Luận án Nghiên cứu tổng hợp, xác định cấu trúc và thăm dò hoạt tính sinh học của một số phức chất pt(ii), pd(ii) với phối tử bazơ schiff

C CỦA MỘT SỐ PHỨC CHẤT Pt(II), Pd(II) VỚI PHỐI TỬ BAZƠ SCHIFF LUẬN ÁN TIẾN SỸ HÓA HỌC Chuyên ngành: Hóa Hữu cơ Mã số: 62.44.01.14 Người Hưóng dẫn Khoa học: 1. GS.TS. NGUYỄN VĂN TUYẾN 2. TS. NGUYỄN QUANG TRUNG HÀ NỘI 2017 b LỜI CAM ĐOAN Các kết quả trình bày trong luận án là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các số liệu kết quả trong luận án là trung thực và chưa từng được công bố trong bất kì công trình nào khác. Toàn bộ các thông tin trích dẫn trong luận án đã được chỉ rõ nguồn gốc xuất xứ. Tôi xin chịu trách nhiệm với những lời cam đoan của mình. Hà Nội, ngày 12 tháng 12 năm 2017 Tác giả luận án NCS. Lâm Quang Hải c LỜI CẢM ƠN Luận án này được hoàn thành tại Viện Hóa học - Viện Hàn lâm Khoa học & Công nghệ Việt Nam. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc, sự cảm phục, kính trọng đến thầy hướng dẫn khoa học là GS.TS. Nguyễn Văn Tuyến, TS. Nguyễn Quang Trung, người thầy đã tận tâm hướng dẫn khoa học, động viên, khích lệ, chỉ đạo, tạo mọi điều kiện thuận lợi nhất cho tôi trong suốt thời gian thực hiện, hoàn thành luận án cũng như các thủ tục để tôi bảo vệ luận án. Tôi xin chân thành cảm ơn đến: - GS.TS. Nguyễn Văn Tuyến–Viện trưởng, GS.TSKH. Trần Văn Sung - Tổng biên tập tạp chí Hóa học, ThS. Đặng Vũ Lương, Hội đồng Khoa học, Phòng Quản lý Tổng hợp, Phòng Hóa dược, Phòng Tổng hợp Hữu cơ, Trung tâm phân tích phổ cùng các thầy cô giáo, các nhà khoa học của Viện Hóa học đã giúp đỡ tôi thực hiện và hoàn thành luận án; - Ban lãnh đạo, Phòng Đào tạo và Nghiên cứu Khoa học của Học viện Khoa học và Công nghệ, đã đào tạo, tạo điều kiện thuận lợi và giúp đỡ tôi hoàn thành các thủ tục trong suốt thời gian bảo vệ luận án các cấp; - Tôi xin cám ơn đến 50 thầy/cô giáo, nhà khoa học của các trường Đại học, Viện nghiên cứu trong cả nước đã đọc và viết bản nhận xét tóm tắt luận án gửi về Học Viện; - Th.S Nghiêm Thùy Lan – Chủ tịch Công đoàn Tập đoàn Dầu khí QG Việt Nam đã quyết định hỗ trợ tôi một phần nhỏ kinh phí; - TS. Từ Thành Nghĩa–Tổng giám đốc, TSKH. Lâm Quang Chiến–Nguyên Phó Tổng giám đốc, ông Lê Quang Mẫn–Trưởng phòng Nhân sự, Xí nghiệp Liên doanh Việt Nga–Vietsovpetro; ông Trần Văn Thường–Giám đốc, ông Nguyễn Trọng Dương–Trưởng phòng Nhân sự, Xí nghiệp Khai thác Dầu khí – OPGE; Trong quá trình nghiên cứu tại Hà Nội, tôi đã nhận được nhiều sự động viên, giúp đỡ quý báu của thầy cô, các nhà khoa học cũng như các anh chị Nghiên cứu sinh, bạn bè gần xa và gia đình. Luận án này là món quà tinh thần, tôi xin kính dâng đến cha mẹ già, gia đình bé nhỏ của mình với tất cả lòng biết ơn, yêu thương và trân trọng. Hà Nội, ngày 12 tháng 12 năm 2017 Tác giả luận án NCS. LÂM QUANG HẢI d MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN ----------------------------------------------------------------------------- b DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT ----------------------------------------- f DANH MỤC BẢNG -------------------------------------------------------------------------- k DANH MỤC SƠ ĐỒ------------------------------------------------------------------------- m DANH MỤC HÌNH --------------------------------------------------------------------------- n MỞ ĐẦU --------------------------------------------------------------------------------------- 1 CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN ----------------------------------------------------------------- 3 1.1. Phối tử hữu cơ bazơ Schiff, phức chất kim loại M(II) và ứng dụng --------------- 3 1.2. Nghiên cứu tổng hợp, cấu trúc và hoạt tính sinh học của phức chất kim loại M(II) với phối tử bazơ Schiff dạng 4 càng N2O2 ------------------------------------------ 4 1.3. Nghiên cứu tổng hợp, cấu trúc và hoạt tính sinh học của phức chất M(II) với phối tử bazơ Schiff dạng 2 càng NO ------------------------------------------------------ 11 1.4. Tổng quan phức chất Pt(II) ứng dụng điều trị bệnh ung thư --------------------- 21 1.5. Tổng quan nghiên cứu phức chất ở Việt Nam -------------------------------------- 23 CHƯƠNG 2. THỰC NGHIỆM ------------------------------------------------------------ 26 2.1. Các phương pháp nghiên cứu --------------------------------------------------------- 26 2.1.1. Phương pháp tổng hợp và tinh chế sản phẩm ------------------------------------ 26 2.1.2. Phương pháp xác định cấu trúc ---------------------------------------------------- 26 2.1.3. Phương pháp thử hoạt tính sinh học----------------------------------------------- 26 2.2. Kỹ thuật thực nghiệm ------------------------------------------------------------------ 29 2.3. Tổng hợp salicylaldehyde có các nhóm thế tại R3, R5 (phản ứng Reimer– Tiemann) -------------------------------------------------------------------------------------- 30 2.4. Tổng hợp phối tử bazơ Schiff 4 càng và phối tử 2 càng -------------------------- 33 2.4.1. Tổng hợp dãy phối tử 4 càng H2L1, H2L2, H2L3 ---------------------------------- 33 2.4.2. Tổng hợp dãy phối tử 2 càng HL4 -------------------------------------------------- 39 2.5. Tổng hợp các phức chất Pt(II) và Pd(II) với phối tử bazơ Schiff ---------------- 45 2.5.1. Tổng hợp phức chất với dãy phối tử 4 càng H2L1, H2L2, H2L3 ----------------- 46 2.5.2. Tổng hợp phức chất với dãy phối tử 2 càng HL4 -------------------------------- 56 CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN -------------------------------------------- 65 3.1. Nghiên cứu tổng hợp các salicylaldehyde, phối tử và phức chất ---------------- 65 3.1.1. Nghiên cứu tổng hợp các salicylaldehyde có các nhóm thế tại R3, R5 -------- 65 e 3.1.2. Nghiên cứu tổng hợp phối tử 4 càng và phối tử 2 càng ------------------------- 65 3.1.3. Nghiên cứu tổng hợp phức chất với phối tử 4 càng và phối tử 2 càng ------- 66 3.2. Nghiên cứu cấu trúc phối tử và phức chất bằng phương pháp phổ hồng ngoại 68 3.2.1. Phổ hồng ngoại của dãy phối tử 4 càng và phức chất -------------------------- 68 3.2.2. Phổ hồng ngoại của dãy phối tử 2 càng và phức chất -------------------------- 70 3.3. Nghiên cứu phức chất bằng phương pháp phổ khối lượng ----------------------- 72 3.4. Nghiên cứu cấu trúc phức chất bằng phương pháp phổ NMR ------------------- 75 3.4.1. Nghiên cứu cấu trúc phức chất Pt(II), Pd(II) với dãy phối tử 4 càng H2L1 -- 75 3.4.2. Nghiên cứu cấu trúc phức chất Pt(II), Pd(II với dãy phối tử 4 càng H2L2 --- 82 3.4.3. Nghiên cứu cấu trúc phức chất Pt(II), Pd(II) với dãy phối tử 4 càng H2L3 -- 92 3.4.4. Nghiên cứu cấu trúc phức chất Pt(II), Pd(II) với dãy phối tử 2 càng HL4 -- 101 3.5. Nghiên cứu hoạt tính sinh học của phối tử và phức chất ------------------------- 127 3.5.1. Hoạt tính kháng vi sinh vật của phối tử và phức chất -------------------------- 127 3.5.2. Khả năng ức chế sự phát triển tế bào ung thư của phức chất----------------- 127 3.6. Nghiên cứu mối tương quan cấu trúc - hoạt tính sinh học của phức chất ------ 130 KẾT LUẬN ---------------------------------------------------------------------------------- 139 NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN ----------------------------------------- 140 TÀI LIỆU THAM KHẢO ----------------------------------------------------------------- 142 f DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT A549 Dòng ung thư biểu mô tế bào phổi (human lung adenocarcinoma epithelial cells line) CC Sắc kí cột (Columm Chromatography) CDCl3 Chloroform đã deuteri hóa DNA Deoxyribo Nucleic Acid DCM Dichlorometan DMSO Dung môi dimethyl sulfoxide ESI-MS Phổ khối lượng phun mù điện tử (Electrospray Ionization Mass Spectrometry) EtOH Ethanol EtOAc Ethyl acetate H(%) Hiệu suất phản ứng (%) HCT-116 Dòng ung thư đại tràng (human colon carcinoma cell line) H2L Dãy phối tử 4 càng dạng diimine N2O2, trong đó 2 H của 2 