ tÝch kh¸c nhau 65
3.7 Sinh tr−ëng cña T. convolutae ë c¸c thÓ tÝch kh¸c nhau 66
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… viii
Danh môc c¸c h×nh
Sè h×nh Tªn h×nh Trang
1.1 §−êng cong sinh tr−ëng cña vi t¶o 5
2.1 S¬ ®å quy tr×nh thÝ nghiÖm b¶o qu¶n c¸c mÉu vi t¶o biÓn 33
2.2 Quy tr×nh chôp ¶nh SEM c¸c mÉu vi t¶o biÓn 34
2.3 Quy tr×nh t¸ch chiÕt AND tæng sè c¸c mÉu VTB 35
2.4 Quy tr×nh nh©n nu«i sinh khèi t¶o trong ®iÒu kiÖn PTN vµ Pilot 40
3.1 H×nh th¸i tÕ bµo Chaetoceros sp. d−íi kÝnh hiÓn vi quang häc víi
®é phãng ®¹i 400 lÇn
41
3.2 H×nh th¸i tÕ bµo Chaetoceros sp. d−íi kÝnh hiÓn vi ®iÖn tö quÐt
(SEM) víi ®é phãng ®¹i 5000 lÇn
41
3.3a H×nh th¸i tÕ bµo Tetraselmis sp. d−íi kÝnh hiÓn vi quang häc víi
®é phãng ®¹i 400 lÇn
42
3.3b H×nh th¸i tÕ bµo Tetraselmis sp. D−íi kÝnh hiÓn vi ®iÖn tö quÐt
(SEM) víi ®é phãng ®¹i 5000 lÇn
42
3.4
KÕt qu¶ t¸ch ADN tæng sè cña loµi Chaetoceros sp. vµ
Tetraselmis sp.
43
3.5
KÕt qu¶ nh©n mét phÇn gen 18S rRNA cña loµi Chaetoceros sp.,
Tetraselmis sp.
44
3.6 KÕt qu¶ t¸ch chiÕt vµ tinh s¹ch ADN plasmit t¸i tæ hîp mang gen
18S rRNA cña loµi Tetraselmis sp. vµ Chaetoceros sp.
45
3.7 S¬ ®å mèi quan hÖ vÒ mÆt di truyÒn gi÷a c¸c loµi thuéc chi
Chaetoceros
46
3.8 S¬ ®å mèi quan hÖ vÒ mÆt di truyÒn gi÷a c¸c loµi thuéc chi
Tetraselmis
48
3.9a MÉu C. muelleri t¹i ngµy ®Æt thÝ nghiÖm l−u gi÷ th¹ch Èm 49
3.9b MÉu C. muelleri sau 1 th¸ng l−u gi÷ th¹ch Èm (09/03/2009) 49
3.10a
MÉu Tetraselmis sp. t¹i ngµy ®Æt thÝ nghiÖm l−u gi÷ th¹ch ©m
(09/02/2009)
49
3.10b MÉu Tetraselmis sp. Sau 1 th¸ng l−u gi÷ th¹ch Èm (09/03/2009) 49
3.11 Tû lÖ sèng sãt cña T. convolutae sau b¶o qu¶n ë - 80oC víi c¸c
nång ®é glycerol kh¸c nhau
50
3.12 Tèc ®é sinh tr−ëng cña C. muelleri theo gi¸ trÞ OD680 trªn c¸c 51
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… ix
m«i tr−êng kh¸c nhau
3.13 Mèi t−¬ng quan gi÷a M§TB vµ gi¸ trÞ OD680 ë C. muelleri 52
3.14 Tèc ®é sinh tr−ëng cña C. muelleri theo gi¸ trÞ OD680 ë c¸c
nång ®é muèi kh¸c nhau
53
3.15 Tèc ®é sinh tr−ëng cña C. muelleri theo gi¸ trÞ OD680 ë nhiÖt
®é kh¸c nhau
54
3.16 Tèc ®é sinh tr−ëng cña C. muelleri theo gi¸ trÞ OD680 ë c¸c
c−êng ®é chiÕu s¸ng kh¸c nhau
54
3.17 Tèc ®é sinh tr−ëng cña C. muelleri ë c¸c gi¸ trÞ pH kh¸c nhau 55
3.18 Tèc ®é sinh tr−ëng cña T. convolutae theo gi¸ trÞ OD680 trªn c¸c
m«i tr−êng nuèi kh¸c nhau
56
3.19 Mèi t−¬ng quan gi÷a M§TB vµ OD680nm 57
3.19 Tèc ®é sinh tr−ëng cña T. convolutae theo gi¸ trÞ OD680 ë c¸c
nång ®é muèi kh¸c nhau
57
3.21 Tèc ®é sinh tr−ëng cña T. convolutae theo gi¸ trÞ OD680 ë nhiÖt
®é kh¸c nhau
58
3.22 Tèc ®é sinh tr−ëng cña T. convolutae theo gi¸ trÞ OD680 ë c¸c
c−êng ®é chiÕu s¸ng kh¸c nhau
59
3.23 Tèc ®é sinh tr−ëng cña T. convolutae theo gi¸ trÞ OD680 ë c¸c
gi¸ trÞ pH kh¸c nhau
60
3.24 Phæ axÝt bÐo cña C. muelleri 63
3.25 Phæ axÝt bÐo cña T. convolutae 64
3.26 Sinh tr−ëng cña T. convolutae ë c¸c thÓ tÝch nu«i 1,5 lÝt vµ 10 lÝt 67
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 1
Më §ÇU
Vi t¶o lµ m¾t xÝch ®Çu tiªn trong chuçi thøc ¨n nªn chóng lµ nguån thøc ¨n
kh«ng thÓ thiÕu cña nhiÒu ®èi t−îng thñy, h¶i s¶n. Vi t¶o ®−îc sö dông ë hÇu hÕt c¸c
giai ®o¹n ph¸t triÓn cña ®éng vËt th©n mÒm, Êu trïng cña gi¸p x¸c vµ c¸ (Brown et
al., 1997; Wikfors vµ Ohno, 2001). Ngoµi ra, chóng cßn ®−îc sö dông ®Ó nu«i sinh
khèi c¸c loµi ®éng vËt phï du (Artemia, Copepoda, lu©n trïng).
HiÖn nay, trªn thÕ giíi ® cã 40 loµi vi t¶o ®−îc sö dông trong nu«i trång thñy
s¶n (NTTS). ¦u ®iÓm cña vi t¶o lµ cã kÝch th−íc phï hîp, dÔ tiªu ho¸, Ýt g©y «
nhiÔm m«i tr−êng, cã thÓ chuyÓn ho¸ trong chuçi thøc ¨n, tû lÖ ph¸t triÓn nhanh, cã
kh¶ n¨ng nh©n nu«i sinh khèi lín, cung cÊp ®Çy ®ñ chÊt dinh d−ìng cÇn thiÕt cho
®éng vËt nu«i. Thµnh phÇn dinh d−ìng cña 40 loµi vi t¶o ®−îc dïng trong NTTS nh−
protein thay ®æi tõ 6-52%; carbohydrate tõ 5-23% vµ lipid tõ 7-23% còng ® ®−îc
c«ng bè (Brown, 2002; Muller et al., 2004). Ngoµi ra, c¸c loµi vi t¶o biÓn (VTB) cßn
giµu c¸c axÝt bÐo kh«ng b o hoµ ®a nèi ®«i (PUFAs) ®Æc biÖt lµ DHA
(docosahexaenoic acid), EPA (eicosapentaenoic acid), AA (arachidonic acid), ®©y lµ
c¸c axÝt bÐo kh«ng b o hoµ rÊt cÇn thiÕt ®èi víi con ng−êi vµ ®éng vËt nu«i
(Crowford, 2000; Kumon et al., 2002; Sijtsma et al., 2004).. C¸c loµi t¶o ®Òu chøa
EPA chiÕm 7-34% tèng sè acid bÐo, t¶o Prymnesiophyceae chøa DHA: 0,2 – 11%
tèng sè acid bÐo vµ Eustigmatophyceae l¹i cã nhiÒu nhÊt AA: 0 – 4% tæng sè acid
bÐo; Líp t¶o Prasinophyceae (Tetraselmis, Micromonas, Pyramimonas) chøa
kho¶ng 4-10% tæng sè acid bÐo lµ DHA hoÆc EPA (Brown et al., 1997).
Chaetoceros muelleri, Tetraselmis sp. lµ mét trong nh÷ng loµi vi t¶o biÓn ®−îc
sö dông lµm thøc ¨n phæ biÕn cho ®éng vËt th©n mÒm hai m¶nh vá, Êu trïng gi¸p
x¸c. §Æc biÖt, chóng cã nguån PUFAs cÇn thiÕt cho sinh tr−ëng vµ ph¸t triÓn cña Êu
trïng (Belay, 1997; Chiou et al., 2001). Chaetoceros muelleri cã chøa EPA chiÕm
®Õn 16,4% tæng sè axÝt bÐo (Fabrice et al., 2003), Tetraselmis sp. cã chøa EPA
trung b×nh kho¶ng 4,8 mg/g träng l−îng kh« (Vishwanath et al., 2006) vµ chóng
th−êng ®−îc nu«i kÕt hîp víi nhau ®Ó cã thÓ bæ sung, hç trî cung cÊp nguån PUFAs
cho c¸c lo¹i Êu trïng trong NTTS.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 2
Tuy vËy, hµm l−îng lipÝd vµ axÝt bÐo cã trong VTB cßn phô thuéc nhiÒu vµo ®iÒu
kiÖn m«i tr−êng, chÕ ®é chiÕu s¸ng, nhiÖt ®é, dinh d−ìng, pH, ®é mÆn (Sukenik and
(Wahnon, 1991, Tzovenis et al., 1997; Zhu et al., 1997) vµ c¶ vµo giai ®o¹n ph¸t
triÓn (Piorreck and Pohl, 1984; Taguchi et al., 1987).
Tuy nhiªn, hiÖn nay c¸c ph−¬ng ph¸p ph©n lo¹i vi t¶o vÉn chñ yÕu dùa vµo ®Æc
®iÓm h×nh th¸i cña chóng. Nh−ng mét sè loµi trong cïng mét chi nÕu chØ quan s¸t
d−íi kÝnh hiÓn vi quang häc l¹i rÊt khã ph©n biÖt do chóng cã kÝch th−íc rÊt nhá vµ
h×nh th¸i tÕ bµo vi t¶o rÊt dÔ bÞ thay ®æi khi ®iÒu kiÖn m«i tr−êng thay ®æi. Do ®ã,
viÖc ph©n lo¹i vi t¶o cÇn c¸c chuyªn gia cã tr×nh ®é cao, ph¶i cã c¸c kÝnh hiÓn vi
hiÖn ®¹i nh− kÝnh hiÓn vi huúnh quang, kÝnh hiÓn vi ®iÖn tö truyÒn qua (TEM) hay
hiÓn vi ®iÖn tö quÐt (SEM) vµ tèn nhiÒu thêi gian. V× vËy, sö dông c¸c kü thuËt sinh
häc ph©n tö ®Ó x¸c ®Þnh vµ ph©n tÝch tr×nh tù nucleotit cña c¸c gen b¶o thñ nh− 18S
rRNA, ITS1-5,8S-ITS2, 28S rRNA (LSU), ® hç trî tÝch cùc cho viÖc ®Þnh tªn khoa
häc c¸c loµi vi t¶o biÓn mét c¸ch chÝnh x¸c h¬n.
MÆt kh¸c, ë n−íc ta hiÖn nay viÖc chñ ®éng s¶n xuÊt thøc ¨n t−¬i sèng lµ VTB
phôc vô cho ®èi t−îng NTTS cßn gÆp nhiÒu khã kh¨n. Nguyªn nh©n chÝnh lµ do ®a
sè c¸c gièng VTB ®−îc sö dông ®Òu cã nguån gèc nhËp ngo¹i nªn ch−a cã ph−¬ng
ph¸p l−u gi÷ gièng thuÇn còng nh− quy tr×nh c«ng nghÖ nu«i ch−a thÝch hîp víi
®iÒu kiÖn khÝ hËu ë ViÖt Nam. V× thÕ, hiÖu qu¶ ®em l¹i ch−a cao, sinh khèi ®¹t ®−îc
thÊp, bÞ t¹p nhiÔm nhiÒu, nguån gièng s¬ cÊp kh«ng chñ ®éng ®−îc. Do vËy, ch−a
khai th¸c hÕt tiÒm n¨ng vÒ vai trß cña vi t¶o còng nh− ch−a ®¸p øng ®−îc nhu cÇu
thùc tÕ cña vi t¶o trong nu«i trång thñy s¶n.
V× thÕ chóng t«i ® ®Ò xuÊt ®Ò tµi: Nghiªn cøu mét sè ®Æc ®iÓm sinh häc
cña loµi Chaetoceros muelleri vµ loµi Tetraselmis sp. ph©n lËp ë ViÖt Nam víi
môc ®Ých øng dông trong nu«i trång thñy s¶n. C«ng viÖc ®−îc thùc hiÖn t¹i Phßng
C«ng nghÖ T¶o, ViÖn C«ng nghÖ Sinh häc, ViÖn Khoa häc vµ C«ng nghÖ ViÖt Nam
víi môc tiªu nghiªn cøu:
* Môc tiªu chung: Nghiªn cøu mét sè ®Æc ®iÓm sinh häc cña loµi Chaetoceros
muelleri vµ loµi Tetraselmis sp. ph©n lËp ë ViÖt Nam víi môc ®Ých øng dông trong
nu«i trång thñy s¶n.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 3
* Môc tiªu cô thÓ:
- Ph©n lËp, l−u gi÷, ®Þnh tªn khoa häc chÝnh x¸c vµ nghiªn cøu c¸c ®Æc ®iÓm sinh
häc cña loµi Chaetoceros muelleri vµ loµi Tetraselmis sp.
- Nh©n nhanh sinh khèi 2 loµi t¶o nµy cã chÊt l−îng dinh d−ìng phï hîp lµm thøc
¨n cho NTTS.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 4
CH¦¥NG 1. TæNG QUAN TµI LIÖU
1.1. T×nh h×nh nghiªn cøu vi t¶o ngoµi n−íc
1.1.1. Kh¸i niÖm vÒ t¶o, vi t¶o
T¶o (algae) lµ nh÷ng thùc vËt bËc thÊp (thùc vËt cã bµo tö, c¬ thÓ kh«ng ph©n
chia thµnh th©n, rÔ, l¸), trong tÕ bµo cã chøa diÖp lôc vµ sèng chñ yÕu ë n−íc
(D−¬ng §øc TiÕn, 1978).
CÊu tróc d¹ng t¶n cña t¶o th−êng gÆp gåm cÊu tróc monat, Palmella, h¹t, sîi,
d¹ng b¶n, èng. T¶o cã ba ph−¬ng thøc sinh s¶n: sinh s¶n sinh d−ìng, v« tÝnh vµ h÷u
tÝnh. T¶o cã kh¶ n¨ng sèng theo h×nh thøc quang tù d−ìng (photoautotrophy) vµ dÞ
d−ìng (heterotrophy). D¹ng trung gian cña hai h×nh thøc trªn lµ t¹p d−ìng
(mixotrophy). ë d¹ng t¹p d−ìng, quang hîp vÉn lµ qu¸ tr×nh c¬ b¶n ®Ó t¹o chÊt h÷u
c¬ cho c¬ thÓ nh−ng trong mét sè tr−êng hîp, t¶o sö dông ®−îc c¶ c¸c chÊt h÷u c¬
cã s½n (Vâ Hµnh, 1996).
T¶o ph©n bè hÕt søc réng r i kh¾p mäi n¬i, tõ ®Ønh nói cao ®Õn d−íi ®¸y biÓn
s©u, thËm chÝ ë c¶ ®é s©u kho¶ng 200 m d−íi biÓn nÕu nh− n−íc biÓn ë ®ã rÊt s¹ch.
Vi t¶o (microalgae) lµ t¶o cã kÝch th−íc hiÓn vi tøc lµ muèn quan s¸t ®−îc chóng
ph¶i sö dông ®Õn kÝnh hiÓn vi. HiÖn nay trªn tr¸i ®Êt cã kho¶ng 20.000 loµi vi t¶o
(D−¬ng §øc TiÕn, 2006) vµ ® cã hµng tr¨m loµi ®−îc thö nghiÖm lµm thøc ¨n,
nh−ng cho ®Õn nay chØ kho¶ng h¬n 40 loµi t¶o ®¬n bµo ®−îc ph©n lËp vµ nu«i cÊy
thuÇn chñng trong c¸c hÖ thèng th©m canh, ®−îc sö dông réng r i lµm thøc ¨n trong
nu«i trång thuû s¶n (NTTS) (Brown, 2002; Muller et al., 2003). Chóng thuéc 8 líp
vµ 32 gièng, cã kÝch th−íc tõ vµi µm ®Õn h¬n 100 µm (Gachon et al., 2007; Phang
vµ Chu, 2004).
* Sinh tr−ëng cña t¶o
Sinh tr−ëng cña t¶o ®−îc nu«i trång trong ®iÒu kiÖn v« trïng ®Æc tr−ng b»ng
®−êng cong sinh tr−ëng cã 5 pha (h×nh 1.1). Trong ®ã phÇn ký hiÖu lµ 1 - ®−îc gäi
lµ pha tiÒm hay pha thÝch nghi. Pha sinh tr−ëng theo hµm sè mò ®−îc ký hiÖu lµ 2.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 5
Trong pha thø hai, mËt ®é tÕ bµo t¨ng theo hµm sè cña thêi gian t, ®Æc tr−ng b»ng
hµm logarit: Ct = C0.e
mt
Víi Ct vµ C0 lµ mËt ®é tÕ bµo t¹i thêi ®iÓm t vµ ban ®Çu (0), t−¬ng øng, vµ m
lµ tèc ®é sinh tr−ëng ®Æc thï. Tèc ®é sinh tr−ëng ®Æc thï cña tõng loµi t¶o sÏ phô
thuéc chñ yÕu vµo loµi t¶o ®ã còng nh− c−êng ®é ¸nh s¸ng vµ nhiÖt ®é.
H×nh 1.1. §−êng cong sinh tr−ëng cña vi t¶o
Pha gi¶m tèc ®é sinh tr−ëng ®−îc ký hiÖu lµ 3. ë pha nµy, sù ph©n chia tÕ bµo
sÏ chËm l¹i khi c¸c chÊt dinh d−ìng, c−êng ®é ¸nh s¸ng, ®é pH, hµm l−îng CO2
hoÆc c¸c yÕu tè lý hãa kh¸c b¾t ®Çu trë thµnh yÕu tè giíi h¹n ®èi víi sù sinh tr−ëng
cña t¶o.
Pha æn ®Þnh ®−îc ký hiÖu lµ 4. ë pha thø t− nµy c¸c yÕu tè giíi h¹n nªu trªn
vµ tèc ®é sinh tr−ëng cña t¶o ®−îc c©n b»ng vµ lµm cho mËt ®é tÕ bµo nh×n chung lµ
t−¬ng ®èi æn ®Þnh, kh«ng thay ®æi.
Pha tµn lôi ®−îc ký hiÖu lµ 5. Trong pha cuèi cïng nµy, chÊt l−îng n−íc xÊu
®i vµ c¸c chÊt dinh d−ìng suy kiÖt tíi møc kh«ng thÓ duy tr× ®−îc sù sinh tr−ëng cña
t¶o. Khi ®ã, mËt ®é tÕ bµo gi¶m m¹nh vµ t¶o chÕt.
1.1.2. T×nh h×nh nghiªn cøu vÒ ph©n lo¹i t¶o
Theo Whitake (1969) ® ®−a ra hÖ thèng ph©n lo¹i 5 giíi, trong ®ã toµn bé
T¶o ®−îc xÕp trong giíi nguyªn sinh. Woese ® ®Ò xuÊt hÖ thèng ph©n lo¹i 5 giíi (vi
khuÈn, cæ khuÈn, nguyªn sinh, nÊm, thùc vËt, ®éng vËt) trong ®ã toµn bé T¶o vÉn
®−îc xÕp trong giíi nguyªn sinh. Sau ®ã, Valtere Evangelista et al., (2007) ® dùa
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 6
trªn c¬ së nÒn t¶ng ph©n lo¹i sinh giíi cña Van Den Hoek et al., (1995) vµ khãa
ph©n lo¹i sinh giíi tr−íc ®ã do Bold vµ Wynne, (1978), Margulis et al., (1990),
Graham vµ Wilcox (2000), Lewin, (2004) ®−a ra ® chia t¶o thµnh nh÷ng ngµnh
kh¸c nhau. Khãa ph©n lo¹i t¶o theo Valtere Evangelista et al., (2007) ®−îc chØ ra ë
b¶ng 1. Trong ®ã, vi t¶o chñ yÕu thuéc vÒ c¸c chi trong c¸c ngµnh nh− sau:
1/ Ngµnh Chlorophyta (T¶o lôc) gåm c¸c chi Closterium, Coelastrum,
Dyctyosphaerium, Scenedesmus, Pediastrum, Staurastrum, Dunaliella,
Chlamydomonas, Haematococcus, Tetraselmis, Chlorella…;
2/ Ngµnh Heterokontophyta (T¶o l«ng roi lÖch) gåm c¸c chi Melosira,
Asterionella, Cymatopleurra, Somphonema, Fragilaria, Stephanodiscus, Navicula,
Malomonas, Dinobryon, Peridinium, Isochrysis, Chaetoceros, Phaeodactylum,
Skeletonema, Nitzschia...;
3- Ngµnh Euglenophyta (T¶o m¾t) gåm c¸c chi Phacus, Trachelomonas, Ceratium...
4- Ngµnh Rhodophyta (T¶o ®á) gåm c¸c chi Porphyridium, Rhodella...;
B¶ng 1.1. Ph©n lo¹i c¸c nhãm ngµnh t¶o (theo Valtere Evangelista et al., 2007)
Giíi Ngµnh Líp
Cyanophyta Cyanophyceae PROKARYOTA
EUBACTERIA Prochlorophyta Prochlorophyceae
Glaucophyta Glaucophyceae
Bangiophyceae
Rhodophyta
Florideophyceae
Chrysophyceae
Xanthophyceae
Eustigmatophyceae
Bacillarophyceae
Raphidophyceae
Dictyochophyceae
Heterokontophyta
Phaeophyceae
Haptophyta Haptophyceae
Cryptophyta Cryptophyceae
Dinophyta Dinophyceae
Euglenophyta Euglenophyceae
Chlorarachniophyta Chlorarachniophyceae
Prasinophyceae
EUKARYOTA
Chlorophyta
Chlorophyceae
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 7
Ulvophyceae
Cladophorophyceae
Bryopsidophyceae
Zygnematophyceae
Trentepohliophyceae
Klebsormidiophyceae
Charophyceae
Dasycladophyceae
HiÖn nay, ph−¬ng ph¸p ph©n lo¹i vi t¶o vÉn chñ yÕu dùa vµo ®Æc ®iÓm h×nh
th¸i. Nh×n chung, c¸c chi ®Òu cã c¸c ®Æc ®iÓm c¬ b¶n vÒ h×nh th¸i ®Ó t¹o dùng kho¸
ph©n lo¹i, nh−ng mét sè loµi trong cïng mét chi nÕu chØ quan s¸t d−íi kÝnh hiÓn vi
th−êng th× rÊt khã ph©n biÖt c¸c ®Æc ®iÓm sai kh¸c v× qu¸ nhá, vµ cÇn ph¶i x¸c ®Þnh
d−íi kÝnh hiÓn vi ®iÖn tö. H¬n n÷a, nhiÒu loµi hoÆc chñng rÊt gièng nhau vÒ mÆt
h×nh th¸i vµ h×nh th¸i cña chóng l¹i cã thÓ bÞ biÕn ®æi khi ®iÒu kiÖn m«i tr−êng thay
®æi.
Bªn c¹nh ®ã, víi sù ph¸t triÓn m¹nh mÏ cña sinh häc ph©n tö ® më ra mét
ph−¬ng ph¸p nghiªn cøu míi lµ ph©n lo¹i häc ph©n tö, cã thÓ dùa trªn sù nghiªn cøu
c¸c gen trong hÖ gen nh©n, hÖ gen cña c¸c bµo quan (ti thÓ vµ lôc l¹p) hoÆc c¸c s¶n
phÈm cña gen (protein, enzym). Mçi lo¹i gen, s¶n phÈm cña gen l¹i phï hîp víi
tõng ®èi t−îng vµ môc ®Ých nghiªn cøu kh¸c nhau. Do ®ã, viÖc lùa chän gen nµo,
lo¹i protein nµo cã ý nghÜa lín ®èi víi sù thµnh c«ng cña mçi nghiªn cøu. Víi
nh÷ng loµi sinh vËt cã quan hÖ gÇn th× ng−êi ta cã thÓ chän nh÷ng gen hay vïng
ADN cã ®é linh ®éng cao (nh− intron hay c¸c ®o¹n ITS - Internal Transcribed
Spacer), nh−ng víi nhãm sinh vËt cã quan hÖ xa th× viÖc chän gen hay vïng ADN cã
®é b¶o tån cao (vÝ dô 18S rRNA, gen m hãa protein) l¹i cã −u thÕ. ViÖc chän gen
hay vïng ADN cã ®é b¶o tån hay ®é biÕn thiªn qu¸ cao sÏ cã thÓ ¶nh h−ëng ®Õn kÕt
qu¶ nghiªn cøu, v× vËy khuynh h−íng hiÖn nay còng lµ khuynh h−íng tèt nhÊt lµ
ng−êi ta kÕt hîp c¶ hai h−íng nµy cho cïng mét nghiªn cøu. Nh×n chung, c¸c kü
thuËt ph©n tÝch ADN vµ protein cã ®ãng gãp rÊt quan träng vµo viÖc ®¸nh gi¸ chÝnh
x¸c tÝnh ®a d¹ng di truyÒn còng nh− cÊu tróc di truyÒn chñng quÇn cña c¸c loµi t¶o.
§ång thêi, c¸c nghiªn cøu ADN vµ protein còng cho phÐp ®¸nh gi¸ vÒ ®Þa lý ph©n
bè chñng lo¹i (loµi, loµi phô, quÇn thÓ), gãp phÇn vµo viÖc ®¸nh gi¸ tÝnh ®a d¹ng
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 8
sinh häc cña t¶o. HiÖn nay, c¸c kü thuËt chØ thÞ ph©n tö ADN ® ®−îc ¸p dông réng
r i trong nghiªn cøu tÝnh ®a d¹ng di truyÒn c¸c loµi còng nh− cÊu tróc quÇn thÓ cña
rÊt nhiÒu loµi t¶o biÓn, t¶o n−íc lî, t¶o n−íc ngät, ®Æc biÖt trong viÖc hç trî ®Þnh tªn
khoa häc cña c¸c loµi VTB (Bhattcharya vµ Medlin, 1998); (Sogin et al., 1986).
Theo h−íng nghiªn cøu nµy, ® cã rÊt nhiÒu c«ng tr×nh ®−îc c«ng bè tõ ®Çu nh÷ng
n¨m 90 ®Õn nay. VÝ dô, c¸c t¸c gi¶ NhËt B¶n ® ®¸nh gi¸ tÝnh ®a d¹ng di truyÒn vµ
quan hÖ ph¸t sinh chñng lo¹i vµ ®Þnh tªn khoa häc cña 9 loµi Prorocentrum dùa trªn
tr×nh tù gen 18S rRNA (Grzebyk vµ Sako., (1998) hay dùa trªn tr×nh tù gen LSU
rRNA, 5,8S vµ c¸c ITS ®Ó ph©n tÝch, ®Þnh tªn khoa häc c¸c loµi thuéc chi
Alexandrium, Anopheles maculatus, Chlorella sp., Skeletonema vµ Dunaliella (Ki
vµ Han., 2006; Walton et al., 2007). NhiÒu t¸c gi¶ kh¸c Scheckenbach et al., (2006);
Muller et al., (2005); Zhang et al., (2006); Lim et al., (2006) còng ® cã mét bµi
tæng quan vÒ sö dông c¸c kü thuËt sinh häc ph©n tö trong nghiªn cøu ph©n lo¹i t¶o
biÓn nãi chung. C¸c ph−¬ng ph¸p ph©n lo¹i vi t¶o dùa trªn c¸c ®Æc ®iÓm h×nh th¸i ®
cã mét sè h¹n chÕ nh−: do kÝch th−íc tÕ bµo rÊt nhá vµ h×nh th¸i tÕ bµo vi t¶o rÊt dÔ
dµng bÞ thay ®æi khi ®iÒu kiÖn m«i tr−êng thay ®æi nªn ®ßi hái ng−êi ph©n lo¹i ph¶i
lµ c¸c chuyªn gia cã tr×nh ®é cao, ph¶i cã c¸c kÝnh hiÓn vi hiÖn ®¹i nh− kÝnh hiÓn vi
huúnh quang, hiÓn vi ®iÖn tö truyÒn qua (TEM) hay hiÓn vi ®iÖn tö quÐt (SEM), rÊt
tèn thêi gian. Do vËy, ®Ó th¸o gì nh÷ng h¹n chÕ cña ph−¬ng ph¸p ph©n lo¹i dùa trªn
c¸c ®Æc ®iÓm h×nh th¸i nªu trªn, c¸c kü thuËt sinh häc ph©n tö nh− ®äc vµ so s¸nh
tr×nh tù nucleotit cña c¸c gen b¶o thñ nh− 18S rRNA, ITS1-5,8S-ITS2, 28S rRNA
(LSU)… ® hç trî tÝch cùc cho viÖc ®Þnh tªn khoa häc mét c¸ch chÝnh x¸c h¬n c¸c
loµi VTB.