nhóm OH HL Dãy phối tử 2 càng dạng monoimine NO, trong đó 1 H của 1 nhóm OH HL-60 Dòng ung thư tuyến tiền liệt (human leukemia cell line) HeLa Dòng tế bào ung thư biểu mô (human epithelial carcinoma cell line) Hep-G2 Dòng tế bào ung thư gan (Human hepatocellular carcinoma cell line) HMBC Tương tác dị hạt nhân qua nhiều liên kết (Heteronuclear Multiple Bond Coherence) HSQC Tương tác dị hạt nhân qua một liên kết (Heteronuclear Single Quantum Coherance) IR Phổ hồng ngoại (Infrared spectroscopy) IC50 Nồng độ chất thử ức chế 50% sự phát triển của tế bào (Compound concentrations that produce 50% of cell growth inhibition) K562 Dòng tế bào ung thư máu cấp (Chronic myelogenous leukemic cell line) KB Dòng tế bào ung thư biểu mô (Human epidemoid carcinoma cell line) Lu Dòng tế bào ung thư phổi (Lung carcinoma cell line) g L Phối tử (Ligand) M Kim loại chuyển tiếp hóa trị 2 M(II) (Transition Metal) MCF-7 Dòng tế bào ung thư vú (Human breast adenocarcinoma cell line) MeOH Metanol MIC Giá trị nồng độ ức chế tối thiểu (Minimum Inhibitory Concentration values) MTT 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium N2O2 Phối tử bazơ Schiff dạng 4 càng (diimine) NO Phối tử bazơ Schiff dạng 2 càng (monoimine) P Phức chất (complex) PC3 Dòng tế bào ung thư tuyến tiền liệt (human prostate cancer cell line) Ph Nhóm phenyl rt Nhiệt độ phòng R Cấu hình (R) S Cấu hình (S) Salen Salicylaldehyde-ethylendiamine TLC Sắc kí lớp mỏng (Thin Layer Chromatography) TLTK Tài liệu tham khảo t-bu Nhóm tert-butyl br Broad d Mũi đôi (Doublet) dd Mũi đôi của mũi đôi (Doublet of doublets) dm Nhiều mũi đôi (Doublet of multiplets) dt Doublet triplet m Nhiều mũi (Multiplet) ppm Phần triệu (Parts per million) q Mũi bốn (Quartet) s Mũi đơn (Singlet) t Mũi ba (Triplet) 1H-NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton proton 1H (Proton Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy) 13C-NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân carbon 13 (Carbon-13 Nuclear h Magnetic Resonance spectroscopy) J Hằng số tương tác spin-spin (Hz) ઼ Độ dịch chuyển hóa học (ppm). Ký hiệu Tên hóa học Công thức cấu tạo 5ms 5-methoxy-salicylaldehyde 3tbs 3-t-butyl-salicylaldehyde 5tbs 5-t-butyl-salicylaldehyde 3,5tbs 3,5-di-tert-butyl-salicylaldehyde 5Cls 5-chloro-salicylaldehyde 5Brs 5-bromo-salicylaldehyde 5Is 5-iodo-salicylaldehyde 5Fs 5-fluoro-salicylaldehyde H2spd N,N'-bis(salicylidene)-1,2- phenylendiamine cis-H2scd N,N'-bis(salicylidene)- cis-1,2- cyclohexanediamine. trans-H2scd N,N'-bis(salicylidene)- trans -1,2- cyclohexanediamine. i H2sed N,N'-bis(salicylidene)-1,2- ethylenediamine H25msed N,N'-bis(5-methoxy-salicylidene)- 1,2-ethylenediamine H23tbsed N,N'-bis(3-tert-butyl-salicylidene)- 1,2-ethylenediamine H25tbsed N,N'-bis(5-tert-butyl-salicylidene)- 1,2-ethylenediamine H23,5tbsed N,N'-bis(3,5-di-tert-butyl- salicylidene)-1,2-ethylenediamine H25Clsed N,N'-bis(5-chloro-salicylidene)- 1,2-ethylenediamine H25Brsed N,N'-bis(5-bromo-salicylidene)- 1,2-ethylenediamine H25Ised N,N'-bis(5-iodo-salicylidene)-1,2- ethylenediamine H25Fsed N,N'-bis(5-fluoro-salicylidene)- 1,2-ethylenediamine (R)-Hspa (R)-N-salicylidene-1- phenylethylamine (S)-Hspa (S)-N-salicylidene-1- phenylethylamine (S)-H5mspa (S)-N-5-methoxy-salicylidene-1- phenylethylamine j (R)-H5tbspa (R)-N-5-tert-butyl-salicylidene-1- phenylethylamine (S)-H5tbspa (S)-N-5-tert-butyl-salicylidene-1- phenylethylamine (R)-H5Clspa (R)-N-5-chloro-salicylidene-1- phenylethylamine (S)-H5Clspa (S)-N-5-chloro-salicylidene-1- phenylethylamine (R)-H5Brspa (R)-N-5-bromo-salicylidene-1- phenylethylamine (S)-H5Brspa (S)-N-5-bromo-salicylidene-1- phenylethylamine (R)-H5Ispa (R)-N-5-iodo-salicylidene-1- phenylethylamine (S)-H 5Ispa (S)-N-5-iodo-salicylidene-1- phenylethylamine (R)-H5Fspa (R)-N-5-fluoro-salicylidene-1- phenylethylamine (S)-H5Fspa (S)-N-5-fluoro-salicylidene-1- phenylethylamine H2L1 Dãy phối tử dạng 4 càng diimine N2O2: H2spd, cis-H2scd, trans- H2scd H2L2 Dãy phối tử 4 càng N2O2: H2sed; H25msed, H23tbsed, H25tbsed, H23,5tbsed. H2L3 Dãy phối tử 4 càng N2O2: H25Clsed, H25Brsed, H25Ised; H25Fsed HL4 Dãy phối tử 2 càng NO: (R)- và (S)-Hspa, (S)-H5mspa, (R)- và (S)- H5tbspa, (R)- và (S)-H5Clspa, (R)- và (S)-H5Brspa, (R)- và (S)- H5Ispa, (R)- và (S)-H5Fspa. k DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1. Phức chất kim loại M(II) với phối tử đi từ dẫn xuất salicylaldehyde với 1,3-propanediamine ................................................................................................. 5 Bảng 1.2. Phức chất kim loại M(II) với phối tử đi từ dẫn xuất salicylaldehyde và dẫn xuất 1,2-ethylenediamine .................................................................................. 5 Bảng 1.3. Phức chất kim loại M(II) với phối tử đi từ dẫn xuất salicylaldehyde với dẫn xuất 1,2-phenylenediamine ............................................................................... 8 Bảng 1.4. Phức chất Cu(II) với phối tử 3,5-di-tert-butyl salicylaldehyde ............... 19 Bảng 1.5. Phức chất Cu(II) với phối tử đi từ dẫn xuất salicylaldehyde [105] ......... 19 Bảng 2.1. Hóa chất và dung môi ............................................................................ 29 Bảng 2.2. Hiệu suất tổng hợp và màu sắc của dẫn xuất salicylaldehyde ................. 31 Bảng 2.3. Hiệu suất và màu sắc của các phối tử bazơ Schiff dạng 4 càng ............. 34 Bảng 2.4. Hiệu suất tổng hợp và màu sắc của các phối tử bazơ Schiff 2 càng NO. 40 Bảng 2.5. Hiệu suất tổng hợp và màu sắc của các phức chất với phối tử 4 càng ..... 48 Bảng 2.6. Hiệu suất tổng hợp và màu sắc của các phức chất với phối tử 2 càng ..... 57 Bảng 3.1. Các dải dao động đặc trung trong phổ IR của phối tử và phức chất dạng 4 càng N2O2 dãy H2L1; H2L2; H2L3 (ν, cm-1) ............................................................. 68 Bảng 3.2. Các dải dao động đặc trung trong phổ IR của phối tử và phức chất dạng 2 càng dãy HL4 (ν, cm-1) ........................................................................................... 70 Bảng 3.3. Mảnh ion phân tử trong phổ khối lượng của các phối tử và phức chất .... 72 Bảng 3.4. Dữ liệu phổ NMR của phối tử 110 và phức chất 121a, 121b.................. 77 Bảng 3.5. Dữ liệu phổ NMR của phối tử 111a và phức chất 122a, 122b ................ 79 Bảng 3.6. Dữ liệu phổ NMR của phối tử 111b và phức chất 122c, 122d ................ 80 Bảng 3.7. Dữ liệu phổ NMR của phối tử 112a và phức chất 123a, 123b ................ 83 Bảng 3.8. Dữ liệu phổ NMR của phối tử 112b và phức chất 124a, 124b ............... 85 Bảng 3.9. Dữ liệu phổ NMR của phối tử 112d phức chất 126a, 126b .................... 85 Bảng 3.10. Dữ liệu phổ NMR của phối tử 112c và phức chất 125a, 125b .............. 88 Bảng 3.11. Dữ liệu phổ NMR của phối tử 112e và phức chất 127 .......................... 89 Bảng 3.12. Dữ liệu phổ NMR của phối tử 112i và phức chất 131 .......................... 96 Bảng 3.13. Dữ liệu phổ NMR của phối tử 112f và phức chất 128a, 128b .............. 97 Bảng 3.14. Dữ liệu phổ NMR của phối tử 112g và phức chất 129a, 129b .............. 98 Bảng 3.15. Dữ liệu phổ NMR của phối tử 112f và phức chất 130a, 130b .............. 99 l Bảng 3.16. Dữ liệu phổ NMR của phối tử 114a và phức chất 132a, 132b ............ 105 Bảng 3.17. Dữ liệu phổ NMR của phối tử 115 và phức chất 132c và 133 ............ 107 Bảng 3.18. Dữ liệu phổ NMR của phối tử 116a và phức chất 134a, 134b ............ 112 Bảng 3.20. Dữ liệu phổ NMR của phức chất 138b, 138c ..................................... 119 Bảng 3.21. Dữ liệu phổ NMR của phối tử 118a và phức chất 136b ..................... 120 Bảng 3.22. Dữ liệu phổ NMR của phối tử 118b và phức chất 136a, 136c ............ 121 Bảng 3.23. Dữ liệu phổ NMR của phối tử 117a phức chất 135a, 135b ................. 125 Bảng 3.24. Dữ liệu phổ NMR của phối tử 119a phức chất 137a, 137b ................ 