1.1.3. T×nh h×nh nghiªn cøu vÒ vai trß, gi¸ trÞ dinh d−ìng cña vi t¶o
* Vai trß chung cña vi t¶o ®èi víi con ng−êi vµ ®éng vËt
Trong tù nhiªn, vi t¶o lµ m¾t xÝch ®Çu tiªn trong chuçi thøc ¨n nªn chóng lµ
nguån thøc ¨n kh«ng thÓ thiÕu cña nhiÒu ®èi t−îng thuû s¶n ë hÇu hÕt c¸c giai ®o¹n
ph¸t triÓn cña nhuyÔn thÓ, giai ®o¹n Êu trïng cña gi¸p x¸c vµ c¸. Ngoµi ra, chóng
cßn ®−îc sö dông ®Ó nu«i sinh khèi ®éng vËt phï du (lu©n trïng, copepod, artemia)
lµm thøc ¨n cho c¸c giai ®o¹n Êu trïng cña gi¸p x¸c vµ c¸.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 9
Víi ®Æc tr−ng vÒ thµnh phÇn dinh d−ìng, VTB ®ang lµ mèi quan t©m lín
trong ph¸t triÓn th−¬ng m¹i ho¸ s¶n phÈm c«ng nghÖ sinh häc vi t¶o nh− lµ thùc
phÈm chøc n¨ng cho ng−êi vµ ®éng vËt, ®Æc biÖt lµ thøc ¨n cho ngµnh NTTS. Hµng
lo¹t c¸c nghiªn cøu vÒ ®a d¹ng vµ øng dông cña vi t¶o, th−¬ng m¹i ho¸ s¶n phÈm
astaxanthin tõ Haematococcus, carotenoid tõ Dunalliela, Spirulina hay nghiªn cøu
vÒ ¶nh h−ëng cña s¾c tè nµy lªn tû lÖ sèng sãt vµ sinh tr−ëng cña Êu trïng cña t«m
Penaeus monodon ® ®−îc th«ng b¸o. Vanitha et al., (2007) vµ Murthy et al.,
(2005) ® c«ng bè viÖc sö dông VTB trong NTTS nh− lµ nguån thøc ¨n t−¬i sèng vµ
nh©n t¹o cho nu«i Êu trïng t«m, Farfantepenaeus aztecus vµ dïng thøc ¨n tõ vi t¶o
nh− Liqualife, Epifeed, Zeigler E-Z Larvae, Zeigler- Z-Plus and Zeigler- E-Z
Artemia thay thÕ tõng phÇn thøc ¨n Artemia nauplii trong viÖc s¶n xuÊt Êu trïng
t«m F. Aztecus. C¸c nghiªn cøu s©u vÒ dinh d−ìng, kh¶ n¨ng tiªu ho¸ vµ nu«i trång
sinh khèi vi t¶o cho nu«i trång Êu trïng c¸ biÓn vµ ®éng vËt th©n mÒm hai m¶nh vá
® ®−îc tiÕn hµnh nghiªn cøu.
* Gi¸ trÞ dinh d−ìng cña vi t¶o
¦u ®iÓm cña vi t¶o lµ cã kÝch th−íc phï hîp, dÔ tiªu ho¸, Ýt g©y « nhiÔm m«i
tr−êng, kh«ng cã ®éc tè, cã thÓ chuyÓn ho¸ trong chuçi thøc ¨n, cã tû lÖ ph¸t triÓn
nhanh, cã kh¶ n¨ng nu«i sinh khèi lín, cung cÊp ®Çy ®ñ chÊt dinh d−ìng cÇn thiÕt
cho ®éng vËt nu«i. N¨m 1999, s¶n phÈm tõ vi t¶o sö dông trong NTTS ®¹t 1000 tÊn
(trong ®ã 62% cho ®éng vËt th©n mÒm, 21% cho t«m vµ 16% cho c¸). Becker (2004)
® c«ng bè vÒ thµnh phÇn dinh d−ìng cña h¬n 40 loµi vi t¶o vµ øng dông cña chóng
trong NTTS.
Nh×n chung, hµm l−îng protein cña vi t¶o dïng trong NTTS thay ®æi tõ 6-52%
träng l−îng kh« (TLK), carbohydrate: 5-23%, vµ lipit: 7-23% (Brown, 2002; Muller
et al., 2004). TÊt c¶ c¸c loµi vi t¶o cã thµnh phÇn axit amin t−¬ng tù nhau, giµu c¸c
axit amin kh«ng thay thÕ vµ kh«ng b._.Þ thay ®æi nhiÒu trong c¸c pha ph¸t triÓn vµ ®iÒu
kiÖn chiÕu s¸ng. Do vËy, sù kh¸c nhau vÒ chÊt l−îng protein lµ mét nh©n tè t¹o nªn
sù kh¸c nhau vÒ gi¸ trÞ dinh d−ìng cña c¸c loµi vi t¶o. Polysaccharides cña vi t¶o cã
biÕn ®éng vÒ thµnh phÇn ®−êng, trong ®ã hµm l−îng vÒ glucoza cao, ®¹t tõ 21 ®Õn
87%. Thµnh phÇn axit bÐo kh«ng b o hoµ ®a nèi ®«i (polyunsaturated fatty acids –
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 10
PUFA) chñ yÕu lµ EPA (C20:5 n-3), AA (20:4n-6), DHA (C22:6 n-3) vµ DPA
(C22:5 n-3). §©y lµ nh÷ng PUFA cã vai trß quan träng ®èi víi ®éng vËt còng nh−
con ng−êi. VÝ dô, DHA cã vai trß rÊt quan träng ®èi víi ho¹t ®éng cña n o vµ m¾t
vµ lµm cho vi t¶o cã gi¸ trÞ dinh d−ìng v« cïng quan träng cho c¸c ®èi t−îng nu«i
biÓn, ®Æc biÖt lµ trong giai ®o¹n ph¸t triÓn cña Êu trïng vµ víi c¸ biÓn.
TÊt c¶ vi t¶o ®Òu cã hµm l−îng cao vÒ axit ascorbic (chiÕm 1-16 mg/g TLK)
vµ riboflavin (chiÕm 20 – 40 µg/g). Vi t¶o cã hµm l−îng vitamin cao ®−îc sö dông
trong NTTS nh− Nannochloropsis atomus, Nannochloropsis oculata,
Nannochloropsis sp., Pavlova lutheri, Pavlova pinguis, Stichococcus sp.,
Chaetoceros muelleri, Thalassiosira pseudonana, Isochrysis sp. (T. ISO) vµ
Tetraselmis sp. ® ®−îc c«ng bè. KÕt qu¶ thu ®−îc ® cho phÐp ®Þnh ra tiªu chuÈn
vÒ hµm l−îng vitamin trong thøc ¨n t−¬i sèng dïng trong NTTS. Vi t¶o cßn cã hÇu
hÕt c¸c lo¹i vitamin quan träng, ®¸p øng nhu cÇu dinh d−ìng cña ®éng vËt nu«i nh−
B1, B2, B6, B12, vitamin H, C, E, K vµ tiÒn vitamin A. Thµnh phÇn c¸c vitamin gi÷a
c¸c loµi vi t¶o lµ kh¸c nhau. Møc ®é thay ®æi cao nhÊt lµ axit ascorbic, kho¶ng 16
lÇn (tõ 1 ®Õn 16 mg/g TLK). Víi c¸c lo¹i vitamin kh¸c, th× nång ®é cña chóng kh¸c
nhau tõ 2 ®Õn 4 lÇn gi÷a c¸c loµi vi t¶o (Brown, 2002).
Sù kh¸c nhau vÒ hµm l−îng sterols, kho¸ng, s¾c tè còng cã thÓ gãp phÇn t¹o
nªn sù kh¸c nhau vÒ mÆt dinh d−ìng cña c¸c VTB. Mçi mét loµi t¶o ®Òu cã thÓ thiÕu
Ýt nhÊt mét thµnh phÇn dinh d−ìng cÇn thiÕt, vÝ dô nh− I. galbana cã nhiÒu DHA Ýt
EPA ng−îc l¹i t¶o khuª cã nhiÒu EPA vµ Ýt DHA. Vi t¶o cã hµm l−îng PUFAs
(EPA, DHA) dao ®éng tõ 1-20 mg/mL tÕ bµo ®−îc xem lµ thÝch hîp cho sù sinh
tr−ëng cña nhuyÔn thÓ, nÕu hµm l−îng nµy thÊp h¬n 0,5 mg/mL tÕ bµo th× ®−îc coi
lµ thøc ¨n nghÌo dinh d−ìng. Cßn ®èi víi gi¸p x¸c nhu cÇu nµy ®Òu rÊt cÇn thiÕt vµ
tuú thuéc vµo tõng loµi. ë t«m he NhËt B¶n (Penaeus japonicus), thøc ¨n chøa
kho¶ng 1% EPA vµ DHA lµ phï hîp cho sinh tr−ëng vµ cã vai trß quan träng trong
qu¸ tr×nh biÕn ®æi sinh lý cña c¬ quan sinh s¶n vµ tæng hîp c¸c hormone sinh s¶n.
Trong khi nhu cÇu nµy ë c¸ biÓn tõ 1-2% TLK thøc ¨n. V× vËy, viÖc chän lùa vµ sö
dông hçn hîp c¸c loµi VTB lµm thøc ¨n cho ®èi t−îng thñy s¶n sÏ cung cÊp ®Çy ®ñ
c¸c thµnh phÇn dinh d−ìng cÇn thiÕt cho sù ph¸t triÓn vµ ®em l¹i hiÖu qu¶ cao h¬n.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 11
C¸c loµi VTB cã ®Æc tÝnh dinh d−ìng tèt ®−îc sö dông riªng rÏ hoÆc kÕt hîp, bao
gåm: Chaetoceros calcitrans, Chaetoceros muelleri, Pavlova lutheri, Isochrysis sp.
(T. ISO), Tetraselmis suecica, Skeletonema costatum vµ Thalassiosira pseudonana
(Brown, 2002).
1.1.4. T×nh h×nh nghiªn cøu øng dông vi t¶o
* øng dông trong nu«i trång thñy s¶n
ë Hoa Kú, c¸c loµi Thalasiossira pseudomonas, Skeletonema, Chaetoceros
calcitrans, Chaetoceros muelleri, Nannochloropsis oculata, Chlorella
minutissima... ®−îc nu«i ®Ó lµm thøc ¨n cho lu©n trïng, Êu trïng hai m¶nh vá, Êu
trïng t«m vµ c¸ theo ph−¬ng ph¸p tõng mÎ hoÆc b¸n liªn tôc trong nh÷ng bÓ
composite 2.000- 25.000 lÝt. ë Hawaii, n¨ng suÊt loµi Nannochloropsis ®¹t kho¶ng
2,2 triÖu lÝt/n¨m.
ë §µi Loan, c¸c ®èi t−îng nu«i chÝnh lµ Tetraselmis, Nannochloropsis
oculata, Chlorella sp. dïng cho −¬ng nu«i Êu trïng hä t«m he (Penaeus), Isochrysis
galbana trong −¬ng nghªu. Riªng loµi Skeletonema tonemacostatum, s¶n l−îng nu«i
cã thÓ ®¹t tíi 9.000 tÊn/ n¨m (b¶ng 1.2).
B¶ng 1.2. Mét sè loµi vi t¶o ®−îc sö dông phæ biÕn trong NTTS (Brown, 2002;
trÝch theo NguyÔn ThÞ Xu©n Thu, 2004; Susana Rivero-RodrÝguez et al., 2007).
ChÊt dinh d−ìng (%
tæng axit bÐo)
Møc ®é sö dông cho nu«i
Loµi
KÝch
cì
(µm) DHA ARA EPA BV AT– T J – A §VPD
Isochrysis
galbana
3 x 5 26,8 + + + + +
Isochrysis sp. 3 x 5 + + + + +
Pavlova lutheri 4 x 6 + + + + +
Chaetoceros
muelleri
5 - 8
2,6 3,0 36,8 + + + + +
Chaetoceros
calcitrans
3 - 6
2,3 11,3 26,3 + + + +
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 12
Thalassiosira
pseudonana
4 - 5
+ +
Skeletonema
costatum
10 x 5
+ + +
Tetraselmis
sucecia
15 x19
2,1 8,4 + + + +
Rhodomonas
salina
8 - 12
+
Pyramimonas
spp.
6 +
Navicula spp. 12 x 4 + + + +
Nitzschia spp. 30 x 5 + + +
Nannochloropsis
spp.
3 x 2
0-4 + + + +
Ghi chó: Møc ®é sö dông t¶o cho nu«i BV: Bivalvia; AT – T: Êu trïng t«m; J – A:
Bµo ng− con; §VPD: §éng vËt phï du; + +: rÊt phæ biÕn; +: phæ biÕn.
Theo kÕt qu¶ nghiªn cøu cña Spolaore et al., (2006) cho thÊy vi t¶o cßn h¹n chÕ
sù ph¸t triÓn cña vi khuÈn trong bÓ nu«i, ®Æc biÖt lµ c¸c loµi thuéc nhãm Vibrio -
th−êng lµ t¸c nh©n c¬ héi g©y bÖnh. VÝ dô Tetraselmis suecica h¹n chÕ vi khuÈn
g©y bÖnh cho c¸ (Austin et al., 1992).
- Trong nu«i sinh khèi lu©n trïng
Lu©n trïng Brachionus rotundiformis vµ B. plicatilis lµ nguån thøc ¨n kh«ng
thay thÕ cho giai ®o¹n ®Çu cña Êu trïng nhiÒu loµi c¸ biÓn. ViÖc ®¸p øng ®ñ sinh
khèi lu©n trïng ®¹t chÊt l−îng dinh d−ìng cho c¸c bÓ −¬ng Êu trïng lµ viÖc lµm
kh«ng dÔ cho c¸c tr¹i s¶n xuÊt gièng. VTB lµ nguån thøc ¨n tuyÖt vêi nhÊt trong
nu«i sinh khèi lu©n trïng ®Ó ®¹t n¨ng suÊt vµ cho lu©n trïng chÊt l−îng dinh d−ìng
cao nhÊt, chóng cã thÓ tham gia ®iÒu chØnh thµnh phÇn lipit vµ c¸c axit bÐo cña lu©n
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 13
trïng tr−íc khi chóng trë thµnh thøc ¨n cho Êu trïng v× thµnh phÇn axit bÐo cña lu©n
trïng cã liªn quan mËt thiÕt víi thøc ¨n.
- Trong nu«i c¸ biÓn
Vi t¶o ®−îc ®−a trùc tiÕp vµo bÓ −¬ng Êu trïng cña nhiÒu loµi c¸ biÓn b»ng kü
thuËt nu«i “n−íc xanh”. §èi víi Êu trïng c¸ biÓn, kh«ng gièng nh− nhuyÔn thÓ vµ Êu
trïng gi¸p x¸c, chóng kh«ng trùc tiÕp ¨n vi t¶o mµ ®−îc cung cÊp dinh d−ìng th«ng
qua c¸c ®èi t−îng ®éng vËt phï du lµm thøc ¨n nh− Copepod, Rotifer, Artemia. Gi¸
trÞ dinh d−ìng cña c¸c ®èi t−îng nµy phô thuéc chñ yÕu vµo nguån thøc ¨n chÝnh lµ
vi t¶o. VÝ dô nh− nu«i Rotifer b»ng Dunaliella tertiolecta (Ýt PUFA) th× chøa Ýt hµm
l−îng PUFA trong c¬ thÓ, ng−îc l¹i nÕu nu«i b»ng Pavlova lutheri (giµu PUFA) th×
còng giµu PUFA trong c¬ thÓ cña chóng. Dùa vµo cì måi cña ®éng vËt nu«i mµ c¸c
loµi t¶o ®−îc lùa chän nu«i sinh khèi lµm thøc ¨n th−êng cã kÝch th−íc tõ 2 - 20 µm
vµ cho ®éng vËt phï du tèt nhÊt tõ 2 - 12 µm (Mulller et al., 2003).
ViÖc bæ sung t¶o Isochrysis galbana víi mËt ®é 2 v¹n tÕ bµo/ml ® n©ng tèc ®é
sinh tr−ëng cña Êu trïng c¸ chÏm nu«i b»ng thøc ¨n tæng hîp lªn 40% vµ t¨ng 26%
tû lÖ sèng.
- Trong nu«i t«m
Trong sè 14 loµi t¶o thö nghiÖm lµm thøc ¨n cho Êu trïng t«m, kÕt qu¶ cho
thÊy Êu trïng t«m biÓn: t«m só (Penaeus monodon), t«m thÎ (P. merguiensis, P.
indicus, P. japonicus) ¨n c¸c loµi t¶o Chaetoceros muelleri, C. calcitrans,
Skeletonema costatum, Rhodomonas baltica, Tetraselmis suecica, Isochrysis sp. cho
tû lÖ sèng vµ tèc ®é t¨ng tr−ëng lín nhÊt (Muller et al., 2003). Vi t¶o biÓn lµm thøc
¨n trùc tiÕp cho Êu trïng t«m biÓn, sè l−îng gi¶m dÇn theo tËp tÝnh cña Êu trïng t«m
tõ ¨n thùc vËt: giai ®o¹n Zoea (herbivorous) sang ¨n ®éng vËt (carnivorous): Mysis,
Postlarvae. Ngoµi ra vi t¶o cßn æn ®Þnh chÊt l−îng n−íc cña bÓ nu«i.
NhiÒu nghiªn cøu kh¸c cßn cho thÊy hiÖu qu¶ tÝch cùc cña vi t¶o khi bæ sung vµo
bÓ nu«i t«m vµ c¸ ®ã lµ kÝch thÝch kh¶ n¨ng b¾t måi cña Êu trïng do chóng tiÕt ra
chÊt hÊp dÉn (Muller et al., 2005) vµ cã ¶nh h−ëng ®Õn hÖ vi khuÈn trong bÓ nu«i vµ
thiÕt lËp hÖ vi khuÈn trong ruét Êu trïng (Skjermo vµ Vadstein., 1993; Laven vµ
Sorgeloos., 1996)
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 14
Ngoµi vai trß lµm thøc ¨n cung cÊp dinh d−ìng cho ®èi t−îng thuû s¶n, vi t¶o
cßn cã t¸c dông kÝch thÝch enzyme tiªu ho¸ cña Êu trïng t«m só (chñ yÕu lµ trypsin)
n©ng cao tèc ®é t¨ng tr−ëng (Brown., 2002).
- Trong nu«i ®éng vËt th©n mÒm
Vi t¶o lµ nguån thøc ¨n cho tÊt c¶ c¸c giai ®o¹n cña mét sè loµi nhuyÔn thÓ:
Nghªu, hÇu, sß, ®iÖp, èc h−¬ng, bµo ng−... N¨m 1986, Dinet et al., ® thö nghiÖm 50
loµi vi t¶o biÓn kh¸c nhau lµm thøc ¨n cho ®éng vËt hai m¶nh vá vµ ® chän ra 12
loµi ®−îc øng dông réng r i cho c¸c tr¹i s¶n xuÊt ®éng vËt th©n mÒm. Trong ®ã, c¸c
loµi Isochrrysis galbana, Isochrysis sp., Pavlova lutheri, Nannonchloropsis oculata,
Tetraselmis suecica, Chaetoceros gracilis, C. calcitrans, Skeletonema costatum
®−îc sö dông phæ biÕn nhÊt víi tÇn sè sö dông tõ 40 - 80% c¸c tr¹i s¶n xuÊt (Muller
et al., 2003).
Theo Susana Rivero-Rodrisguez et al., (2007) nghiªn cøu vÒ ¶nh h−ëng cña khÈu
phÇn ¨n vi t¶o lªn sinh tr−ëng, thµnh phÇn sinh ho¸ vµ axÝt bÐo Êu trïng HÇu
Crassostrea cortezinensis (Hertlein) ® cho thÊy khi hÇu ¨n t¶o Chaetocerros
calcitrans (186,1 ± 1,45 mg/ngµy) cho tèc ®é sinh tr−ëng cao nhÊt tiÕp ®Õn lµ hçn
hîp C. calcitrans + C. muelleri (159,1 ± 41,5 mg/ngµy) vµ C. muelleri (93,2 ±
16,1mg/ngµy). Thµnh phÇn sinh ho¸ cña Êu trïng hÇu khi ¨n C. muelleri vµ
Tetraselmis suecica cã hµm l−îng cacbonhydrat ®¹t 0,26%, 0,25%; protein 2,03%,
1,89%; lipÝt tæng sè 0,20%, 0,20% khèi l−îng t−¬i, t−¬ng øng.
* øng dông sö dông vi t¶o trong dinh d−ìng cho con ng−êi vµ ®éng vËt
Cho ®Õn nay, viÖc sö dông sinh khèi vi t¶o lµm nguån bæ sung dinh d−ìng cho
ng−êi chØ giíi h¹n ë mét sè nhãm nh− Spirulina, Chlorella, Dunaliella vµ mét phÇn
nhá lµ Nostoc vµ Aphanizomeron bëi nh÷ng quy chÕ vÒ an toµn thùc phÈm. Tuy
nhiªn viÖc cho phÐp sö dông loµi t¶o biÓn Odonella aurita do c«ng ty INNOVALG
cña Ph¸p s¶n xuÊt nh− mét lo¹i thùc phÈm míi ® t¹o thuËn lîi lín cho c«ng nghÖ
sinh häc vi t¶o. Trong mét vµi n¨m tíi, thÞ tr−êng thùc phÈm chøc n¨ng ®−îc dù
®o¸n sÏ lµ thÞ tr−êng s«i ®éng nhÊt vµ cã thÓ chiÕm tíi 20% trong ngµnh c«ng
nghiÖp thùc phÈm. Sinh khèi hoÆc dÞch chiÕt cña t¶o Spirulina, Chlorella,
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 15
Dunaliella ® ®−îc sö dông trong nhiÒu s¶n phÈm cung cÊp cho con ng−êi nh− mú
èng, b¸nh mú, s÷a chua, bia vµ c¸c ®å uèng nhÑ ë nhiÒu quèc gia trªn thÕ giíi nh−
§øc, Ph¸p, NhËt B¶n, Mü, Trung Quèc vµ Th¸i Lan (Gross vµ Pulz, 2004).
Bªn c¹nh ®ã, viÖc sö dông vi t¶o lµm thøc ¨n cho ®éng vËt ® thu ®−îc nhiÒu kÕt
qu¶ ®¸ng kÓ. § cã nh÷ng b»ng chøng chØ ra r»ng chØ víi mét l−îng nhá sinh khèi
vi t¶o cña mét sè loµi thuéc chi Spirulina, Chlorella ® cã nh÷ng t¸c ®éng tÝch cùc
lªn sinh lý cña c¸, t«m. Sè l−îng c¸ thö nghiÖm dïng sinh khèi vi t¶o bæ sung vµo
khÈu phÇn thøc ¨n cña gia cÇm ®−îc xem lµ cã triÓn väng nhÊt trong viÖc øng dông
vi t¶o lµm nguån thøc ¨n bæ sung cho ®éng vËt (Gross vµ Pulz, 2004).
Theo Gachon et al., (2007) ® c«ng bè tËp ®oµn gièng t¶o cña Malaysia gåm
150 loµi víi kh¶ n¨ng øng dông cña chóng trong viÖc khai th¸c chÊt cã ho¹t tÝnh
sinh häc nh− PUFA, carotenoit, phycobiliprotein, sö dông trong xö lý n−íc th¶i
c«ng nghiÖp nh− n−íc th¶i s¶n xuÊt cao su, dÇu cä, s¶n xuÊt thùc phÈm, sö dông vi
t¶o lµm chØ thÞ sinh häc cho « nhiÔm kim lo¹i nÆng, giµu nit¬ trong n−íc sinh ho¹t,
lµm thøc ¨n cho nu«i trång thuû s¶n vµ gia cÇm.
- Khai th¸c c¸c ho¹t chÊt tõ vi t¶o
HiÖn nay, c¸c s¶n phÈm vµ dÞch chiÕt tõ sinh khèi vi t¶o ® cã mét vÞ trÝ
nhÊt ®Þnh trªn thÞ tr−êng. Vi t¶o ®−îc coi lµ nguån tiÒm n¨ng trong viÖc khai th¸c
c¸c ho¹t chÊt cã ho¹t tÝnh sinh häc nh− PUFAs, chÊt chèng oxi ho¸, c¸c protein c¶m
øng nhiÖt, vitamin, c¸c s¾c tè.
* Axit bÐo kh«ng b o hoµ
Vi t¶o chøa nhiÒu chÊt bÐo víi hµm l−îng rÊt cao dao ®éng trong kho¶ng tõ
20 - 40% TLK. Nguån PUFAs t¸ch tõ vi t¶o ®ang ®−îc coi lµ lîi thÕ h¬n so víi c¸c
nguån truyÒn thèng nh− dÇu c¸ v× kh«ng cã mïi khã chÞu hay sù tÝch luü c¸c kim
lo¹i nÆng. ë Ch©u ¢u, c¸c PUFAs t¸ch tõ vi t¶o ® ®−îc tinh chÕ vµ bæ sung vµo s÷a
bét cho trÎ. C¸c lo¹i mü phÈm cã chøa lipit d¹ng kem hoÆc d¹ng dung dÞch víi hai
t¸c dông võa b¶o vÖ vµ ch¨m sãc da ®ang dÇn chiÕm lÜnh ®−îc thÞ tr−êng (Gross vµ
Pulz, 2004).
* ChÊt chèng oxi ho¸
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 16
Vi t¶o còng gièng nh− c¸c thùc vËt bËc cao, cã kh¶ n¨ng thÝch nghi víi c¸c
®iÒu kiÖn sèng kh¾c nghiÖt cña m«i tr−êng. HÇu hÕt c¸c vi t¶o lµ sinh vËt quang tù
d−ìng, th−êng xuyªn chÞu t¸c ®éng cña ¸nh s¸ng m¹nh, l−îng oxi cao vµ c¸c yÕu tè
bÊt lîi kh¸c. Do vËy, ®Ó thÝch nghi vµ tån t¹i, c¸c hÖ thèng b¶o vÖ c¬ thÓ ®−îc cñng
cè, nh»m chèng l¹i qu¸ tr×nh oxi ho¸ vµ c¸c yÕu tè g©y stress. C¬ chÕ b¶o vÖ ë vi t¶o
cho phÐp ng¨n chÆn sù tÝch luü c¸c gèc tù do vµ c¸c ph¶n øng oxi ho¸. Nhê vËy nã
cã thÓ chèng l¹i nh÷ng t¸c ®éng g©y h¹i ®Õn tÕ bµo. C¸c vitamin, superoxy
dismutase, catalaza vµ glutation peoxydase. Dunaliella salina, Haematococcus
pluvialis vµ Porphyridium cruentum ®ang lµ nguån khai th¸c β- caroten, astaxanthin
vµ superoxy dismutase (SOD).
* øng dông kh¸c cña vi t¶o
- øng dông vµo viÖc xö lÝ « nhiÔm n−íc th¶i
¤ nhiÔm n−íc th¶i ®ang lµ vÊn ®Ò cÊp thiÕt vµ cÇn ®−îc xö lÝ ®Ó b¶o vÖ, duy tr×
cuéc sèng l©u bÒn cña con ng−êi. ViÖc t¸ch c¸c t¸c nh©n g©y « nhiÔm tõ n−íc th¶i
tr−íc khi ®æ vµo m«i tr−êng chÝnh lµ môc tiªu cña quy tr×nh xö lÝ.
Vi t¶o ® ®−îc sö dông trong nh÷ng lÜnh vùc sau: Hå oxy ho¸, xö lÝ kim lo¹i
nÆng...
- øng dông vi t¶o trong viÖc t¹o nguån n¨ng l−îng s¹ch
Nguån n¨ng l−îng mµ chóng ta sö dông hiÖn nay xuÊt ph¸t tõ c¸c lo¹i nhiªn liÖu
má kh«ng t¸i sinh nh− dÇu má, than ®¸, khÝ tù nhiªn. Mét gi¶i ph¸p hÊp dÉn ®Ó thay
thÕ nguån dÇu háa vµ than ®¸ lµ sö dông sinh khèi t¶o th«ng qua qu¸ tr×nh quang
hîp. Sinh khèi nµy cã kh¶ n¨ng t¸i t¹o ®−îc vµ sö dông chóng lµm nguån nhiªn liÖu
kh«ng g©y ra hiÖu øng t¨ng CO2 cña khÝ quyÓn.
Mét sè vi t¶o ®−îc coi lµ nguån s¶n xuÊt c¸c nhiªn liÖu cã n¨ng l−îng cao nh−
glycerol, lipit, izoprenoid, H2. Mét sè øng dông nh−: s¶n xuÊt metan tõ sinh khèi
t¶o, s¶n xuÊt Ethanol vµ dÇu löa tõ glycerol. Hydrocacbon còng ®−îc s¶n xuÊt chñ
yÕu lµ tõ vi t¶o, c¸c isoprenoit víi ph©n tö l−îng thÊp (<16) cã thÓ ®−îc dïng trùc
tiÕp lµm nhiªn liÖu láng trong khi c¸c ph©n tö cã ph©n tö l−îng lín rÊt dÔ chuyÓn
sang nhiªn liÖu láng th«ng qua ho¹t ®éng cña chÊt xóc t¸c phï hîp. Vi t¶o
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 17
Botrycoccus braunii lµ loµi s¶n xuÊt hydrocarbon ®iÓn h×nh víi hiÖu suÊt tíi 86%
TLK (trÝch theo §Æng §×nh Kim, 1999).
+ S¶n xuÊt methan
N¨ng l−îng mÆt trêi cã thÓ ®−îc khai th¸c ®Ó s¶n xuÊt methan (CH4) th«ng qua
ho¹t ®éng phèi hîp gi÷a t¶o vµ vi khuÈn. Sinh khèi t¶o ®−îc s¶n xuÊt ®¹i trµ nhê
quang hîp, sau ®ã thu vµ s¶n xuÊt methan th«ng qua qu¸ tr×nh lªn men kþ khÝ. Mét
sè loµi t¶o ®−îc sö dông thµnh c«ng ®Ó s¶n xuÊt methan nh− hçn hîp Scenedesmus
spp. + Chlorella spp. + Scenedesmus spp. + Chlorella spp. + Euglena spp. +
Oscillatoria spp. + Synechocytis spp…. S¶n phÈm chÝnh cña qu¸ tr×nh lªn men kÞ
khÝ sinh khèi t¶o lµ Methan vµ CO2 víi tû lÖ t−¬ng øng lµ 70 : 30.
+ S¶n xuÊt ethanol vµ dÇu löa tõ glycerol
Sinh khèi Dunaliella cã thÓ thu ®−îc glycerol, trong ®iÒu kiÖn nu«i trång tèi −u
ng−êi ta cã thÓ thu ®−îc 8 gram glycerol/m2. Glycerol cã thÓ sö dông ®Ó s¶n xuÊt
ethanol vµ dÇu löa. Ethanol ®ang ®−îc dïng ®Ó thay thÕ x¨ng dÇu ë Brazil, trong khi
ë mét sè vïng cña Mü ng−êi ta bæ sung ethanol vµo x¨ng ®Ó t¹o hçn hîp gasohol.
Qu¸ tr×nh lªn men glycerol nhê vi khuÈn Bacillus cã thÓ ®¹t hiÖu suÊt ethanol :
axetat lµ 92 : 8.