125 Bảng 3.25. Kết quả hoạt tính kháng vi sinh vật của phối tử và phức chất ............. 127 Bảng 3.26. Kết quả nghiên cứu hoạt tính gây độc tế bào của phức chất ............... 128 Bảng 3.27. Bảng tổng kết các phức chất Pt(II), Pd(II) với phối tử bazơ Schiff 4 càng và 2 càng ............................................................................................................. 133 m DANH MỤC SƠ ĐỒ Sơ đồ 1.1. Sơ đồ phản ứng tạo thành phối tử bazơ Schiff [12].................................. 3 Sơ đồ 1.2. Sơ đồ chung tổng hợp phức chất M(II) với phối tử đi từ dẫn xuất salicyl- aldehyde và 1,3-propanediamine [61], [62], [63], [64], [65] .................................... 4 Sơ đồ 1.3. Tổng hợp phức chất M(II) với phối tử đi từ dẫn xuất salicylaldehyde và dẫn xuất 1,2-phenylenediamine [73], [74], [75], [76], [77], [78], [79], [80], [81] ..... 8 Sơ đồ 1.4. Phối tử bazơ Schiff đi từ salicylaldehyde với các dẫn xuất amine [86] . 11 Sơ đồ 1.5. Tổng hợp phối tử từ 5-chloro-salicylaldehyde với các amine [87] ......... 12 Sơ đồ 1.6. Sơ đồ tổng hợp phức chất với phối tử di từ salicylaldehyde/ 5-methoxy- salicylaldehyde và dẫn xuất amine [85], [90] ......................................................... 13 Sơ đồ 1.7. Phức Pt(II) với phối tử đi từ salicylaldehyde và dẫn xuất amine [92] .... 14 Sơ đồ 1.8. Phức chất với phối tử đi từ dẫn xuất amine [93], [94], [95] ................... 15 Sơ đồ 1.9. Tổng hợp phức chất với phối tử từ dẫn xuất salicylaldehyde và dẫn xuất monoamine [100], [101], [102] .............................................................................. 17 Sơ đồ 1.10. Phức chất Cu(II) với 3,5-di-tert-butyl-salicylaldehyde [103] .............. 18 Sơ đồ 1.11. Phức chất Cu(II) với phối tử đi từ 3,5-dibromo-salicylaldehyde hoặc 3,5-dichloro-salicylaldehyde và các amine [105] ................................................... 20 Sơ đồ 1.12. Tổng hợp phức chất với phối tử đi từ 5-bromo-salicylaldehyde và dẫn xuất monoamine [108] ........................................................................................... 20 Sơ đồ 2.1: Sơ đồ tổng hợp các salicylaldehyde có các nhóm thế R3, R5 khác nhau . 30 Sơ đồ 2.2. Tổng hợp dãy phối tử bazơ Schiff H2L2, H2L2, H2L3 ............................ 33 Sơ đồ 2.3. Sơ đồ chung tổng hợp các phối tử bazơ Schiff dạng 2 càng NO ............ 40 Sơ đồ 2.4. Sơ đồ tổng hợp các phức chất với phối tử dạng 4 càng diimine N2O2 .... 47 Sơ đồ 2.5. Sơ đồ chung tổng hợp các phức chất với phối tử dạng 2 càng NO ......... 57 Sơ đồ 3.1. Sơ đồ tổng hợp các phức chất 121a, 121b ............................................. 75 Sơ đồ 3.2. Sơ đồ tổng hợp các phức chất 122a, 122b, 122c, 122d.......................... 78 Sơ đồ 3.3. Sơ đồ tổng hợp 9 phức chất 123a,b; 124a,b; 125a,b; 126a,b; 127 ....... 82 Sơ đồ 3.4. Sơ đồ tổng hợp 7 phức chất dạng 4 càng 128a,b, 129a,b, 130a,b, 131 .. 92 Sơ đồ 3.5. Sơ đồ tổng hợp 6 phức chất 132a, 132b, 132c, 133, 134a, 134b ......... 102 Sơ đồ 3.6. Sơ đồ tổng hợp 10 phức chất 135a,b, 136a,b,c, 137a,b, 138a,b, 138c 113 n DANH MỤC HÌNH Hình 1.1. Cấu tạo của phức chất M(II) với phối tử đi từ dẫn xuất salicylaldehyde và dẫn xuất 1,2-ethylenediamine .................................................................................. 5 Hình 1.2. Cấu trúc X-ray của phức chất 4a .............................................................. 6 Hình 1.3. Cấu trúc X-ray của phức chất 14 .............................................................. 7 Hình 1.4. Cấu trúc X-ray của phức 29a.................................................................... 9 Hình 1.5. Cấu tạo các phức chất M(II) với phối tử đi từ dẫn xuất diamine ............. 10 Hình 1.7. Cấu tạo phức chất 81, 82 ........................................................................ 15 Hình 1.8. Cấu trúc X-ray phức chất 81 .................................................................. 16 Hình 1.9. Cấu trúc phức chất 82 ............................................................................ 16 Hình 1.10. Cấu trúc X-ray phức chất 83a............................................................... 16 Hình 1.11. Cấu trúc X-ray phức chất 83b .............................................................. 16 Hình 1.12. Cấu trúc của phức chất 80 .................................................................... 17 Hình 1.13. Cấu trúc của phức chất 86 .................................................................... 17 Hình 1.14. Cấu trúc X-ray phức [Cu(L5)2] 88e ....................................................... 19 Hình 1.16. Các phức chất platin(II) đã được chấp nhận sử dụng trên thế giới ........ 22 Hình 1.17. Các phức platin(II) đã chấp nhận ở một số nước .................................. 23 Hình 2.1. Chất 5ms 108b ....................................................................................... 31 Hình 2.2. Chất 3tbsa 108c...................................................................................... 31 Hình 2.3. Chất 5tbs 108d ....................................................................................... 32 Hình 2.4. Chất 3,5tbsa 108e ................................................................................... 32 Hình 2.5. Chất 5Clsa 108f ..................................................................................... 32 Hình 2.6. Chất 5Brsa 108g .................................................................................... 32 Hình 2.7. Chất 5Isa 108h ....................................................................................... 32 Hình 2.8. Chất 5Fsa 108i ....................................................................................... 32 Hình 2.9. Phối tử H2spd 110 .................................................................................. 35 Hình 2.10. Phối tử cis-H2scd 111a ......................................................................... 36 Hình 2.11. Phối tử trans-H2scd 111b ..................................................................... 36 Hình 2.12. Phối tử H2sed 112a .............................................................................. 36 Hình 3.1. Phổ hấp thụ IR của phối tử H23tbsed 112c .............................................. 68 Hình 3.2. Phổ hấp thụ IR của phức [Pd(3tbsed)] 125b ........................................... 70 Hình 3.3. Phổ IR của phối tử 2 càng (S)-H5tbspa 116b.......................................... 72 o Hình 3.4. Phổ IR của phức chất [Pd(S-5tbspa)2] 134b............................................ 72 Hình 3.5. Phổ ESI-MS của phức [Pt(3tbsed)] 125a ................................................ 73 Hình 3.6. Phổ ESI-MS của phức [Pd(5Clsed)] 128b .............................................. 74 Hình 3.7. Phổ ESI-MS của phức chất [Pd((R)5tbspa)2] 134a ................................. 74 Hình 3.8. Phổ ESI-MS của phức chất [Pt(R-5Fspa)2] 138a .................................... 74 Hình 3.9. Phổ 1H-NMR của phối tử 4 càng H2spd 110g ......................................... 76 Hình 3.10. Phổ 1H-NMR giãn rộng vùng carbon thơm của phức [Pd(spd)] 121b ... 77 Hình 3.11. Phổ 13C-NMR giãn rộng của phức chất [Pd(spd)] 121b ........................ 77 Hình 3.12. Phổ 1H-NMR của phối tử cis-H2scd 111a ............................................. 79 Hình 3.13. Phổ 1H-NMR của phức chất [Pt(cis-scd)] 122a .................................... 79 Hình 3.14. Phổ 1H-NMR của phức chất [Pt(trans-scd)] 122c ................................. 79 Hình 3.15. Phổ 13C-NMR giãn của phức chất [Pt(cis-scd)] 122a............................ 81 Hình 3.16. Phổ 1H-NMR của phối tử H23,5tbsed 112e........................................... 83 Hình 3.17. Phổ 1H-NMR giãn của phức chất [Pt(sed)] 123a .................................. 84 Hình 3.18. Phổ 1H-NMR giãn của phức chất [Pd(5msed)] 124b ............................ 84 Hình 3.19. Phổ 1H-NMR giãn của phức chất [Pd(5tbsed)] 126b ............................ 84 Hình 3.20. Phổ 13C-NMR giãn của phức chất [Pd(5tbsed)] 126b ........................... 86 Hình 3.21. Phổ 1H-NMR của phức chất [Pd(3tbsed)] 125b .................................... 87 Hình 3.22. Phổ HSQC giãn của phức chất [Pd(3tbsed)] 125b ................................ 87 Hình 3.23. Phổ HMBC của phức chất [Pd(3tbsed)] 125b....................................... 87 Hình 3.24. Phổ HSQC của phức chất [Pd(3,5tbsed)] 127 ....................................... 89 Hình 3.25. Phổ HMBC của phức chất [Pd(3,5tbsed)] 127 ...................................... 90 Hình 3.26. Phổ 13C-NMR giãn của phức chất [Pd(3,5tbsed)] 127 .......................... 90 Hình 3.27. Phổ 1H-NMR của phối tử H2Clsed 112f ............................................... 93 Hình 3.28. Phổ 1H-NMR giãn vùng thơm của phức chất [Pd(5Fsed)] 131 ............. 94 Hình 3.29. Phổ HSQC của phức chất [Pd(5Fsed)] 131 ........................................... 94 Hình 3.30. Phổ HMBC của phức chất [Pd(5Fsed)] 131.......................................... 95 Hình 3.31. Phổ 13C-NMR giãn vùng thơm của phức chất [Pd(5Fsed)] 131 ............ 95 Hình 3.32. Phổ HSQC giãn của phức chất [Pd(5Clsed)] 128b ............................... 96 Hình 3.33. Phổ HMBC giãn của phức chất [Pd(5Clsed)] 128b .............................. 97 Hình 3.34. Phổ 1H-NMR của phức chất [Pd(5Clsed)] 128b ................................... 98 Hình 3.35. Phổ 13C-NMR của phức chất [Pd(5Clsed)] 128b .................................. 98 p Hình 3.36. Phổ 1H-NMR của phức chất [Pt(5Brsed)] 129a .................................... 99 Hình 3.37. Phổ 1H-NMR của phức chất [Pd(5Ised)] 130b...................................... 99 Hình 3.38. Phổ 13C-NMR của phức chất [Pt(5Brsed)] 129° ................................. 100 Hình 3.39. Phổ 13C-NMR của phức chất [Pd(5Ised)] 130b .................................. 100 Hình 3.40. Phổ 1H-NMR của phôi tử (R)-H5tbspa 116° ....................................... 103 Hình 3.41. Phổ 1H-NMR giãn của phức chất [Pt(R-spa)2] 132a ........................... 104 Hình 3.42. Phổ HMBC của phức chất [Pt(R-spa)2] 132a ...................................... 104 Hình 3.43. Phổ HMBC của phức chất [Pt(R-spa)2] 132a ...................................... 104 Hình 3.44. Phổ 13C-NMR giãn của phức chất [Pt(R-spa)2] 132a .......................... 106 Hình 3.45. Phổ HMBC giãn của phức chất [Pd(S)5mspa)2] 133 ........................... 107 Hình 3.46. Phổ 1H-NMR của phức chất [Pd(S)5mspa)2] 133 ............................... 108 Hình 3.47. Phổ 13C-NMR của phức chất [Pd(S)5mspa)2] 133 .............................. 109 Hình 3.48. Phổ 1H-NMR phức của chất [Pd(R-5tbspa)2] 134a ............................. 109 Hình 3.49. Phổ 13C-NMR của phức chất [Pd(R-5tbspa)2] 134a ............................ 109 Hình 3.50. Phổ 1H-NMR của phức chất [Pd(S-5tbspa)2] 134b ............................. 110 Hình 3.51. Phổ HSQC của phức chất [Pd(S-5tbspa)2] 134b ................................. 110 Hình 3.52. Phổ HMBC của phức chất [Pd(S-5tbspa)2] 134b ................................ 111 Hình 3.53. Phổ 13C-NMR của phức chất [Pd(S-5tbspa)2] 134b ............................ 111 Hình 3.54. Phổ 1H-NMR của phối tử (R)-H5Clspa 117a ...................................... 114 Hình 3.55. Phổ 1H-NMR của phức chất [Pt(R-5Fspa)2] 138a ............................... 115 Hình 3.56. Phổ HMBC giãn của phức chất [Pt(R-5Fspa)2] 138a .......................... 116 Hình 3.57. Phổ 13C-NMR của phức chất [Pt(R-5Fspa)2] 138a .............................. 116 Hình 3.58. Phổ HSQC giãn của phức chất [Pd(R-5Fspa)2] 138b .......................... 118 Hình 3.59. Phổ HMBC giãn của phức chất [Pd(R-5Fspa)2] 138b ......................... 118 Hình 3.60. Phổ 1H-NMR của phức chất [Pd(R-5Fspa)2] 138b .............................. 119 Hình 3.61. Phổ 13C-NMR của phức chất [Pd(R-5Fspa)2] 138b ............................. 119 Hình 3.62. Phổ 1H-NMR của phức chất [Pd(R-5Brspa)2] 136b ............................ 120 Hình 3.63. Phổ HSQC giãn của phức chất [Pd(R-5Brspa)2] 136b ........................ 121 Hình 3.64. Phổ HMBC giãn của phức chất 136b ................................................. 121 Hình 3.65. Phổ 13C-NMR của phức chất [Pd(R-5Brspa)2] 136b ........................... 122 Hình 3.66. Phổ 1H-NMR của phức chất [Pd(S-5Clspa)2] 135b ............................. 124 Hình 3.67. Phổ 1H-NMR của phức chất [Pd(S-5Ispa)2] 137b ............................... 124 q Hình 3.68. Phổ 13C-NMR của phức chất [Pd(S-5Ispa)2] 137b .............................. 125 Hình 3.69. Phổ 13C-NMR của phức chất [Pd(S-5Clspa)2] 135b ............................ 126 Hình 3.70. Một số phức chất có hoạt tính kháng ung thư ..................................... 130 1 MỞ ĐẦU Hiện nay ung thư là một trong những căn bệnh gây tử vong hàng đầu trên thế giới và có xu hướng ngày càng gia tăng. Theo Tổ chức Y tế Thế giới (WHO), hàng năm có khoảng 7,6 triệu người chết vì bệnh ung thư. Ở Việt Nam, theo số liệu thống kê mỗi năm có khoảng 200 nghìn bệnh nhân mắc bệnh ung thư và 75 nghìn người chết mỗi năm. Chi phí chữa bệnh rất tốn kém nhưng cũng chỉ ức chế sự phát triển của bệnh và kéo dài thời gian sống. Chính vì vậy, nhiều nước có rất nhiều chương trình nghiên cứu, đầu tư công nghệ, chiết tách các hợp chất thiên nhiên... để nghiên cứu tổng hợp các hợp chất mới có hoạt tính sinh học làm co sở cho việc bào chế thuốc mới dang là vấn dề thu hút duợc rất nhiều nhà khoa học trên thế giới quan tâm. Phức chất của kim loại chuyển tiếp với các phối tử bazơ Schiff đã thể hiện hoạt tính sinh học cao, đa dạng như kháng nấm, kháng khuẩn, các hoạt chất diệt cỏ, chống co giật, chống oxy hóa, chống viêm, chống sốt rét....và có nhiều triển vọng trong điều trị bệnh ung thư nên đã thu hút các nhà khoa học trong nước và thế giới. Thuốc thế hệ đầu tiên điều trị bệnh ung thư là cis-platin (cis-[Pt(NH3)2Cl2]) đang được sử dụng rộng rãi trên thế giới, nhưng nó có nhược điểm là độc tính cao, độ tan kém. Do đó, việc nghiên cứu tổng hợp các phức chất mới nhằm khắc phục các nhược điểm trên là một trong những mục tiêu...3 88c không có hoạt tính. So sánh các giá trị IC50 của các phối tử cho thấy, khi tăng số lượng nguyên tử F trong vòng anilin thì hiệu quả gây độc tế bào của các phối tử tăng. Nhưng trong một số trường hợp ngoại lệ, đặc biệt là 2,4- F2Ph-3-tert-butylsalicylaldimine và các hợp chất 2,4-F2Ph-5-tert-butylsalicylaldi- 19 imine, chỉ chứa một nhóm thế tert-butyl trên salicylaldiimine, giá trị IC50 khoảng 16 µM. Mặt khác, các phối tử 3,5-di-tert-butylsalicylaldi imine không có F, có nhiều nhóm đẩy điện tử như di-CH3 (2,3-, 3,4-, 2,5- và 3,5-di-CH3)2 -CH3, 4-CH3 và nhóm thế 4-OCH3 trên vòng anilin có tác dụng gây độc tế bào không đáng kể (IC50 = 568- 2078 µM) trong cùng điều kiện. Những kết quả này chứng minh rằng tác dụng gây độc tế bào của bazơ Schiff HLx có liên quan với số lượng và vị trí của nguyên tử F trên vòng anilin. Hoạt tính gây độc tế bào của phức chất 89a-f có giá trị IC50 là 1,27; >100; 90; 2,8; 1,12 và 3,21 µM tương ứng. Những dữ liệu này cho thấy phức chất Cu(II) của phối tử HL1, HL4, HL5 hoạt tính mạnh gây độc dòng tế bào ung thư bạch cầu mãn tính K562. Bảng 1.4. Phức chất Cu(II) với phối tử 3,5-di-tert-butyl salicylaldehyde X1 X2 X3 X4 X5 L P IC50 (µM) F H F H H HL1 88a [Cu(L1)2] 89a 1,27 F H H F H HL2 88b [Cu(L2)2] 89b >100 F H H H F HL3 88c [Cu(L3)2] 89c 90 F F F H H HL4 88d [Cu(L4)2] 89d 2,8 F F H F F HL5 88e [Cu(L5)2] 89e 1,12 F F F F F HL6 88f [Cu(L6)2] 89f 3,21 H H F H H HL7 88g [Cu(L7)2] 89g 105 F H H H H HL8 88h [Cu(L8)2] 89h 75 CH3 H H CH3 H HL9 88i 89i 745 H H CH3 H H HL10 88j 89j 703 Hình 1.14. Cấu trúc X-ray phức [Cu(L5)2] 88e Bảng 1.5. Phức chất Cu(II) với phối tử đi từ dẫn xuất salicylaldehyde [105] HL1 HL2 HL3 HL4 HL5 HL6 