+ S¶n xuÊt hydrogen (H2)
C¬ chÕ ®Ó s¶n xuÊt Hydrogen ®−îc tiÕn hµnh th«ng qua c¸c c¬ chÕ: sö dông
enzim nitrogenase cña t¶o lam hoÆc enzim hydrogenase cã mÆt trong ®a sè c¸c loµi
t¶o. Ho¹t tÝnh cña nitrogenase ®−îc ph¸t hiÖn trong h¬n 125 chñng t¶o lam, c¶ ë
d¹ng cã vµ kh«ng cã tÕ bµo dÞ h×nh.
ViÖc s¶n xuÊt H2 ngoµi ¸nh s¸ng ®−îc thùc hiÖn ë nhiÒu loµi t¶o lôc, t¶o lam, t¶o
m¾t vµ t¶o ®á. Tuy vËy c¸c nhiªn liÖu tõ sinh khèi t¶o khã cã thÓ thay thÕ hoµn toµn
x¨ng dÇu hoÆc khÝ tù nhiªn v× gi¸ thµnh s¶n xuÊt nã cßn rÊt cao. Nh−ng cho dï chØ
giíi h¹n ë møc ®é lµ nguån nhiªn liÖu bæ sung th× chóng vÉn cã mét vai trß quan
träng trong viÖc h¹n chÕ g©y « nhiÔm m«i tr−êng.
1.1.5. T×nh h×nh nghiªn cøu vÒ l−u gi÷, b¶o qu¶n vµ nu«i trång vi t¶o
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 18
T×nh h×nh nghiªn cøu vÒ l−u gi÷, b¶o qu¶n vµ nu«i trång vi t¶o ®−îc chØ ra
trªn b¶ng 1.3 (Nguån: Taylor R.,& Fletcher RL., 1999 trÝch theo Kim ThÞ Thoa,
2004).
B¶ng 1.3. T×nh h×nh nghiªn cøu vÒ l−u gi÷, b¶o qu¶n vi t¶o
T¸c gi¶ Tảo Chất bảo quản Thời gian
c©n bằng
Tỷ lệ sống sãt
Holm –
Hansen.,
1963
Chlorophyceae Kh«ng sử dụng Kh«ng x¸c
ñịnh
0-30%
Leibo &
Jones., 1963
Porphyridium
cruentum
Anistrodesmus sp.
Kh«ng sử dụng Kh«ng x¸c
ñịnh
Hwang &
Horneland,
1965
Chlamydomonas
reinhadtii
Chlorella sp.,
Coccomyxa sp.,
Euglena sp.,
Scenedesmus sp.,
10% glycerol ðạt ñến 100%
Hwang &
Huddock.,
1971
Chlamydomonas
reinhardtii
5% DMSO
10% DMSO
30 phót Cã sống
Tsuru, 1973 Chlorella sp.,
Scenedesmus sp.,
Nitzshia sp.,
Phaeodactylum
tricornutum
10% glycerol
10% DMSO
30 phót 75- 90%
Morris, 1976
a, b
Chlorella sp., 2,5%-5% glycerol
2,5-5% DMSO
10-15% PVP
5 phót 60- 85%
McGrath
&Daggett,
1977
Chlamydomonas
reinhardtii
10% glycerol
5% DMSO
1% Tween 80
45- 70 phót 0,003-10%
Gresshoff,
1977,
Morris, 1978
Chlamydomonas
reinhardtii
Chlorella sp.,
Scenedesmus sp.,
Ankistrodesmus sp.,
1-5% DMSO
5% DMSO 10%
PVP
18 giê
5 phót
0,05- 1%
ðạt ñến
96,7%
Morris
&Canning,
1978
Euglena gracilis 10% DMSO
10% ethanol
10% methanol
10% PVP
7,5% sucrose
5% glycerol
15 phót Ít nhÊt 30%
Saks, 1978 Nitzshia sp.,
Cylindrotheca sp.,
5% glycerol
5% DMSO
30 phót ðạt ñến 87%
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 19
Phaeodactylum
tricornutum
Nannochloropsis sp.,
Dunaliella salina
Giboa &Ben
– Amotz,
1979; Ben –
Amotz
&Gilboa,
1980 a, b
Chlorella sp.,
Tetraselmis suecica
Phaeodactylum
tricornutum
5-20% DMSO
5 phót 0,1- 0,7%
0- 64,4%
20-87,1%
McLellan,
1989
Tảo silÝc 5-15% DMSO
5-15% glycerol
5-15% methanol
0- 100%
Fenwick
&Day, 1992
Tetraselmis suecica 5-15% DMSO
5-15% ethanol
5-15% glycerol
5-15% methanol
30 phót 7- 74%
Day &
Fenwick,
1993
Tetraselmis suecica
Tetraselmis chuii
5-10% DMSO
5-10% glycerol
30 phót ðạt ñến 70%
ðạt ñến 40%
Benhra et al.,
1994
Scenedesmus
subspicatus
10% sucrose
5% PVP+ 10%
sucrose + 3%
methanol trộn lẫn
30 phót
Canavate &
Lubian, 1994
C.gracilis
Nannochloris
gaditana
N.atomus
Rhodomonas baltica
Tetraselmis chuii
10% DMSO
5% methanol
30 phót 0- 17,1%
Bodas et al.,
1995
Chlorophyceae 5% methanol
5-8% DMSO
8- 100%
Canavate &
Lubian,
1995a, b
Chaetoceros gracilis,
Nannochloris
gaditana,
Nannochloropsis
atomus.
Rhodomnas baltica,
Tetracelmis chuii,
Isochrysis galbana
5-15% DMSO
1- 5% methanol
45 phót 0,10- 95,3%
Hirata et al.,
1996
Chlamydomonas
reinhardtii
Một số vi tảo biển
kh¸c
0,5M sucrose 0- 67%
0-30%
Mortain –
Bertrand et
al., 1996
Dunaliella salina 3,5M glycerol 60 phót ðạt ñến
78,6%
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 20
Canavate &
Lubian,
1997a
Chaetoceros gracilis,
Nannochloris
gaditana,
Nannochloropsis
atomus.
Rhodomnas baltica,
Tetracelmis chuii
5-15% DMSO
ðạt ñến 100%
Cordero &
Voltolina,
1997
Chaetoceros sp.
Phaeodactylum
tricornutum
1-10% DMSO
1-10% glycerol
Day et al.,
1997
Chlorella emersonii,
Tetracelmis suesica
5-10% DMSO
10% glycerol
10% methanol
70%
73%
Kh«ng x¸c
ñịnh
Day, 1998 Một số loµi vi tảo
biển
5% DMSO
10% glycerol
10%methanol
15 phót 34- 70%
Fumi Mori et
al, 2002
Một số loài tảo lam và
tảo lục
3%, 5%, 10%
DMSO
15 phót
Jean – Marc
Poncet &
Benoit
VÐron, 2003
Nannochloropsis
oculata
2,6M DMSO
2,2M Glycerol
1M Proline
3,1M Methanol
20 phót
Tzovenis et
al., 2004
C. calcitrans
C. muelleri,
Chaetoceros sp.,
Tetraselmis chuii,
Tetraselmis suecica…
5%, 10% DMSO
10%Methanol
10%Propylene
glycol
Jin –Chywan
Gwo et al.,
2005
Nannochloropsis
oculata
DMSO, Ethylene
glycol, Glycerol,
Methanol,
Propylene glycol
10 phót
Lesley
Rhodes et
al., 2006
Chlorella
minutissima;
Isochrysis galbana;
Dunaliella
tertiolecta…
5% và 10%
DMSO
10% Methanol
10% Propylene
Glycol
30 phót
* T×nh h×nh nghiªn cøu vÒ nu«i trång vi t¶o
HiÖn nay, trªn thÕ giíi cã rÊt nhiÒu ph−¬ng ph¸p nu«i t¶o. Tïy vµo tõng môc
®Ých, nhu cÇu vµ ®iÒu kiÖn nu«i cô thÓ mµ nªn ¸p dông ph−¬ng ph¸p nµo cho phï
hîp ®Ó gi¶m chi phÝ s¶n xuÊt vµ ®em l¹i hiÖu qu¶ cao. Nh×n chung, cã mét sè
ph−¬ng ph¸p nu«i t¶o nh− sau:
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 21
- Ph−¬ng ph¸p nu«i theo mÎ (HÖ thèng kÝn)
Lµ ph−¬ng ph¸p kh«ng lµm thay ®æi m«i tr−êng nu«i ® cã t¶o gièng cho ®Õn
khi thu ho¹ch. Ph−¬ng ph¸p nµy cã ®Æc ®iÓm giíi h¹n lµ bÞ giíi h¹n vÒ thêi gian,
trong khi cã nh÷ng thay ®æi vÒ thµnh phÇn dinh d−ìng cña m«i tr−êng vµ c−êng ®é
chiÕu s¸ng lªn tõng tÕ bµo.
§Ó kh¾c phôc mét sè ®iÓm giíi h¹n cña ph−¬ng ph¸p nµy ng−êi ta ®−a ra
ph−¬ng ph¸p nu«i b¸n liªn tôc. §©y lµ mét d¹ng cña nu«i theo mÎ nh−ng sinh khèi
®−îc kiÓm tra ®Þnh kú vµ gi÷ æn ®Þnh b»ng ph−¬ng ph¸p pha lo ng m«i tr−êng.
- Ph−¬ng ph¸p nu«i liªn tôc
Lµ ph−¬ng ph¸p ®−îc sö dông réng r i ®Ó nu«i t¶o còng nh− vi khuÈn. Kh¸c
víi ph−¬ng ph¸p nu«i theo mÎ lµ ng−êi ta bæ sung liªn tôc dinh d−ìng cho t¶o t¨ng
tr−ëng. ViÖc thu sinh khèi còng ®−îc tiÕn hµnh liªn tôc sao cho mËt ®é tÕ bµo t¶o
lu«n ®−îc æn ®Þnh trong m«i tr−êng (§Æng §×nh Kim, 2002).
1.2. T×nh h×nh nghiªn cøu trong n−íc
ë n−íc ta c¸c nghiªn cøu vÒ t¶o còng ® thu ®−îc mét sè thµnh tùu ®¸ng kÓ.
Tõ nh÷ng n¨m 1970, Skeletonema costatum do Vò Dòng ph©n lËp vµ nh©n gièng
thµnh c«ng ® ®−îc tr−êng §¹i häc thuû s¶n thö nghiÖm nu«i trång. N¨m 1997 víi
dù ¸n ph¸t triÓn trai ngäc ë BÕn BÌo, H¶i Phßng, t¶o Chroomonas sp. ®−îc ®−a vµo
nu«i thµnh c«ng ë Trung t©m quèc gia H¶i s¶n MiÒn B¾c. N¨m 1998, ® cã c«ng
tr×nh nghiªn cøu nu«i mét sè loµi t¶o ®¬n bµo lµm thøc ¨n cho Êu trïng c¸ biÓn cña
Lª ViÔn ChÝ, Ph¹m ThÞ Loan vµ Hµ §øc Th¾ng, kÕt qu¶ ® chän ®−îc 3 loµi t¶o ®¬n
bµo lµ Chlamidomonas sp., Chaetoceros calcitran, Dunaliella sp. cã kh¶ n¨ng lµm
thøc ¨n cho Êu trïng trai ngäc. Sau ®ã, hµng lo¹t c¸c nghiªn cøu lùa chän m«i
tr−êng, ®iÒu kiÖn nu«i trång thÝch hîp cho loµi vi t¶o nµy vµ Chaetoceros ® ®−îc
tiÕn hµnh vµ nu«i phæ biÕn cho c¸c c¬ së s¶n xuÊt. Chóng ®−îc sö dông réng r i lµm
thøc ¨n cho Êu trïng t«m vµ t«m só. Skeletonema costatum ®−îc sö dông lµm thøc
¨n cho Êu trïng t«m he t¹i Tr¹i H¹ Long, CÈm Ph¶, ® n©ng ®−îc tû lÖ sèng cña Êu
trïng giai ®o¹n Z1-M2 lªn 30-43% so víi ®èi chøng (sö dông thøc ¨n lµ gi¸p x¸c) lµ
17%.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 22
N¨m 2002, NguyÔn Träng Nho ® ®−a ra kÕt qu¶ nghiªn cøu vÒ ph−¬ng ph¸p
thu ho¹ch sinh khèi t¶o Tetraselmis sp. cã thÓ ®Õn 40% sinh khèi t¶o cã chÊt l−îng
®Ó lµm thøc ¨n cho ®éng vËt nu«i.
TiÕp theo ®ã, Lª X©n vµ cs., (2003) ® tiÕn hµnh nghiªn cøu ¶nh h−ëng cña
nhiÖt ®é, ®é mÆn, mËt ®é th¶ ban ®Çu lªn hai loµi t¶o Nannochloropsis oculata vµ
Isochrysis galbana vµ sö dông tèt chóng trong s¶n xuÊt gièng thuû s¶n ë C¸t Bµ-
H¶i Phßng.
§Õn n¨m 2006, D−¬ng §øc TiÕn ® ph©n lËp, b¶o qu¶n mét sè loµi vi t¶o
biÓn vµ quy tr×nh s¶n suÊt chóng phôc vô NTTS.
Vµi n¨m trë l¹i ®©y, do yªu cÇu thÞ tr−êng xuÊt khÈu cÇn nh÷ng s¶n phÈm
s¹ch vµ cã chÊt l−îng cao nªn nhu cÇu vÒ thøc ¨n t−¬i sèng lµ vi t¶o trong c¸c tr¹i
s¶n xuÊt gièng l¹i ®−îc ®Æt ra mét c¸ch cÊp thiÕt. Sö dông thøc ¨n t−¬i sèng lµ vi t¶o
® mang l¹i thµnh c«ng ®¸ng kÓ cho viÖc nghiªn cøu s¶n xuÊt gièng cua, c¸ biÓn, sß
huyÕt, èc h−¬ng, nghªu, tu hµi, h¶i s©m….Tuy nhiªn, mét thùc tÕ lµ hÇu hÕt c¸c
chñng gièng vi t¶o hiÖn nay nh− Chaetoceros sp., Chlorella sp., Platymonas sp.,
Nannochloropsis oculata, Chaetoceros muelleri, Isochrysis galbana, Pavlova…
®Òu cã nguån gèc nhËp ngo¹i. ViÖc s¶n xuÊt ë qui m« th−¬ng m¹i c¸c loµi gi¸p x¸c,
c¸, ®éng vËt th©n mÒm vÉn cßn phô thuéc ®¸ng kÓ vµo viÖc s¶n xuÊt vi t¶o nh− lµ
thøc ¨n t−¬i sèng cho Êu trïng cña chóng v× ®©y lµ lo¹i thøc ¨n tèt nhÊt, cã vai trß
quan träng trong c©n b»ng O2 vµ CO2 trong m«i tr−êng nu«i.
ViÖn Nghiªn cøu NTTS II ® sö dông thµnh c«ng mét sè loµi vi t¶o nh−
Tetraselmis chuii, Chlorella sp., Nannochloropsis oculata, Platymonas sp.