R1 H H H H CH3 CH3 R2 CH2CH2CH3 CH(CH3)2 CH2CH3 CH2CH2Br CH3 CH3 X Br Br Br Br Br Cl 20 M Cu 90, Ni 91 Cu 92, Ni 93 Cu 94, Ni 95, Zn 96 Cu 97 Zn 98a, Co 98b Cu 99 M Cu 90, Ni 91 Cu 92, Ni 93 Cu 94, Ni 95, Zn 96 Cu 97 Zn 98a, Co 98b Cu 99 OH N X X R2 R1 HL1-5 (X = Br); HL6 (X = Cl) O N X X R1 R2 M O N X X R1 R2 M(NO3)2.xH2O Sơ đồ 1.11. Phức chất Cu(II) với phối tử đi từ 3,5-dibromo-salicylaldehyde hoặc 3,5-dichloro-salicylaldehyde và các amine [105] Nghiên cứu ảnh hưởng của nhóm thế hút điện tử trong vòng thơm tác giả Yongming Cui và cộng sự đã tổng hợp phối tử và phức chất từ phản ứng ngưng tụ giữa 3,5-dibromo- salicylaldehyde hoặc 3,5-dichloro- salicylaldehyde với amine và các muối kim loại tương ứng (Sơ đồ 1.11). Nghiên cứu hoạt tính sinh học cho kết quả là kháng lại enzym jack urease type III. Kết quả cho thấy phức chất Cu(II) 90, 92, 94, 97, 99 (Bảng 1.5) có hoạt tính ức chế enzym urease mạnh (IC50 = 1,51–3,52 µM) so với chất chuẩn acetohydroxamic (IC50 = 62,52 µM) [105]. Hình 1.15. Cấu trúc X-ray phức 97 O N M N O X X Br BrOH N X Br X= Cl, HL1 100a Br, HL2 100b methanol Sơ đồ 1.12. Tổng hợp phức chất với phối tử đi từ 5-bromo-salicylaldehyde và dẫn xuất monoamine [108] Tiếp tục nghiên cứu ảnh hưởng nhóm hút điện tử, tác giả S. Jone Kiruba- vathy và cộng sự [106], Lei Shi [107], Ahmed Nuri Kursunlu [108] tổng hợp 2 phối 21 tử (E)-4-bromo-2-((2-chloroethylimino)-methyl)phenol (HL1: R5 = Br, X = Cl) 100a và (E)-4-bromo-2-((2-bromoethylimino)-methyl)phenol (HL2: X = Br) 100b. Các phức chất kim loại [M(L1)2], [M(L2)2] 101a-b (Sơ đồ 1.12) tổng hợp với muối kim loại M lần lượt: Cu(II), Zn(II), Ni(II). Trong số các phối tử bazơ Schiff tổng hợp được (HL1 và HL2) với nhóm thế Cl, Br và OH có hoạt tính ức chế, kháng lại một số vi khuẩn Gram dương và Gram âm. Các phức chất Zn(II) và Ni(II) với phối tử 101a-b có hoạt tính kháng khuẩn mạnh. Một số nhận xét về nghiên cứu tổng quan Như phần tổng quan đã nghiên cứu trên đây, phức chất với phối tử bazơ Schiff đi từ salicylaldehyde và 1,2-phenylendiamine hoặc dẫn xuất 1,2- phenylendiamine không thể hiện hoạt tính như mong muốn phù hợp với các công trình đã công bô [73], [74], [75], [76], [78], [79], [80], [81]. Kết quả nghiên cứu lại chỉ ra rằng, các phức chất với dãy phối tử của dẫn xuất salicylaldehyde với 1,3-propanediamine không thể hiện hoạt tính sinh học như mong muốn [61], [62], [63], [64], [65]. Các công trình đã công bô [66], [67], [68], [69], [72], [78] của phức chất với phối tử đi từ dẫn xuất của salicylaldehyde có các nhóm thế -F, -OCH3, OC2H5 ở các vị trí khác nhau, phản ứng với 1,2-ethylenediamine hoặc dẫn xuất 1,2- ethylenediamine (ví dụ nhóm -C=N-) có hoạt tính sinh học tốt. Mối quan hệ giữa hoạt tính sinh học và cấu trúc của phức chất dạng 2 càng monoamine NO, được tiếp tục nghiên cứu và đi đến những khẳng định xác đáng bởi các nhà khoa học như phối tử có cấu hình bất đối xứng đồng phân đối quang R và S cho hoạt tính sinh học khác nhau [85], [139]. Phức chất có nhóm thế hút điện tử trong vòng thơm hay trên dẫn xuất amine có hoạt tính tốt hơn nhóm đẩy điện tử [93], [105]. Tiếp tục nghiên cứu phức chất dạng 2 càng NO khi thay thế phối tử có nhóm hút điện tử Cl, Br, I trong vòng thơm bằng nguyên tử F hút điện tử mạnh nhất trong nhóm halogene hoặc nhóm thế F trên dẫn xuất amine cho kết quả hoạt tính kháng ung thư tốt nhất [91], [103], [106], [107], [108], [143] hoạt tính tốt nhất là các phối tử có nhóm hydroxyl –OH, –F hoặc nhóm sulfhydryl –SH trong dẫn xuất amine. 1.4. Tổng quan phức chất Pt(II) ứng dụng điều trị bệnh ung thư Cho đến nay, các nhà hóa học đã tổng hợp phức chất platin với số lượng lớn, 22 đã thử nghiệm lâm sàng trên người. Trong số đó cis-platin, carboplatin, oxaliplatin đã được chấp nhận và sử dụng điều trị bệnh ung thư trên toàn thế giới. Nedaplatin, heptaplatin và lobaplatin được chấp nhận ở một số nước như Nhật Bản, Trung Quốc và Hàn Quốc. Các loại thuốc khác có tác dụng phụ và có hoạt tính kém trong giai đoạn thử nghiệm I hoặc II nên đã dừng phát triển thành thuốc, gần đây như thuốc satraplatin và picoplatin [109]. cis-platin 102 được tổng hợp đầu tiên vào năm 1845 (Hình 1.16). Năm 1969, Rosenberg và nhóm nghiên cứu đã chứng minh cis-platin có hoạt tính gây độc tế bào ung thư, mở ra con đường mới cho các ứng dụng của phức chất kim loại chuyển tiếp trong điều trị bệnh ung thư. Tuy nhiên, cis-platin gây ảnh hưởng xấu đến các mô bình thường, giảm hiệu quả điều trị bệnh, tác dụng phụ nghiêm trọng và hoạt tính tương đối nghèo để kháng một số loại ung thư phổ biến (ví dụ ung thư đại trực tràng và ung thư tế bào phổi). Hình 1.16. Các phức chất platin(II) đã được chấp nhận sử dụng trên thế giới Những hạn chế này đã đặt ra một thử thách cho các nhà hóa dược là thay đổi cấu trúc của cis-platin. Trong nhiều năm qua, hàng ngàn các dẫn xuất phức chất platin đã được nghiên cứu và tổng hợp. Trong số này, các hợp chất chứa phối tử DACH được ghi nhận. Phối tử DACH đầy hứa hẹn vì không gây độc thận như cis- platin và suy tủy như carboplatin, có hoạt tính kháng u [110]. Carboplatin 103 là dẫn xuất cis-platin (Hình 1.16) là thuốc điều trị ung thư thế hệ thứ hai, được đưa vào điều trị năm 1989 ở Mỹ và Pháp. Carboplatin được thử nghiệm lâm sàng trên ung thư buồng trứng. Carboplatin còn điều trị ung thư tế bào phổi nhỏ và ung thư biểu bì của đầu và cổ. Tác dụng phụ giảm, đặc biệt là không có độc tính thận, thần kinh và trên tai. Tuy nhiên, nhược điểm chính là hiệu quả ức chế tủy của nó, đặc biệt là làm giảm bạch cầu nên tăng nguy cơ nhiễm trùng do viêm nhiễm [111]. 23 Oxaliplatin 104 là thuốc điều trị ung thư thế hệ thứ ba (Hình 1.16), phức chất tạo thành khi các ion kim loại phối trí với phối tử DACH (1,2- diaminocyclohexane) và oxalate. Oxaliplatin là tác nhân có hoạt tính tốt nhất trong số các hợp chất chứa phối tử DACH của kim loại platin. Nó đã được chứng minh có hiệu quả trong điều trị ung thư đại trực tràng và tiền ung thư buồng trứng [112]. Lobaplatin 105 (Hình 1.16) có hoạt tính gây độc các dòng tế bào ung thư như phức chất cis-platin và carboplatin. Lobaplatin điều trị ung thư vú di căn, thực quản, phổi, và buồng trứng, và bệnh bạch cầu tủy mãn tính [113]. Các thuốc trên cơ sở phức chất platin(II) khác đang được thử nghiệm lâm sàng như Nedaplatin 106a (Hình 1.17). Thuốc được đăng ký tại Nhật Bản từ năm 1995 để điều trị ung thư đầu, cổ, tinh hoàn, phổi, buồng trứng, cổ tử cung [113]. Hình 1.17. Các phức platin(II) đã chấp nhận ở một số nước Heptaplatin 106b điều trị các bệnh ung thư dạ dày và phổi đã được chấp thuận để điều trị lâm sàng ở Hàn Quốc [114]. Enloplatin 106c có nhóm thay thế trùng với carboplatin nhưng không gây độc cho thận. Enloplatin đã bước vào giai đoạn thử nghiệm lâm sàng ở Bỉ (Hình 1.17). 