Isochrysis galbana trong “qui tr×nh nu«i n−íc xanh” ®Ó −¬ng nu«i Êu trïng c¸ biÓn
tõ nh÷ng n¨m 2000. Nhê quy tr×nh l−u gi÷ gièng ®¹t chÊt l−îng, nu«i sinh khèi t¶o
®¹t mËt ®é cao trong dung tÝch lín. Trung t©m Gièng Quèc gia H¶i s¶n Nam Bé -
ViÖn Nghiªn cøu NTTS II ® trë thµnh ®Þa chØ cung cÊp gièng c¸ chÏm (Lates
calcarfer), c¸ mó ®en chÊm ®á (Epinephelus coioides) ®¸ng tin cËy cho ng−êi nu«i
tõ nhiÒu n¨m qua. Vµ thªm ®èi t−îng gièng c¸ m¨ng (Chanos chanos) n¨m 2008
(§Æng Tè V©n CÇm, 2007).
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 23
Vi t¶o ® ®−îc sö dông thµnh c«ng trong s¶n xuÊt gièng h¶i s¶n t¹i ViÖn Nghiªn
cøu NTTS III trong nhiÒu n¨m qua vµ ® lµm t¨ng tû lÖ sèng lªn 3,95% cña VÑm
xanh (Perna viridis) ë giai ®o¹n Êu trïng ch÷ D ®Õn con gièng 3 – 5 mm khi sö
dông hçn hîp t¶o t−¬i N. oculata, Chaetoceros ®¬n bµo, Isochrysis, Platymonas
(5000- 60000 tb/ml), èc h−¬ng (Babylonia areolata) giai ®o¹n Verliger lªn 60-65%
víi hçn hîp N. oculata, Chaetoceros ®¬n bµo, Isochrysis, Platymonas (5000-10000
tb/ml) kÕt hîp víi thøc ¨n tæng hîp (TH); Sß huyÕt (Anadara granosa) ë giai ®o¹n
Êu trïng næi lªn 70% víi N. oculata, Chaetoeros ®¬n bµo, Isochrysis, Platymonas
(3000 - 10000 tb/ml), Trai ngäc (Pinctada maxima) giai ®o¹n Êu trïng ch÷ D-Umbo
lµ 23%, Tu hµi (Lutraria rhynchaena) Êu trïng næi-con gièng 7–10 mm lªn 1,42%
víi N. oculata, Chaetoeros, Platymonas (3000-15000 tb/ml) so víi TH: Lansy,
Fripak lªn 0,34%; §iÖp qu¹t (Chlamys nobilis) giai ®o¹n Êu trïng D-spat lªn 7,5-
9,5% víi hçn hîp Chaetoeros muelleri, Platymonas, Isochrysis (3000-10000 tb/ml)
so víi TH: AP, BP lµ 0-2,5%; H¶i s©m (Holothuria scabra) giai ®o¹n Êu trïng næi
Auricularia lªn 37,3-10,4% víi hçn hîp C. muelleri, N. oculata (20000-40000
tb/ml) so víi thøc ¨n hçn hîp lµ Spirulina kh«, Fripak lªn 10,4%; Nhum sä
(Tripneustes gratilla) giai ®o¹n Êu trïng næi ®Õn cuèi giai ®o¹n 8 tay) lªn 48,2-
61,17% víi t¶o t−¬i Chaetoceros, N. oculata (6000 - 8000 tb/ml) so víi TH: Fripak
0,5g/m3 lµ 41%; Cua xanh (Scylla serrate) giai ®o¹n Zoea 1-3 lªn 51,1% víi N.
oculata, Chaetoceros, Platymonas kÕt hîp víi Rotifer vµ Artemia so víi chØ ¨n
Rotifer (18,95%) hay Artemia (27,85%); C¸ chÏm (Lates calcarifer) giai ®o¹n 15
ngµy tuæi lªn 50% víi t¶o N. oculata (3 - 4 v¹n tb/ml) kÕt hîp víi Rotifer (3 -
35con/ml) so víi cho ¨n chØ Rotifer (3-35con/ml) lµ 24% (NguyÔn ThÞ Thanh Thuú,
2007).
Theo nghiªn cøu cña Huúnh Thanh Tíi, (2006) ® c«ng bè kÕt qu¶ nghiªn cøu
khi sö dông 3 loµi t¶o ®Þa ph−¬ng Chaetoceros sp., Nitzschia sp., vµ Oscillatoria sp.
tõ khu ao bãn ph©n g©y mµu t¹i vïng nu«i Artemia t¹i VÜnh Ch©u - Sãc Tr¨ng lµm
thøc ¨n cho Artemia víi 3 liÒu l−îng thøc ¨n cho mçi loµi: møc cao, trung b×nh vµ
thÊp. KÕt qu¶ sau 10 ngµy nu«i dùa trªn tû lÖ sèng vµ t¨ng tr−ëng cña Artemia, cã
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 24
thÓ xÕp h¹ng tõng loµi t¶o dïng lµm thøc ¨n thÝch hîp cho Artemia nh− sau: Chae-
M>Chae-L > Chae-H > Nitz-M >Nitz-L>Nitz-H vµ t¶o Oscillatoria sp. tá ra kh«ng
ph¶i lµ thøc ¨n tèt cho Artemia. Khi ph©n tÝch thµnh phÇn c¸c axit bÐo trong sinh
khèi Artemia cho thÊy Artemia nu«i b»ng t¶o thuÇn Chaetoceros sp. cã hµm l−îng
c¸c axÝt bÐo cao h¬n ®¸ng kÓ so víi Artemia cho ¨n b»ng t¶o t¹p, ®Æc biÖt lµ hµm
l−îng HUFA nhiÒu h¬n gÊp 3,7 lÇn.
HiÖn nay, ë n−íc ta tuy viÖc s¶n xuÊt gièng c¸c ®èi t−îng thuû s¶n cã gi¸ trÞ kinh
tÕ ph¸t triÓn manh mÏ, nh−ng ®Ó chñ ®éng s¶n xuÊt thøc ¨n t−¬i sèng cho c¸c giai
®o¹n Êu trïng kh¸c nhau cßn gÆp nhiÒu khã kh¨n. HÇu hÕt c¸c c¬ së s¶n xuÊt gièng
®Òu bÞ ®éng vµ ph¶i dïng thøc ¨n thay thÕ nh− thøc ¨n chÕ biÕn, bét ®Ëu nµnh, t¶o
kh«… Nguån gièng vµ sinh khèi t¶o cßn phô thuéc vµo thu vít tù nhiªn nªn kh«ng
thuÇn nhÊt, khã l−u gi÷. Nguyªn nh©n lµ do ch−a cã ph−¬ng ph¸p ph©n lËp tèi −u,
nu«i gi÷ thuÇn chñng trong ®iÒu kiÖn phßng thÝ nghiÖm còng nh− ch−a cã quy tr×nh
c«ng nghÖ nu«i thÝch hîp ®¶m b¶o nh©n nhanh sinh khèi vi t¶o nhÊt lµ gièng ban
®Çu. Do c¸c chñng gièng t¶o cã nguån gèc nhËp ngo¹i, quy tr×nh c«ng nghÖ nu«i
trång chóng ch−a thÝch hîp víi ®iÒu kiÖn khÝ hËu cña ViÖt Nam, nªn hiÖu qu¶ ®em
l¹i ch−a cao, sinh khèi ®¹t ®−îc thÊp, bÞ t¹p nhiÔm nhiÒu, nguån gièng s¬ cÊp kh«ng
chñ ®éng ®−îc, ®Æc biÖt lµ kh«ng cã ®−îc c¸c chñng gièng ph©n lËp ®−îc tõ ViÖt
Nam nªn tÝnh chèng chÞu víi nhiÖt ®é, ®é mÆn cao lµ rÊt thÊp. Do vËy, viÖc ph©n
lËp, ®Þnh lo¹i vµ sö dông vi t¶o lµm thøc ¨n t−¬i sèng trong sinh s¶n nh©n t¹o c¸c
loµi ®éng vËt biÓn gÆp rÊt nhiÒu khã kh¨n, ch−a khai._.c
tttcttgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtggagtgatttgtctggttaattccgttaacgaacgagaccgcagcctgctaaataatcacagta
atgatttttcattgctgatggtttcttagagggacatgtagtataaaactacaggaagattgcggcaataacaggtctgtgatgcc
>C.muelleriiAY625896
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgcaaattacccaatcctgacacagggaggtagtgacaataaataacaatgccgggcctttctaggtctggcaat
tggaatgagaacaatttaaatcccttatcgaggatcaattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatattaaagttgttg
cagttaaaaagctcgtagttggatttgtggtgtgactgatcggtccgacctttggtgggtattcgatcttgtcacgccatccttgagtggttcgctctggcattaagtt
gtcggggcggcagccgctcatcgtttactgtgagaaaattagagtgttcaaagcaggcttatgccgttgaatatactagcatggaataataagataggacctcg
gtactattttgttggtttgagaaccaaggtaatgatcaatagggacagttgggggtattcgtattcagttgtcagaggtgaaattcttagatttacggaagacgaact
actgcgaaagcatttaccaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagtatggggatcgaagatgattagataccatcgtagtctataccataaactatgccgact
caggatgggcgggtgccactctggcctcgtctgcactgtatgagaaatcaaagtctttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaaggaat
tgacggaagggcaccaccaggagtggaacctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttatcaggtccagacatagtgaggattgacagattgagagc
tctttcttgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtggagtgatttgtctggttaattccgttaacgaacgagaccccagcctgctaaataatcacgc
gaatgactcttcattggcgatggtttcttagagggacatgtagtacaaagctacaggaagattggggcaataacaggtctgtgatgcc
>Chaetocerossp.AF145226
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgtaaattacccaatcctgacacagggaggtagtgacaataaataacaatgccgtgcccttttgggtatggcttttg
gaatgagagaaacacagaatccacatcgaggatcaattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagcttcaatagcgtatattaaagttgct
gcagttaaaaagctcgtagttgcatttccgaggcaagggattagtccgacctttggtgggtatttaatcctcttgcctcgtccttgagtggtgcttcttggtattaagt
tatcgaggagatagccgctcatcgtttactgtgagaaaattagagtgttcaaagcaggcttatgccgttgaatatattagcatggaataataagataggacctcgg
tactattttgttggtttgagaaccaaggtaatgatgaatagggacagttgggggtattcgtattcagttgtcagaggtgaaattcttagatttacggaagacgaacta
ctgcgaaagcatttaccaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagtatggggatcgaagatgattagataccatcgtagtctataccataaactatgccgactc
aggattgtcaggtgtcttttgaccttggcagcactgtgtgagaaatcaaagtctttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaagaaattgac
ggaagggcaccaccaggagtggaacctgcgggcttaatttgactcaacacgggaaaacttatcaggtccagacatagtgaggattgacagattgagagctctt
tcttgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtggagtgatttgtctggttaattccgttaacgaacgagaccccagcctgctaaatacttgcacgaa
tgacttttcattggtgacaggttcttagagggacatgtagtataaaactacaggaagattggggcaataacaggtctgtgatgcc
>C.gracilisAY625895
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgcaaattacccaatcctgacacagggaggtagtgacaataaataacaatgccgggcctttctaggtctggcaat
tggaatgagaacaatttaaatcccttatcgaggatcaattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatattaaagttgttg
cagttaaaaagctcgtagttggatttgtggtgtgactgatcggtccgacctttggtgggtactcgatgttgtcacgccatccttgagtggttcgctctggcattaagt
tgtcggggcggcagccgctcatcgtttactgtgagaaaattagagtgttcaaagcaggcttatgccgttgaatatactagcatggaataataagataggacctcg
gtactattttgttggtttgagaaccaaggtaatgatcaatagggacagttgggggtattcgtattcagttgtcagaggtgaaattcttagatttacgaagacgaacta
ctgcgaaagcatttaccaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagtatggggatcgaagatgattagataccatcgtagtctataccataaactatgccgactc
aggatgggcgggtgccactctggcctcgtctgcactgtatgagaaatcaaagtctttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaaggaatt
gacggaagggcaccaccaggagtggaacctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttatcaggtccagacatagtgaggattgacagattgagagct
ctttcttgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtggagtgatttgtctggttaattccgttaacgaacgagaccccagcctgctaaataatcacgc
gaatgactcttcattggcgatggtttcttagagggacatgtagtacaaagctacaggaagattggggcaataacaggtctgtgatgcc
>C.calcitransDQ887756
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgcaaattacccaatcctgacacagggaggtagtgacaataaataacaatgccgggcctttctaggtctggcaat
tggaatgagaacaatttaaatcccttatcgaggatcaattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatattaaagttgttg
cagttaaaaagctcgtagttggatttgtggtgtgactgatcggtccgacctttggtgggtattcgaccttgtcacgccatccttgagtggttcgctctggcattaagt
tgtcggggcggcagccgctcatcgtttactgtgagaaaattagagtgttcaaagcaggcttatgccgttgaatatactagcatggaataataagataggacctcg
97
gtactattttgttggtttgagaaccaaggtaatgatcaatagggacagttgggggtattcgtattcagttgtcagaggtgaaattcttagatttacggaagacgaact
actgcgaaagcatttaccaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagtatggggatcgaagatgattagataccatcgtagtctataccataaactatgccgact
caggatgggcgggtgccactctggcctcgtctgcactgtatgagaaatcaaagtctttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaaggaat
tgacggaagggcaccaccaggagtggaacctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttatcaggtccagacatagtgaggattgacagattgagagc
tctttcttgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtggagtgatttgtctggttaattccgttaacgaacgagaccccagcctgctaaataatcacgc
gaatgactcttcattggcgatggtttcttagagggacatgtagtacaaagctacaggaagattggggcaataacaggtctgtgatgcc
>C.sp.NMBguh003-1DQ886406
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgcaaattacccaatcctgacacagggaggtagtgacaataaataacaatgccgggcctttctaggtctggcaat
tggaatgagaacaatttaaatcccttatcgaggatcaattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatattaaagttgttg
cagttaaaaagctcgtagttggatttgtggtgcgacggatcggtccgacctttggtgggtactcgatgttgtcgcgccatccttgagtggttcgtcctggcattaag
ttgtcggggcggcagccgctcatcgtttactgtgagaaaattagagtgttcaaagcaggcttatgccgttgaatatactagcatggaataataagataggacctc
ggtactattttgttggtttgagaaccaaggtaatgatcaatagggacagttgggggtattcgtattcagttgtcagaggtgaaattcttagatttacggaagacgaa
ctactgcgaaagcatttaccaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagtatggggatcgaagatgattagataccatcgtagtctataccataaactatgccga
ctcaggatgggcgggtgccactctggcctcgtctgcactgtatgagaaatcaaagtctttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaagga
attgacggaagggcaccaccaggagtggaacctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttatcaggtccagacatagtgaggattgacagattgaga
gctctttcttgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtggagtgatttgtctggttaattccgttaacgaacgagaccccagcctgctaaataatcac
gcgaatgacttttcattggcgatggtttcttagagggacatgtagtacaaagctacaggaagattggggcaataacaggtctgtgatgcc
>C.sp.NMBguh003-2DQ886407
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgcaaattacccaatcctgacacagggaggtagtgacaataaataacaatgccgggcctttctaggtctggcaat
tggaatgagaacaatttaaatcccttatcgaggatcaattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatattaaagttgttg
cagttaaaaagctcgtagttggatttgtggtgcgacggatcggtccgacctttggtgggtactcgatgttgtcgcgccatccttgagtggttcgtcctggcattaag
ttgtcggggcggcagccgctcatcgtttactgtgagaaaattagagtgttcaaagcaggcttatgccgttgaatatactagcatggaataataagataggacctc
ggtactattttgttggtttgagaaccaaggtaatgatcaatagggacagttgggggtattcgtattcagttgtcagaggtgaaattcttagatttacggaagacgaa
ctactgcgaaagcatttaccaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagtatggggatcgaagatgattagataccatcgtagtctataccataaactatgccga
ctcaggatgggcgggtgccactctggcctcgtctgcactgtatgagaaatcaaagtctttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaagga
attgacggaagggcaccaccaggagtggaacctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttatcaggtccagacatagtgaggattgacagattgaga
gctctttcttgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtggagtgatttgtctggttaattccgttaacgaacgagaccccagcctgctaaataatcac
gcgaatgacttttcattggcgatggtttcttagagggacatgtagtacaaagctacaggaagattggggcaataacaggtctgtgatgcc
>C.rostratusX85391
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgtaaattacccaatcctgacacagggaggtagtgacaataaataacaatgccgggccttctaaggtctggcaat
tggaatgagaacaatttaaatcccttatcgaggatcaattggagggcaagtctggtgccagcagccgcgtaattccagctccaatagcgtatattaaagttgttgc
agttaaaaagctcgtagttggatttctgtgggaggatcggtccttgcattctttgtaggaacttgttcctctccggccatccttgggtggatcttgtctggcattaagtt
gtcaggcaggggatgcccatcgtttactgtgaaaaaattagagtgttcaaagcaggcttatgccattgaatatattagcatggaataataagatagggccctggt