1.5. Tổng quan nghiên cứu phức chất ở Việt Nam Nhóm nghiên cứu [4] đã tổng hợp và xác định cấu trúc 20 phức cis-diamin hỗn tạp của platin(II) trong đó có một amin là quinolin còn amin khác là amin béo mạch hở, mạch vòng và các amin thơm. Thử hoạt tính sinh học trên chuột nhắt trắng Swiss cho thấy phức dihydrocisplatin có công thức hóa học [Pt(NH3Cl)2(OH)2] làm giảm thể tích trung bình mỗi u, giảm tổng số và mật độ tế bào ung thư đạt chỉ số ức chế phát triển u tới 85,3%. Nhóm tác giả [5] đã tổng hợp phức platin(II) chứa phối tử amin gồm P1: cis- diclorodi(p-phenetidine)platin(II) [Pt(p-phenetidine)2Cl2], P2: cis-diclorodi(4-metyl piperidin)platin(II) [Pt(4-metylpiperidin)2Cl2], P3 chứa amin có phối trí hai càng là cis-dicloro(o-phenetylenamine)platin(II) [Pt(o-phenetylenamine)Cl2]. Kết quả thăm dò hoạt tính gây độc tế bào cho thấy phức P3 thể hiện hoạt tính tốt đối với tế bào 24 ung thư vú MCF-7 (87,13%). Giá trị IC50 của phức này 14,41 µg/ml. Tác giả [6] đã tổng hợp, xác định cấu trúc của 14 phức cis-dicloroanilinamin platin(II) và thăm dò hoạt tính trên 4 dòng tế bào ung thư (ung thư màng tử cung, gan, màng tim và tiền thận khỉ). Kết quả thử nghiệm cho thấy có 5 phức có hoạt tính ung thư tốt. Phức P13 (dicloroanilin cyclohexylaminplatin(II)) và P14 (dicloroanilin morpholin platin(II)) có hoạt tính kháng mạnh trên 4 dòng ung thư với IC50 3,2–5,08 µg/ml. Phức chất P15 (dicloroanilin piperidinplatin(II)) có hoạt tính trên 3 dòng tế bào ung thư (FI, RD, VR) với IC50 từ 3,5–5,08 µg/ml. Phức P2 (dicloroanilin quinolinplatin(II)) hoạt tính trên dòng tế bào ung thư VR với IC50 = 4,8 µg/ml. Tác giả [7] đã tổng hợp 10 phức platin(II) với dẫn xuất thiosemicacbazon. Phức platin [Pt(L3)L4] ( L3: 4-phenylthiosemicacbazon diaxetylmonoxim, L4: 2,4- dimetylpyridin) và phức platin [Pt(L3)L5] (L5: 2-aminopyridin) có IC50 (0,8–1,9) µg/ml đối với tế bào ung thư ở người; (0,4–2,4) µg/ml đối với tế bào ung thư màng tử cung ở người tương ứng hai phức. Sự kết hợp hai loại phối tử đã làm tăng hoạt tính kháng u. Phối tử L6 (L6: 4-metylthiosemicacbazon salicylaldehyde) có IC50 1,9 µg/ml; [Pt(L7)Cl2] (L7: 4-metyl thiocacbazon isatin) có IC50 3,8 µg/ml; Phức platin [Pt(L1)Cl] (L1: 4-metylthiosemicacbazondiaxetylmonoxim) IC50 1,8 µg/ml; [Pt(L2)Cl2] (L2: 4-metylthiocacba zon furaldehyde) có IC50 3,1µg/ml đối với tế bào ung thư ở người. Tác giả [8] đã tổng hợp 6 phối tử dẫn xuất thiosemicacbazon và 14 phức Cu, Ni, Co của chúng. Kết quả thử hoạt tính gây độc tế bào ung thư trong đó có phức chất [Cu(thiomen)2] (thiomen: thiosemicacbazn menton) có IC50 4,3; 3,8 µg/ml lần lượt trên 2 dòng tế bào Hep-G2 và Lu. Tác giả [9] đã tổng hợp được 24 phức chất của 12 thiosemicacbazon với Pd(II) và Ni(II). Trong đó, phức chất Pd(thbz)2 (với thbz: thiosemicacbazon benzandehyde) có hoạt tính mạnh nhất với chỉ số IC50 bằng 0,05 µM đối với tế bào ung thư biểu mô (KB), bằng 0,082 µM đối với tế bào ung thư gan (Hep-G2), bằng 0,383 µM đối với tế bào ung thư phổi (Lu) và bằng 0,169 µM đối với tế bào ung thư vú (MCF-7). Các giá trị này đều thấp hơn so với các giá trị chất chuẩn cis-platin một phức chất của kim loại chuyển tiếp đang được sử dụng làm thuốc chữa bệnh ung thư hiện nay. Tác giả [10] đã tổng hợp 10 phức chất platin với các phối tử thiocacbazon và 25 thử hoạt tính cho kết quả hoạt tính ung thư đối với tế bào ung thư gan, ung thư màng tử cung, ung thư màng tim, tiền ung thư thận khỉ của các phức [Pt(H4phthis)Cl], [Pt(H4phthsa)Cl], [Pt(thfu)2] (trong đó H4phthis: 4-phenylthio semicacbazon isatin; H4phthsa: 4-phenylthiosemicacbazon salicylaldehyde; thfu: thiosemicacbazon furandehyde). Tác giả [11] đã tổng hợp 33 phức chất platin và nghiên cứu cấu trúc, kết quả thử độc tính tế bào ung thư đại tràng SW620 của phức [PtCl(Saf)(8-Oqui)] và [Pt(Saf-1H)(8-Oqui)] (trong đó Saf: Safrole C10H10O2; Qui: Quinolin) cho kết quả hoạt tính rất mạnh với giá trị < 1 µg/ml. Một số nhận xét về nghiên cứu phức chất ở Việt Nam Hầu hết các tác giả tổng hợp phức chất dạng hai càng: Tác giả [6] tổng hợp phức chất Pt(II) đi từ các phối tử có nguyên tử cho điện tử là N và có hoạt tính trung bình. Tác giả [7], [8], [9] đã tổng hợp phức chất hai càng của ion kim loại M(II) phối trí với 2 nguyên tử cho là N và S của phối tử là dẫn xuất thiosemicacbazon, cho kết quả hoạt tính kháng ung thư có chỉ số IC50 khá tốt, thậm chí phức chất thấp hơn chất chuẩn là cis-platin. Từ thực tế nghiên cứu phức chất ở Việt Nam, chúng tôi định hướng nghiên cứu mới là tổng hợp phối tử 4 càng và hai càng đi từ dẫn xuất salicylaldehyde với các amine bậc 1 nhằm tìm ra các hợp chất có tìm năng kháng tế bào ung thư cao hơn và nghiên cứu có hệ thống tìm ra mối liên hệ giữa cấu trúc và hoạt tính.. 26 CHƯƠNG 2. THỰC NGHIỆM 2.1. Các phương pháp nghiên cứu 2.1.1. Phương pháp tổng hợp và tinh chế sản phẩm Các phản ứng được thực hiện bằng các phương pháp tổng hợp hữu cơ cơ bản như phản ứng Reimer–Tiemann, phản ứng ngưng tụ. Phương pháp sắc ký lớp mỏng được sử dụng để giám sát tiến trình xảy ra của các phản ứng hóa học. Các hợp chất sau phản ứng được phân lập và tinh chế bằng các phương pháp chiết, phương pháp sắc ký cột, phương pháp kết tinh... Sắc ký lớp mỏng: Sắc ký lớp mỏng dùng để khảo sát thành phần thực hiện trên bản mỏng tráng sẵn Silica gel 60 F254 của hãng Merck có độ dày 0,25 mm. Dung môi triển khai là một hoặc hỗn hợp một số dung môi thông dụng như n- hexane, CH2Cl2, EtOAc, MeOH, EtOH. Sắc ký cột: Sắc ký cột được tiến hành với chất hấp phụ là Silica gel pha thường. Silica gel pha thường có cỡ hạt là 0,040-0,063 mm (240-430 mesh). Phát hiện vệt chất bằng đèn tử ngoại bước sóng 254 nm. 2.1.2. Phương pháp xác định cấu trúc Cấu trúc của các hợp chất được xác định bằng sự kết hợp các phương pháp phổ hiện đại như phổ hồng ngoại IR, phổ khối ESI-MS, phổ cộng hưởng từ hạt nhân một chiều 1H-NMR, 13C-NMR và hai chiều HSQC, HMBC, đo αD (phức chất 2 càng). Các dữ liệu phổ để xác định cấu trúc của các phức chất được tiến hành tại Viện Hóa học. Phổ IR của các phức chất được đo dưới dạng viên nén KBr, ghi trên máy Máy IMPACT-410, Nicolet-Carl Zeiss Jena (Đức). phổ cộng hưởng từ hạt nhân ghi trên máy Bruker Avance 500 MHz một chiều (1H-NMR, 13C-NMR và hai chiều HSQC, HMBC). Phổ khối lượng của các phức chất được ghi trên máy 5989B MS Engine (Hewlett Packard). Đo alpha D tại Viện Hóa sinh biển - Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam. 2.1.3. Phương pháp thử hoạt tính sinh học 2.1.3.1. Phương pháp đánh giá hoạt tính gây độc tế bào in-vitro [115], [116], [117]. - Các dòng tế bào: Các dòng tế bào có nguồn gốc từ Bảo tàng giống chuẩn Hoa kỳ (ATCC) gồm: ung thư biểu mô biểu bì miệng KB (CCL -17TM), ung thư 27 gan Hep G2 (HB - 8065TM), ung thư phổi LU-1 (HTB - 57TM), ung thư vú MCF-7 (HTB - 22TM). - Nguyên lí: Hoạt tính gây độc tế bào được thực hiện dựa trên phương pháp MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium) được mô tả lần đầu tiên bởi tác giả Tim Mosman, 1983. Đây là phương pháp đánh giá khả năng sống sót của tế bào qua khả năng khử MTT (màu vàng) thành một phức chất formazan (màu tím đen) bởi hoạt động của enzym dehydrogenase trong ty thể. Sản phẩm formazan được hòa tan bằng DMSO và đo mật độ quang (OD) ở bước sóng 540 nm. Giá trị OD phản ánh số lượng tế bào sống. Nếu chất thử có hoạt tính gây độc tế bào thì số lượng tế bào sống giảm và giá trị OD giảm. Giá trị hoạt tính là IC50 (nồng độ chất thử ức chế 50% sự phát triển của tế bào). - Chuẩn bị thí nghiệm: Dòng tế bào được lưu giữ trong nitơ lỏng, hoạt hóa và duy trì trong các môi trường dinh dưỡng như DMEM (Dulbeccos Modified Eagle Medium) hoặc MEME (Minimum Esental Medium with Eagle salt) có bổ sung 7- 10% FBS (Fetal Bovine Serum) và một số thành phần thiết yếu khác. Tế bào được nuôi trong các điều kiện tiêu chuẩn (5% CO2, độ ẩm 98%, nhiệt độ 370C, vô trùng tuyệt đối) và được cấy chuyển 1-2 lần trước khi thí nghiệm. Tế bào phát triển ở pha log sẽ được sử dụng để thử độc tính. Mẫu thử được hòa tan bằng dung môi DMSO với nồng độ ban đầu là 20 mg/ml. Tiến hành pha loãng 2 bước trên đĩa 96 giếng thành 5 dãy nồng độ từ cao xuống thấp lần lượt là 2564, 640, 160, 40 và 10 µg/ml. Nồng độ chất thử trong đĩa thử nghiệm tương ứng là 128, 32, 8, 2 và 0.5 µg/ml. Chất tham chiếu Ellipticine pha trong DMSO với nồng độ 0.01mM. - Tiến hành thí nghiệm: Trypsin hóa tế bào thí nghiệm để làm rời tế bào và đếm trong buồng đếm tế bào. Tiếp đó, pha tế bào bằng môi trường sạch và điều chỉnh mật độ cho phù hợp với thí nghiệm (khoảng 3-5x104 tế bào/ml tùy theo từng dòng tế bào). Lấy vào mỗi giếng 10 µl chất thử đã chuẩn bị ở trên và 190 µl dung dịch tế bào. Đối chứng dương của thí nghiệm là môi trường có chứa tế bào, đối chứng âm chỉ có môi trường nuôi cấy. Đĩa thí nghiệm được ủ ở điều kiện tiêu chuẩn trong 72 giờ. Mỗi giếng thí nghiệm được tiếp tục ủ với 10 µl MTT (5 mg/ml) trong 4h. Sau khi loại bỏ môi trường, tinh thể formaran được hòa tan bằng 100 µl DMSO 100%. 28 Kết quả thí nghiệm được xác định bằng giá trị OD đo ở bước sóng 540 nm trên máy quang phổ Genios Tecan. Thí nghiệm được lặp lại 3 lần. - Xử lý kết quả thực nghiệm: Giá trị IC50 được xác định thông qua giá trị % ức chế tế bào phát triển và phần mềm máy tính Rawdata. % ức chế tế bào = (ODchứng (+) – ODmẫu thử)/( ODchứng (+)– ODchứng (-)) x 100% Trong đó, HighConc/LowConc: Chất thử ở nồng độ cao/chất thử thấp ở nồng độ thấp; HighInh%/LowInh%: % ức chế ở nồng độ cao/ức chế ở nồng độ thấp. Giá trị IC50 ≤ 20 µg/ml (với dịch chiết thô) và IC50 ≤ 20 µM (với chất sạch) được đánh giá là có hoạt tính gây độc tế bào đáng quan tâm, có khả năng ức chế hoặc diệt tế bào ung thư. Kết quả thí nghiệm là giá trị trung bình của 3 lần lặp lại thí nghiệm ± độ lệch chuẩn (SD). Hoạt tính gây độc tế bào được thử nghiệm tại Phòng thử hoạt tính sinh học- Viện Hóa học, Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam. 2.1.3.2. Phương pháp thử hoạt tính kháng sinh - Các chủng vi sinh vật và nấm kiểm định: Các chủng vi sinh vật và nấm đại diện gây bệnh ở người: Vi khuẩn: Gram (-) Pseudomonas aeruginosa (Pa) ATCC 15442, E. Coli (Ec) ATCC 25922 ; Gram (+) Staphylococcus aureus (Sa) ATCC 13709, Bacillus subtilis (Bs) ATCC 6633, Lactobasillus fermentum N4, Enterococus faecium B650. Nấm: Candida albicans (Ca) ATCC 10231. - Môi trường nuôi cấy: MHB (Mueller-Hinton Broth), MHA (Mueller- Hinton Agar), TSB (Tryptic Soy Broth), TSA (Tryptic Soy Agar) cho vi sinh vật; SAB, SA cho nấm [118], [119]. - Phương pháp pha loãng đa nồng độ Pha loãng mẫu thử: Mẫu ban đầu được pha trong DMSO với nồng độ thích hợp theo yêu cầu và mục đích thử. Các mẫu được pha thành dãy các nồng độ khác nhau có thể dãy 5 nồng độ hoặc 10 nồng độ. Mẫu ban đầu có nồng độ 40mg/ml được pha loãng thành các nồng độ khác nhau để thử hoạt tính với các chủng từ nồng độ 256g/ml; 64g/ml, 16g/ml; 4g/ml; 1g/ml. Thử hoạt tính: Chuẩn bị dung dịch vi sinh vật hoặc nấm với nồng độ 5.105 g/ml khi tiến hành thử. Lấy 10 l dung dịch mẫu thử theo các nồng độ đã được 29 pha loãng, thêm 200 l dung dịch vi sinh vật và nấm, ủ 370C. Sau 24 giờ, bổ sung 50 l MTT (1mg/ml) vào các giếng thử và đọc giá trị MIC bằng mắt thường. Giá trị MIC được xác định tại giếng có nồng độ chất thử thấp nhất không chuyển hoá MTT thành MTT formazan cho màu tím đậm. Giá trị IC50 được tính toán dựa trên số liệu đo độ đục tế bào bằng máy Tecan (Genios) và phần mềm raw data. Chất tham khảo: Kháng sinh Ampicilin cho các chủng vi khuẩn gram (+) và chủng vi khuẩn Ec gram (-) với giá trị IC50 trong khoảng 0,05-2 g/ml. Hỗn hợp kháng sinh Pen/Step cho chủng vi khuẩn Pa gram (-) với giá trị IC50 trong khoảng 4- 5 g/ml. Amphotericin B cho nấm với giá trị IC50 trong khoảng 0,5-1 g/ml. 2.2. Kỹ thuật thực nghiệm Hóa chất, dung môi: Hóa chất tinh khiết và dung môi CH3Cl, DMSO tinh khiết 99% do hãng Merck (Đức) và Aldrich (Mỹ) điều chế như trên Bảng 2.1. Dung môi công nghiệp CH3OH, C2H5OH, CH2Cl2, n-hexan, ethylacetate chưng cất trước khi sử dụng. Bảng 2.1. Hóa chất và dung môi TT Tên chất Công thức cấu tạo TT Tên chất Công thức cấu tạo 1 salicylaldehyde 11 1,2-phenylendiamine 2 4-methoxyphenol 12 cis-1,2- cyclohexanediamine 3 2-(tert-butyl)phenol 13 (±)trans-1,2- cyclohexanediamine 4 4-(tert- butyl)phenol 14 (R)-(+)-1- phenylethylamine 5 2,4-di-tert- butylphenol 15 (S)-(+)-1-phenylethylamine 6 4-chlorophenol 16 Potassium tetrachloro platinate(II) 46-47%Pt K2PtCl4 7 4-bromophenol 17 Potassium tetrachloro Palladium(II) 32% Pd K2PdCl4 8 4-iodophenol 18 Chloroform 99% CHCl3 9 4-flouro-phenol 19 Trietylamine 99% N(CH2CH3)3 30 10 1,2-ethylenediamine 20 Sodium hydroxide NaOH 2.3. Tổng hợp salicylaldehyde có các nhóm thế tại R3, R5 (phản ứng Reimer– Tiemann) R3 R5 Chất R3 R5 Chất H OCH3 5ms 108b H Cl 5Cls 108f t-Bu H 3tbs 108c H Br 5Brs 108g H t-Bu 5tbs 108d H I 5Is 108h t-Bu t-Bu 3,5tbs 108e H F 5Fs 108i Sơ đồ 2.1: Sơ đồ tổng hợp các salicylaldehyde có các nhóm thế R3, R5 khác nhau Cho vào bình cầu 500 ml lần lượt các chất sau: Dung dịch của phenol có nhóm thế R2, R4 khác nhau sau khi đã hòa tan dung môi C2H5OH; dung dịch NaOH sau khi đã hòa tan trong nước cất và CHCl3. Lượng các chất được lấy như sau: 10 g phenol có nhóm thế R2, R4 khác nhau 97 % (ứng với: 78,1 mmol 4-methoxyphenol 107b; 64,5 mmol 2-tert-butylphenol 107c; 64,5 mmol 4-tert-butylphenol 107d; 47,0 mmol 2,4-di-tert-butylphenol 107e; 75,4 mmol 4-chloro phenol 107f; 56,1 mmol 4-bromophenol 107g; 44,1mmol 4- iodo-phenol 107h; 86,5 mmol 4-flouro-phenol 107i) hòa tan trong C2H5OH ; Vml CHCl3 tinh khiết 99 % lần lượt 107b, c, d, e, f, g, h, i: 128 ml; 106 ml; 106 ml; 77 ml; 123 ml; 92 ml; 72 ml; 141 ml; m gam NaOH 99 % (m = 46 g; 39 g; 39g; 28 g; 45 g; 34 g; 26 g; 52 g tương ứng chất 107b, c, d, e, f, g, h, i) hòa tan hoàn toàn trong nước cất. Như vậy tỉ lệ mol của phenol có nhóm thế R2, R4 khác nhau (107b-i): NaOH: CHCl3 = (1:15:20). Lượng dung môi được lấy theo tỷ lệ thể tích C2H5OH: H2O = (85:15). Siêu âm bình cầu chứa hỗn hợp phản ứng ở nhiệt độ phòng trong thời gian 5h. Theo dõi phản ứng bằng sắc ký bản mỏng (TLC). Sau khi kết thúc phản ứng, trung hòa dung dịch phản ứng bằng dung dịch HCl 35 % đến pH = 7. Chiết dung dịch trong CH2Cl2 và nước. Thu phần dịch tan trong dung môi CH2Cl2, cô quay 31 chân không để thu hồi dung môi và thu hỗn hợp sản phẩm, chạy cột bằng hệ dung môi n-hexan:EtOAc (9:1). Cô quay chân không để thu sản phẩm tinh khiết. Hiệu suất phản ứng đạt 15÷24 %. Hiệu suất tổng hợp và màu sắc của các sản phẩm được đưa ra ở Bảng 2.2. Bảng 2.2. Hiệu suất tổng hợp và màu sắc của dẫn xuất salicylaldehyde TT Hợp chất aldehyde Ký hiệu Màu sắc Hiệu suất (H %) 1 5-methoxy salicylaldehyde 5ms Chất lỏng màu nâu 23 2 3-t-butyl salicylaldehyde 3tbs Chất lỏng màu nâu 21 3 5-t-butylsalicylaldehyde 5tbs Chất lỏng màu nâu 23 4 3,5-di-t-butyl-salicylaldehyde 3,5tbs Chất lỏng màu nâu 24 5 5-chloro-salicylaldehyde 5Cls Chất rắn, màu trắng 18 6 5-bromo-salicylaldehyde 5Brs Chất rắn, màu trắng 18 7 5-iodo-salicylaldehyde 5Is Chất rắn, màu trắng 17 8 5-flouro-salicylaldehyde 5Fs Chất rắn, màu trắng 15 Các sản phẩm tan tốt trong n-hexan, EtOAc, CH3OH , CH2Cl2, C2H5OH. 2.3.1. Tổng hợp 5-methoxy-salicylaldehyde 108b 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δH (ppm), J (Hz): 10,64 (1H, s, -OH); 9,85 (H, s, H-7); 7,15 (1H, dd, J = 3,0; 9,0, H-4); 7,00 (1H, d, J = 3,0, H-6); 6,93 (1H, d, J = 9,0, H-3); 3,82 (3H, s, H-8). Hình 2.1. Chất 5ms 108b (H = 23%) Hình 2.2. Chất 3tbsa 108c (H = 21%) 2.3.2. Tổng hợp 3-tert-butyl-salicylaldehyde 108c 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δH (ppm), J (Hz): 11,78 (H, s, -OH); 9,87 (1H, s, H-7); 6,94 (1H, t, J = 7,5, H-5); 7,51 (1H, dd, J = 1,5; 7,5, H-6); 6,94 (1H, dd, J = 1,5; 7,5, H-4); 1,42 (9H, s, H-9, H-10, H-11). 2.3.3. Tổng hợp 5-tert-butyl-salicylaldehyde 108d 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δH (ppm), J (Hz): 10,85 (1H, s, -OH); 9,89 (1H, s, H-7); 7,58 (1H, dd, J = 2,5; 8,5, H-4); 7,51 (1H, d, J = 2,5, H-6); 6,93 (1H, d, J = 8,5, H-3); 1,32 (9H, s, H-9, H-10, H-11). 32 2.3.4. Tổng hợp 3,5-di-tert-butyl-salicylaldehyde 108e Hình 2.3. Chất 5tbs 108d (H = 23%) Hình 2.4. Chất 3,5tbsa 108e (H = 24%) 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δH (ppm), J (Hz): 11,63 (1H, s, -OH); 9,86 (1H, s, H-7); 7,59 (1H, d, J = 2,5, H-4); 7,34 (1H, d, J = 2,5, H-6); 1,42 (9H, s, H-9, H-10, H-11); 1,32 (9H, s, H-13, H-14, H-15). 2.3.5. Tổng hợp 5-chloro-salicylaldehyde 108f 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δH (ppm), J (Hz): 10,91 (1H, s, -OH); 9,85 (1H, s, H-7); 7,54 (1H, d, J = 2,5, H-6); 7,48 (1H, dd, J = 2,5; 9,0, H-4); 6,96 (1H, d, J = 8,5, H-3). Hình 2.5. Chất 5Clsa 108f (H = 18%) Hình 2.6. Chất 5Brsa 108g (H = 18%) 2.3.6. Tổng hợp 5-bromo-salicylaldehyde 108g 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δH (ppm), J (Hz): 10,93 (1H, s, -OH); 9,83 (1H, s, H-7); 7,84 (1H, d, J = 2,5, H-6); 7,75 (1H, dd, J = 2,0; 8,5, H-4); 6,79 (1H, d, J = 8,5, H-3). 