actattttgttggtttgcgtaccgaggtaatgattaatagggacagttgggggtatttgtattcagtattcagtggtgaaatacttagacctacggaagacaaactac
tgcgaaagcatttaccaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagtatggggatcgaagatgatcagataccgtcgtagtctataccataaactataccgactca
ggatgggaggggcgtgtttttgccctcttctgcactgtatgagaaatcaaagtctttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaagaaattga
cggaagggcaccaccaggagtggaactgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttatcaggtccagacatagtgaggattgacagattgagagctcttt
cttgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtggagtgatttgtctggttaattccgttaacgaacgagacctcagcctgctaaataatggtgttaatg
aatcttcattggcagacatttcttagagggacatgtagtataaaactacaggaagattgaggcaataacaggtctgtgatgcc
>C.neogracileEU090013
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgtaaattacccaatcctgacacagggaggtagtgacaataaataacaatgccgggccctttcgggtctggctttt
ggaatgagagaattttagaatccacatcgaggatcaattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatattaaagttgttg
cagttaaaaagctcgtagttggatttccggcgtgagggatcagtctgacttctagtcagtacttggtcctctcatgccgtccttgaatggtgcatcctggcattaagt
tgtcggggtgagagccgttcatcgtttactgtgagaaaattagagtgttcaaagcaggcttatgccgttgaatatattagcatggaataataagataggactttggt
actattttgttggtttgagaaccaaggtaatgatcaatagggacagttgggggtattcgtattcagttgtcagaggtgaaattcttagatttccggaagacgaactac
tgcgaaagcatttaccaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagtatggggatcgaagatgattagataccatcgtagtctataccataaactatgccgactca
ggatgggcgggtgcatttttgcctcgtctgcactgtatgagaaatcaaagtctttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaagaaattgacg
gaagggcaccaccaggagtggaacctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttatcaggtccagacatagtgaggattgacagattgagagctctttct
tgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtggagtgatttgtctggttaattccgttaacgaacgagaccccagcctgctaaataatcacgctaatg
atttttcattgacgatggtttcttagagggacatgtagtataaaactacaggaagattggggcaataacaggtctgtgatgcc
>C.sp.ArM0005EU090014
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgtaaattacccaatcctgacacagggaggtagtgacaataaataacaatgccgggccctttcgggtctggctttt
ggaatgagagaattttagaatccacatcgaggatcaattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatattaaagttgttg
cagttaaaaagctcgtagttggatttccggcgtgagggatcagtctgacttctagtcagtacttggtcctctcatgccgtccttgaatggtgcatcctggcattaagt
tgtcggggtgagagccgttcatcgtttactgtgagaaaattagagtgttcaaagcaggcttatgccgttgaatatattagcatggaataataagataggactttggt
actattttgttggtttgagaaccaaggtaatgatcaatagggacagttgggggtattcgtattcagttgtcagaggtgaaattcttagatttccggaagacgaactac
tgcgaaagcatttaccaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagtatggggatcgaagatgattagataccatcgtagtctataccataaactatgccgactca
ggatgggcgggtgcatttttgcctcgtctgcactgtatgagaaatcaaagtctttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaagaaattgacg
gaagggcaccaccaggagtggaacctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttatcaggtccagacatagtgaggattgacagattgagagctctttct
98
tgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtggagtgatttgtctggttaattccgttaacgaacgagaccccagcctgctaaataatcacgctaatg
atttttcattgacgatggtttcttagagggacatgtagtataaaactacaggaagattggggcaataacaggtctgtgatgcc
>C.sp.p442AJ535167
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgtaaattacccaatcctgacacagggaggtagtgacaatagataacaatgccgggccttcaaaggtctggcaat
tggaatgagaacaatttaaatcccttatcgaggatcaattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatattaaagttgttg
cagttaaaaagctcgtagttggatttctggtgggagggatcggtccagcactcagtgttggaacttgtatcctctccggccatccttgggtggatcttgtctggcat
taagttgtcagtcaggggatgcccatcgtttactgtgaaaaaattagagtgttcaaagcaggcttatgccattgaatatattagcatggaataataagatagggcc
ctggtgctattttgttggtttgcgtaccgaggtaatgattaatagggacagttgggggtatttgtattcagtattcagtggtgaaatacttagacctacggaagacaa
actactgcgaaagcatttaccaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagtatggggatcgaagatgatcagataccgtcgtagtctataccataaactatacca
actcaggatgggaggggtgtttttgcctcttctgcactgtatgagaaatcaaagtctttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaagaaatt
gacggaagggcaccaccaggagtggaacctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttatcaggtccagacatagtgaggattgacagattgagagct
ctttcttgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtggagtgatttgtctggttaattccgttaacgaacgagacctcagcctgctaaataatggtgct
aatgaatcttcattggcagacatttcttagagggacatgtagtattaaactacaggaagattgaggcaataacaggtctgtgatgcc
> C.sp.jonquieriDQ830988
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgtaaattacccaatcacgacacgtggaggtagtgacaataaataacaatgccgggcatttctatgtctggcaatt
ggaatgagaacaatttaaatccattatcgaggatccattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatattaaagttgttg
cagttaaaaagctcgtagttggatttctggtgggagggagccgtccgatctcagattggtacgtgttcctctccggccatccttgagtctaacctctttggcattaa
gttgtcgaggtggggatactcatcgtttactgtgaaaaaattagagtgttcaaagcaggcttatgccgttgaatatattagcatggaataataagataggacctcg
gtactattttgttggtttgcgcaccaaggtaatgatcaatagggacagttgggggtattcgtattcagtagtcagaggtgaaattcttagatttactgaagacgaact
actgcgaaagcatttaccaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagtatggggatcgaagatgattagataccatcgtagtctataccataaactatgccgact
caggatggggagctgctttttagcgctctctgcactgtatgagaaatcaaagtctttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaagaaattga
cggaagggcaccaccaggagtggaacctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttaccaggtccagatatagtgaggattgacagattgagagctctt
tcttgattctataggtggtggtgcatggccgttcttagttggtggagtgatttgtctggttaattccgttaacgaacgagaccccagcctgctaaatagttgcgctaat
gaatcttcattggtgacagcttcttagagggacttctagcaacaagctagcggaagagtggggccataacaggtctgtgatgcc
>C.sp.IV14EF473734
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgtaaattacccaatcacgacacgtggaggtagtgacaataaataacaatgccgggcatttctatgtctggcaatt
ggaatgagaacaatttaaatccattatcgaggatccattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatattaaagttgttg
cagttaaaaagctcgtagttggatttctggtgggagggaaccgtccgatctcagattggtgcgtgttcctctccggccatccttgagtctaacctccttggcattaa
gttgtcgagttggggatactcatcgtttactgtgaaaaaattagagtgttcaaagcaggcttatgccgttgaatatattagcatggaataataagataggacctcgg
tactattttgttggtttgcgcaccaaggtaatgatcaatagggacagttgggggtattcgtattcagtagtcagaggtgaaattcttagatttactgaagacgaacta
ctgcgaaagcatttaccaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagtatggggatcgaagatgattagataccatcgtagtctataccataaactatgccgactc
aggatggggagctgctttttagcgctctctgcactgtatgagaaatcaaagtctttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaagaaattgac
ggaagggcaccaccaggagtggaacctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttaccaggtccagatatagtgaggattgacagattgagagctcttt
cttgattctataggtggtggtgcatggccgttcttagttggtggagtgatttgtctggttaattccgttaacgaacgagaccccagcctgctaaatagttgcactaat
gaatcttcattggtgacagcttcttagagggacttctagcaacaagctagcggaagagtggggccataacaggtctgtgatgcc
>C.neogracileEU090012
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgtaaattacccaatcacgacacgtggaggtagtgacaataaataacaatgccgggcatttctatgtctggcaatt
gg(aatgagaacaatttaaatccattatcgaggatccattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatattaaagttgtt
gcagttaaaaagctcgtagttggatttctggtgggagggaaccgtccgatctcagattggtgcgtgttcctctccggccatccttgagtctaacctccttggcatta
agttgtcgagttggggatactcatcgtttactgtgaaaaaattagagtgttcaaagcaggcttatgccgttgaatatattagcatggaataataagataggacctcg
gtactattttgttggtttgcgcaccaaggtaatgatcaatagggacagttgggggtattcgtattcagtagtcagaggtgaaattcttagatttactgaagacgaact
actgcgaaagcatttaccaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagtatggggatcgaagatgattagataccatcgtagtctataccataaactatgccgact
caggatggggagctgctttttagcgctctctgcactgtatgagaaatcaaagtctttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaagaaattga
cggaagggcaccaccaggagtggaacctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttaccaggtccagatatagtgaggattgacagattgagagctctt
tcttgattctataggtggtggtgcatggccgttcttagttggtggagtgatttgtctggttaattccgttaacgaacgagaccccagcctgctaaatagttgcactaat
gaatcttcattggtgacagcttcttagagggacttctagcaacaagctagcggaagagtggggccataacaggtctgtgatgcc
>C.sp.GSL025FJ546703
taccacatccaaggaaagcagcaggcgcgtaaattacccaatcctgacacagggaggtagtgacaataaataacaatgccgggcctttctaggtctggcaatt
ggaatgagaacaatttaaatcccttatcgaggatcaatttgagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatattaaagttgttgc
agttaaaaagctcgtagttggatttgtggtgtgacggattggtccgaccttcggtgggtacttgatgttgtcacgccatccttgagtggtttgttctggcattaagttg
tcggggcagcagccgctcatcgtttactgtgagaaaattagagtgttcaaagcaggcttatgccgttgaatatactagcatggaataataagataggacctcggt
actattttgttggtttgagaaccaaggtaatgatcaatagggacagttgggggtattcgtattcagttgtcagaggtgaaattcttagatttacggaagacaaactac
tgcaaaagcatttaccaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagtatggggatcgaagatgattagataccatcgtagtctataccataaactatgctgactcag
gatgggtgggtaccactctggcctcgtctgcactgtatgagaaatcaaagtctttgggttccggggggagtatggtcgcaaaacttaaaggaattgacggaag
ggcaccaccaggagtggaacctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttatcaggtccagacatagtgaggattgacagattgagagctctttcttgatt
ctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtggagtgatttgtctggttaattccgttaacgaacgagaccccagcctgctaaataatcacgttaatgactttt
cattggcgatggtttcttagagggacatgtagtataaagctacaggaagattggggcaataacaggtctgtgatgcc
>C.sp.NIOZEF192996
99
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgtaaattacccaatcctgacacagggaggtagtgacaataaataacaatgccgggccctttcgggtctggctttt
ggaatgagagaattttagaatccacatcgaggatcaattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatattaaagttgttg
cagttaaaaagctcgtagttggatttccggcgtgagggatcggtctgacttttagtgagtattgatcctctcatgccgtccttgaatggtgcatcctggcattaagtt
gtcggggtgatagccgttcatcgtttactgtgagaaaattagagtgttcaaagcaggcttatgccgttgaatatattagcatggaataataagataggacctaggt
actattttgttggtttgagaaccaaggtaatgatcaatagggacagttgggggtattcgtattcagttgtcagaggtgaaattcttagatttccggaagacgaactac
tgcgaaagcatttaccaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagtatggggatcgaagatgattagataccatcgtagtctataccataaactatgccggactc
aggatgggcgggtgcatttttgcctcgtctgcactgtatgagaaatcaaagtctttgggttccggggggagtatggtcgcaggctgaacttaaagaaattgaccg
gagggcaccaccaggagtggaacctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaactctatcaggtccagacatagtgaggattgcacagattgagagctcttt
cttgattctctgggtggtggtggcatggccgttcttagttggtggagtgatttgtctggttaattccgttaaggaacgag
>C.sp.CCMP212EF106785
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgtaaattacccaatcctgacacagggaggtagtgacaataaataacaatgccgggcctttctaggtctagcaatt
ggaatgagaacaatttaaatcccttaacgaggatcaattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatattaaagttgttg
cagttaaaaagctcgtagttggatttctggcgggagcgggtggtccggcactttgtgttggtactttcctgtctcttgccatccttgggtctaagctgtctggcattta
gttgtcgggcagtggctgcccatcgtttactgtgaaaaaattagagtgttcaaagcaggcttatgccgttgaatatattagcatggaataataagataggaccttg
gtactattttgttggtttgcgcaccgaggtaatgattaagagggacagttgggggtattcgtattcaattgtcagaggtgaaattcttggatttctggaagacgaact
actgcgaaagcatttaccaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagttagggggatcgaagatgattagataccatcgtagtcttaaccataaactatgccgac
tagggatttgtgggtgttatttgtgaccccatgagcaccttatgagaaatcaaagtctttgggttccggggggagtatggtcgcaagtctgaaacttaaagagatt
gacggaagggcaccaccaggagtggagcctgcggcttaattga
>C.calcitransf.pumilusAY625894
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgtaaattacccaatcacgacacgtggaggtagtgacaataaataacaatgccgggcatttctatgtctggcaatt
ggaatgagaacaatttaaatccattatcgaggatccattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatattaaagttgttg
cagttaaaaagctcgtagttggatttctggtgggagggaaccgtccgatctcagattggtgcgtgttcctctccggccatccttgagtctaacctccttggcattaa
gttgtcgaggtggggatactcatcgtttactgtgaaaaaattagagtgttcaaagcaggcttatgccgttgaatatattagcatggaataataagataggacctcg
gtactattttgttggtttgcgcaccaaggtaatgatcaatagggacagttgggggtattcgtattcagtagtcagaggtgaaattcttagatttactgaagacgaact
actgcgaaagcatttaccaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagtatggggatcgaagatgattagataccatcgtagtctataccataaactatgccgact
caggatggggagctgctttttagcgctctctgcactgtatgagaaatcaaagtctttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaagaaattga
cggaagggcaccaccaggagtggaacctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttaccaggtccagatatagtgaggattgacagattgagagctctt
tcttgattctataggtggtggtgcatggccgttcttagttggtggagtgatttgtctggttaattccgttaacgaacgagaccccagcctgctaaatagttgcactaat
gaatcttcattggtgacagcttcttagagggacttctagcaacaagctagcggaagagtggggccataacaggtctgtgatgcc
Phụ lục 7.2. Trình tự các loài thuộc chi Tetraselmis
>T.sp.isolateHP (1044bp)
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgcaaattacccaatcctgacacagggaggtagtgacaataaataacaataccgggcttttcaagtctggtaattg
gaatgagtacaatctaaacaaccttaacgaggatccattggagggcaagtctggttgccagcagccgcgtaattccagctccaatagcgtatatttaagttgctg
cagttaaaaagctcgtagttggatttcggatgggatttgccggtccgccgtttcggtgtgcactggccagtcccatcttgttgtcggggactagctcctgggcttc
actgtccgggactaggagctgacgaggttactttgagtaaattagagtgttcaaagcaagccgttacgctctgaatacattagcatggaataacatgataggact
ctggcttatcttgttggtctgtgagaccagagtaatgattaagagggacagtcgggggcattcgtatttcattgtcagaggtgaaattcttggatttatgaaagacg
aacttctgcgaaagcattttgtcaaggatgttttcattaatcaacaaccgaaagttgggggctcgaagacgattagataccgtcctagtctcaaccataaacgatg
ccgactagggattggcagacgtttttttgatgactctgccagcaccttatgagaaatcaaagtttttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaa
aggaattgacggaagggcaccaccaggcgtggcagcctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttaaccaggtccagacatagtgaggattgacag
attgagagctctttcttgattctatggtggtggtgcatggccgttcttagttggtgggttgccttgtcaggttgattccggtaacgaacgagacctcagcctgctaaa
tagttactcctactttggtaggaggtgaacttcttagagggactattggcgtttgcaagccaatggaagtgtgaggcaataacaggtctgtgatgcc
>T.sp.TsbreEF473736
Taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgcaaattacccaatcctgatacagggaggtagtgacaataaataacaataccgggcttttcaagtctggtaattg
gaatgagtacaatctaaacaaccttaacgaggatccattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatatttaagttgctg
cagttaaaaagctcgtagttggatttcggatgggatttgccggtccgccgttccggtgtgcactggccagtctcatcttgttgttggggactagctcctgggcttca
ctgtccgggactaggagctgacgaggttactttgagtaaattagagtgttcaaagcaagcctacgctctgaatacattagcatggaataacatgataggactctg
gcttatcttgttggtctgtgagaccagagtaatgattaagagggacagtcggggacattcgtatttcattgtcagaggtgaaattcttggatttatgaaagacgaac
ttctgcgaaagcatttgtcaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagttgggggctcgaagacgattagataccgtcctagtctcaaccataaacgatgccgac
tagggattggcagacgtttttttgatgactctgccagcaccttatgagaaatcaaagtttttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaaggaa
ttgacggaagggcaccaccaggcgtggagcctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttaccaggtccagacatagtgaggattgacagattgagag
ctctttcttgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtgggttgccttgtcaggttgattccggtaacgaacgagacctcagcctgctaaatagttact
cctactttggtaggaggtgaacttcttagagggactattggcgtttagccaatggaagtgtgaggcaataacaggtctgtgatgcc
>T.chuiiDQ207405
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgcaaattacccaatcctgatacagggaggtagtgacaataaataacaataccgggcttttcaagtctggtaattg
gaatgagtacaatctaaacaaccttaacgaggatccattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatatttaagttgctg
cagttaaaaagctcgtagttggatttcggatgggatttgccggtccgccgttccggtgtgcactggccagtctcatcttgttgttggggactagctcctgggcttca
ctgtccgggactaggagctgacgaggttactttgagtaaattagagtgttcaaagcaagcctacgctctgaatacattagcatggaataacatgataggactctg
gcttatcttgttggtctgtgagaccagagtaatgattaagagggacagtcggggacattcgtatttcattgtcagaggtgaaattcttggatttatgaaagacgaac
100
ttctgcgaaagcatttgtcaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagttgggggctcgaagacgattagataccgtcctagtctcaaccataaacgatgccgac
tagggattggcagacgtttttttgatgactctgccagcaccttatgagaaatcaaagtttttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaaggaa
ttgacggaagggcaccaccaggcgtggagcctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttaccaggtccagacatagtgaggattgacagattgagag
ctctttcttgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttggttggtgggttgccttgtcaggttgattccggtaacgaacgagacctcagcctgctaaatagttact
cctactttggtaggaggtgaacttcttagagggactattggcgtttagccaatggaagtgtgaggcaataacaggtctgtgatgcc
>T.convolutaeTSU05039
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgcaaattacccaatcctgacacagggaggtagtgacaataaataacaataccgggcttttcaagtctggtaattg
gaatgagtacaatctaaacaaccttaacgaggatccattggagggcaagtctggttgccagcagccgcgtaattccagctccaatagcgtatatttaagttgctg
cagttaaaaagctcgtagttggatttcggatgggatttgccggtccgccgtttcggtgtgcactggccagtcccatcttgttgtcggggactagctcctgggcttc
actgtccgggactaggagctgacgaggttactttgagtaaattagagtgttcaaagcaagcctacgctctgaatacattagcatggaataacatgataggactct
ggcttatcttgttggtctgtgagaccagagtaatgattaagagggacagtcgggggcattcgtatttcattgtcagaggtgaaattcttggatttatgaaagacgaa
cttctgcgaaagcattttgtcaaggatgttttcattaatcaacaaccgaaagttgggggctcgaagacgattagataccgtcctagtctcaaccataaacgatgcc
gactagggattggcagacgtttttttgatgactctgccagcaccttatgagaaatcaaagtttttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaag
gaattgacggaagggcaccaccaggcgtgggcagcctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttaaccaggtccagacatagtgaggattgacaga
ttgagagctctttcttgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtgggttgccttgtcaggttgattccggtaacgaacgagacctcagcctgctaaa
tagttactcctactttggtaggaggtgaacttcttagagggactattggcgtttagccaatggaagtgtgaggcaataacaggtctgtgatgcc
>T.tetratheleFJ517749
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgcaaattacccaatcctgatacagggaggtagtgacaataaataacaataccgggcttttcaagtctggtaattg
gaatgagtacaatctaaacaaccttaacgaggatccattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatatttaagttgctg
cagttaaaaagctcgtagttggatttcggatgggatttgccggtccgccgttccggtgtgcactggccagtctcatcttgttgttggggactagctcctgggcttca
ctgtccgggactaggagctgacgaggttactttgagtaaattagagtgttcaaagcaagcctacgctctgaatacattagcatggaataacatgataggactctg
gcttatcttgttggtctgtgagaccagagtaatgattaagagggacagtcggggacattcgtatttcattgtcagaggtgaaattcttggatttatgaaagacgaac
ttctgcgaaagcatttgtcaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagttgggggctcgaagacgattagataccgtcctagtctcaaccataaacgatgccgac
tagggattggcagacgtttttttgatgactctgccagcaccttatgagaaatcaaagtttttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaaggaa
ttgacggaagggcaccaccaggcgtggagcctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttaccaggtccagacatagtgaggattgacagattgagag
ctctttcttgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtgggttgccttgtcaggttgattccggtaacgaacgagacctcagcctgctaaatagttact
cctactttggtaggaggtgaacttcttagagggactattggcgtttagccaatggaagtgtgaggcaataacaggtctgtgatgcc
>T.kochiensisAJ431370
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgcaaattacccaatcctgatacagggaggtagtgacaataaataacaataccgggcttctaaagtctggtaattg
gaatgagtacaatctaaatcccttaacgaggatccattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatatttaagttgttgc
agttaaaaagctcgtagttggatttcggatgggacctgccggtccgtctttgagatgtgtactggcaagtcccatcttgttgtcggggactagctcctgggcttca
ctgtcccgggactaggagccgacgaagttactttgagtaaattagagtgttcaaagcaagcctacgctctgaatatattagcatggaataacacgataggactct
ggcttatcttgttggtctgtgagaccagagtaatgattaagagggacagtcggggacattcgtatttcattgtcagaggtgaaattcttggatttatgaaagacgaa
cttctgcgaaagcatttgtcaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagttgggggctcgaagacgattagataccgtcctagtctcaaccataaacgatgccga
ctagggattggcagatgtttttttgatgactctgccagcaccttatgagaaatcaaagtttttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaagga
attgacggaagggcaccaccaggcgtggagcctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttaccaggtccagacatagtgaggattgacagattgaga
gctctttcttgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtgggttgccttgtcaggttgattccggtaacgaacgagacctcagcctgctaaatagtta
ctcctactttggtaggtggcaaacttcttagagggactattggcgtttagctaatggaagtgtgaggcaataacaggtctgtgatgcc
>T.sp.MBIC11125AB058392
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgcaaattacccaatcctgatacagggaggtagtgacaataaataacaataccgggcttctaaagtctggtaattg
gaatgagtacaatctaaatcccttaacgaggatccattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatatttaagttgttgc
agttaaaaagctcgtagttggatttcggatgggatttgccggtccgtcgttgcgatgtgcactggcaagtcctatcttgttgtcggggaccagctcctgggcttca
ctgtccgggactgggagccgacgaagttactttgagtaaattagagtgttcaaagcaagcctacgctctgaatatattagcatggaataacacgataggactctg
gcttatcttgttggtctgtgagaccagagtaatgattaagagggacagtcggggacattcgtatttcattgtcagaggtgaaattcttggatttatgaaagacgaac
ttctgcgaaagcatttgtcaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagttgggggctcgaagacgattagataccgtcctagtctcaaccataaacgatgccgac
tagggattggcagatgtttttttgatgactctgccagcaccttatgagaaatcaaagtttttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaaggaa
ttgacggaagggcaccaccaggcgtggagcctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttaccaggtccagacatagtgaggattgacagattgagag
ctctttcttgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtgggttgccttgtcaggttgattccggtaacgaacgagacctcagcctgctaaatagttatt
cctactttggtaggaagcgaacttcttagagggactattggcgtttagctaatggaagtgtgaggcaataacaggtctgtgatgcc
> T.subcordiformisFJ559380
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgcaaattacccaatcctgacacagggaggtagtgacaataaataacaataccgggcttttcaagtctggtaattg
gaatgagtacaatctaaacaaccttaacgaggatccattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatatttaagttgctg
cagttaaaaagctcgtagttggatttcggatgggatttgccggtccgtcgtttcgatgtgcactggccagtcccatcttgttgtcggggactagctcctgggcttaa
ctgtccgggactaggagctgacgaggttactttgagtaaattagagtgttcaaagcaagccatcgctctgaatacattagcatggaataacatgataggactctg
gcttatcttgttggtctgtgagaccagagtaatgattaagagggacagtcggggacattcgtatttcattgtcagaggtgaaattcttggatttatgaaagacgaac
ttctgcgaaagcatttgtcaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagttgggggctcgaagacgattagataccgtcctagtctcaaccataaacgatgccgac
tagggattggcagacgtttttttgatgactctgccagcaccttatgagaaatcaaagtttttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaaggaa
ttgacggaagggcaccaccaggcgtggagcctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttaccaggtccagacatagtgaggattgacagattgagag
101
ctctttcttgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtgggttgccttgtcaggttgattccggtaacgaacgagacctcagcctgctaaatagttact
cctactttggtaggaggtgaacttcttagagggactattggcgtttagccaatggaagtgtgaggcaataacaggtctgtgatgcc
>T.carteriiformisFJ559389
taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgcaaattacccaatcctgacacagggaggtagtgacaataaataacaataccgggcttttcaagtctggtaattg
gaatgagtacaatctaaacaaccttaacgaggatccattggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccaatagcgtatatttaagttgctg
cagttaaaaagctcgtagttggatttcggatgggatttgccggtccgccgtttcggtgtgcactggccagtcccatcttgttgtcggggactagctcctgggcttc
actgtccgggactaggagctgacgaggttactttgagtaaattagagtgttcaaagcaagcctacgctctgaatacattagcatggaataacatgataggactct
ggcttatcttgttggtctgtgagaccagagtaatgattaagagggacagtcgggggcattcgtatttcattgtcagaggtgaaattcttggatttatgaaagacgaa
cttctgcgaaagcatttgtcaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagttgggggctcgaagacgattagataccgtcctagtctcaaccataaacgatgccga
ctagggattggcagacgtttttttgatgactctgccagcaccttatgagaaatcaaagtttttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaagga
attgacggaagggcaccaccaggcgtggagcctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttaccaggtccagacatagtgaggattgacagattgaga
gctctttcttgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtgggttgccttgtcaggttgattccggtaacgaacgagacctcagcctgctaaatagtta
ctcctactttggtaggaggtgaacttcttagagggactattggcgtttagccaatggaagtgtgaggcaataacaggtctgtgatgcc
>T.striataX70802
tgtcggggactagctcctgggcttcactgtccgggactaggagctgacgaggttactttgagtaaattagagtgttcaaagcaagcctacgctctgaatacatta
gcatggaataacatgataggactctggcttatcttgttggtctgtgagaccagagtaatgattaagagggacagtcgggggcattcgtatttcattgtcagaggtg
aaattcttggatttatgaaagacgaacttctgcgaaagcatttgtcaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagttgggggctcgaagacgattagataccgtcc
tagtctcaaccataaacgatgccgactagggattggcagacgtttttttgatgactctgccagcaccttatgagaaatcaaagtttttgggttccggggggagtat
ggtcgcaaggctgaaacttaaaggaattgacggaagggcaccaccaggcgtggagcctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttaccaggtccag
acatagtgaggattgacagattgagagctctttcttgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtgggttgccttgtcaggttgattccggtaacgaa
cgagacctcagcctgctaaatagttactcctactttggtaggaggtgaacttcttagagggactattggcgtttagccaatggaagtgtgaggcaataacaggtct
gtgatgcc
>T.sp.RG-07(L42530)
Taccacatccaaggaaggcagcaggcgcgcaaattacccaatcctgacacagggaggtagtgacaataaataacaataccgggcttttcaagtctggtaatt
ggaatgagtacaatctaaacaaccttaacgaggatccattggagggcaagtctggtgccagcagccgcgtaattccagctccaatagcgtatatttaagttgctg
cagttaaaaagctcgtagttggatttcggatgggatttgccggtccgccgtttcggtgtgcactggccagtcccatcttgttgtcggggactagctcctgggcttc
actgtccgggactaggagctgacgaggttactttgagtaaattagagtgttcaaagcaagcctacgctctgaatacattagcatggaataacatgataggactct
ggcttatcttgttggtctgtgagaccagagtaatgattaagagggacagtcgggggcattcgtatttcattgtcagaggtgaaattcttggatttatgaaagacgaa
cttctgcgaaagcatttgtcaaggatgttttcattaatcaagaacgaaagttgggggctcgaagacgattagataccgtcctagtctcaaccataaacgatgccga
ctagggattggcagacgtttttttgatgactctgccagcaccttatgagaaatcaaagtttttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaagga
attgacggaagggcaccaccaggcgtggagcctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttaccaggtccagacatagtgaggattgacagattgaga
gctctttcttgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtgggttgccttgtcaggttgattccggtaacgaacgagacctcagcctgctaaatagtta
ctcctactttggtaggaggtgaacttcttagagggactattggcgtttagccaatggaagtgtgaggcaataacaggtctgtgatgcc
._.
Các file đính kèm theo tài liệu này:
CH2157.pdf