2.3.7. Tổng hợp 5-iodo-salicylaldehyde 108h Hình 2.7. Chất 5Isa 108h (H = 17%) Hình 2.8. Chất 5Fsa 108i (H = 15%) 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δH (ppm), J (Hz): 10,92 (1H, s, -OH); 9,84 (1H, s, H-7); 7,68 (1H, d, J = 2,5, H-6); 7,59 (1H, dd, J = 2,5; 9,0, H-4); 6,90 (1H, 33 d, J = 8,5, H-3). 2.3.8. Tổng hợp 5-fluoro-salicylaldehyde 108i 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz), δH (ppm), J (Hz): 10,77 (1H, s, -OH); 9,85 (1H, s, H-7); 7,28-7,23 (2H, m, H-6; H-3); 6,96 (1H, q, J = 4,5, H-4). 2.4. Tổng hợp phối tử bazơ Schiff 4 càng và phối tử 2 càng 2.4.1. Tổng hợp dãy phối tử 4 càng H2L1, H2L2, H2L3 Các phối tử bazơ Schiff bốn càng được tổng hợp theo sơ đồ 2.2.  Tổng hợp phối tử bazơ Schiff từ salicylaldehyde với 1,2-phenylendiamine  Tổng hợp phối tử bazơ Schiff từ salicylaldehyde với cis-1,2-cyclohexanediamine 109b và trans-1,2-cyclohexanediamine 109c  Tổng hợp dãy phối tử bazơ Schiff H2L2, H2L3 đi từ dẫn xuất salicylaldehyde có các nhóm thế R3, R5 với 1,2-ethylenediamine R3 R5 Phối tử R3 R5 Phối tử H H H2sed 112a H Cl H25Clsed 112f H OCH3 H25msed 112b H Br H25Brsed 112g t-Bu H H23tbsed 112c H I H25Ised 112h H t-Bu H25tbsed 112d H F H25Fsed 112i t-Bu t-Bu H23,5tbsed 112e Sơ đồ 2.2. Tổng hợp dãy phối tử bazơ Schiff H2L2, H2L2, H2L3 34 a. Quy trình tổng hợp các phối tử bazơ Schiff do chúng tôi nghiên cứu như sau:  Dãy H2L1: H2spd 110, cis-H2scd 111a, trans-H2scd 111b Cho vào bình cầu (dung tích 100 ml) 1mmol (111,5 mg 1,2-phenylene- diamine 109a; hoặc 117,7 mg cis-1,2-cyclohexanediamine 109b; hoặc 117,7 mg trans-1,2-cyclohexanediamine 109c), hòa tan bằng 25 ml dung môi C2H5OH. Thêm từ từ vào bình cầu 252,8 mg (2 mmol) salicylaldehyde 97% (108a) và khuấy ở nhiệt độ phòng. Theo dõi phản ứng bằng sắc ký bản mỏng (TLC). Thời gian thực hiện phản ứng khoảng 3h. Cho vào hỗn hợp phản ứng 0,142g Na2SO4 khan 99% để hấp thụ vừa đủ lượng nước sinh ra trong phản ứng. Lọc phần dịch sau khi làm khan, cô quay chân không để thu hồi dung môi và thu sản phẩm. Rửa sản phẩm bằng n-hexan lạnh và C2H5OH. b. Tổng hợp các phối tử bazơ Schiff:  H2L2: H2sed 112a, H2msed 112b, H23tbsed 112c, H25tbsed 112d, H23,5tbsed 112e;  H2L3: H25Clsed 112f, H25Brsed 112g, H25Ised 112h, H25Fsed 112i Các phối tử H2L2 được tổng hợp theo qui trình giống như qui trình tổng hợp phối tử H2L1 ở mục (a) thay các chất phản ứng là 1,2-ethylenediamine 109d và các dẫn xuất salicylaldehyde 97%. Lượng các chất đầu được lấy như sau: 61,9 mg (1 mmol) 1,2-ethylene diamine 109c và 2 mmol dẫn xuất salicylaldehyde 97% (251,8 mg salicylal dehyde 108a, 313,3 mg 5-methoxy-salicylaldehyde 108b, 366,8 mg 3-t-butyl-salicyl aldehyde 108c, 366,8 mg 5-t-butyl-salicylaldehyde 108d, 482,3 mg 3,5-di-t-butyl- salicylaldehyde 108e, 321,6 mg 5-chloro-salicylaldehyde 108f; 405,2 mg 5-bromo- salicylaldehyde 108g, 511,2 mg 5-iodo-salicylaldehyde 108h, 288,7 mg 5-fluoro- salicylaldehyde 108i). Hiệu suất tổng hợp và màu sắc của các sản phẩm được đưa ra ở Bảng 2.3. Các sản phẩm tan tốt trong n-hexan, EtOAc, CH3OH, CH2Cl2, C2H5OH. Bảng 2.3. Hiệu suất và màu sắc của các phối tử bazơ Schiff dạng 4 càng TT Phối tử bazơ Schiff Ký hiệu Màu sắc H(%) 1 N,N'-bis(salicylidene)-1,2- phenylendiamine H2spd 110 Vàng cam 85% 2 cis-N,N'-bis(salicylidene)-1,2- cyclohexanediamine cis-H2scd 111a Màu vàng 93% 3 trans-N,N'-bis(salicylidene)-1,2- trans-H2scd Màu vàng 94% 35 cyclohexanediamine 111b 4 N,N'-bis(salicylidene)-1,2- ethylenediamine H2sed 112a Màu vàng 96% 5 N,N'-bis(5-methoxy-salicylidene)- 1,2-ethylenediamine H25msed 112b Màu vàng 95% 6 N,N'-bis(3-tert-butyl- salicylidene)-1,2-ethylenediamine H23tbsed 112c Màu vàng 89% 7 N,N'-bis(5-tert-butyl- salicylidene)-1,2-ethylenediamine H25tbsed 112d Màu vàng 92% 8 N,N'-bis(3,5-di-tert-butyl- salicylidene)-1,2-ethylenediamine H23,5tbsed 112e Màu vàng 86% 9 N,N'-bis(5-chloro-salicylidene)- 1,2-ethylenediamine H25Clsed 112f Màu vàng 96% 10 N,N'-bis(5-bromo-salicylidene)- 1,2-ethylenediamine H25Brsed ... with oxygen, nitrogen and oxygen (ONO) donor Schiff base ligand derived from thiazole and 2-hydroxy- 1-naphthaldehyde, Journal of Molecular Structure, 2015, 1085, 198–206. [40] Nour T. Abdel Ghani, Palladium(II) and platinum(II) complexes containing benzimidazole ligand: Molecular structures, vibrational frequencies and cytotoxicity, Journal of Molecular Structure, 2011, 991, 108–126. [41] Dimitra Kovala-Demertzi, Mavroudis A. Demertzis, J.R. Miller , Cryshanthi, Papadopoulou, Catherine Dodorou, Giorge Filousis, Platinum(II) complexes with 2-acetyl pyridine thiosemicarbazone Synthesis, crystal structure, spectral properties, antimicrobial and antitumour activity, Journal of Inorganic Biochemistry, 2001, 86, 555–563. 146 [42] Wael Hussein Hegazy, Spectroscopic, thermal characterization and cytotoxic activity of bi-, tri- and tetra-nuclear Pd(II) and Pt(II) complexes with di Schiff base ligand, Journal of Molecular Structure, 2014, 1075, 103–112. [43] William M. Motswainyana, Martin O. Onani, Abram M. Madiehe, Morounke Saibu, Ntevheleni Thovhogi, Roger A. Lalancette, Imino-phosphine palladium(II) and platinum(II) complexes: Synthesis, molecular structures and evaluation as antitumor agents, Journal of Inorganic Biochemistry, 2013, 129, 112–118. [44] Gehad G. Mohamed, M.M. Omar, Amr A. Ibrahim, Biological activity of palladium(II) and platinum(II) complexes of the acetone Schiff bases of S- methyl- and S-benzyldithiocarbazate and the X-ray crystal structure of the [Pd(asme)2] (asme=anionic form of the acetone Schiff base of S- methyldithiocarbazate) complex, Journal of Inorganic Biochemistry, 2002, 92, 141–148. [45] S.A. Sadeek, M.S. El-Attar, S.M. Abd El-Hamid. Preparation and characterization of new tetradentate Schiff base metal complexes and biological activity evaluation. Journal of Molecular Structure, 2013, 1051, 30–40. [46] V. Selvarani, B. Annaraj, M.A. Neelakantan, S. Sundaramoorthy, D. Velmurugan, Synthesis, characterization and crystal structures of copper(II) and nickel(II) complexes of propargyl arm containing N2O2 ligands: Antimicrobial activity and DNA binding, Polyhedron, 2013, 54, 74–83. [47] Tudor Rosu, Elena Pahontu, Catalin Maxim, Rodica Georgescu, Nicolae Stanica, Aurelian Gulea, Some new Cu(II) complexes containing an ON donor Schiff base: Synthesis,characterization and antibacterial activity, Polyhedron, 2011, 30, 154–162. [48] Cemal Şenol, Zeliha Hayvali, Hakan Dal, Tuncer Hökelek, Syntheses, characterizations and structures of NO donor Schiff base ligands and nickel(II) and copper(II) complexes, Journal of Molecular Structure, 2011, 997, 53–59. [49] Xiongwei Dong, Yuguang Li, Zuowen Li, Yongming Cui, Hailiang Zhu, Synthesis, structures and urease inhibition studies of copper(II) and nickel(II) complexes with bidentate N,O-donor Schiff base ligands, Journal of Inorganic Biochemistry, 2012, 108, 22–29. [50] Tingting Li, Yong Chen, Wen-Fu Fua, Photocatalytic H2 production from water based on platinum(II) Schiff base sensitizers and a molecular cobalt catalyst, Catalysis Communications, 2014, 45, 91–94. [51] Mahmut Ulusoy, Özgül Birel, Onur Sahin, Orhan Büyükgüngör, Bekir Cetinkaya, Structural, spectral, electrochemical and catalytic reactivity studies of a series of N2O2 chelated palladium(II) complexes, Polyhedron, 147 2012, 38, 141–148. [52] Daver M. Boghaei and Sajjad Mohebi, Non-symmetrical tetradentate vanadyl Schiff base complexes derived from 1,2-phenylenediamine and 1,3- naphthalene diamine as catalysts for the oxidation of cyclohexene, Tetrahedron, 2002, 58, 5357–5366. [53] S. Sujarani, A. Ramu, Docking of ethanamine Schiff base imines & metal (II) complexes,cytotoxicity & DNA interaction studies, Journal of Molecular Structure, 2015, 1079, 353–362 [54] M.R. Bermejo, A.M. Gonzalez, M. Fondo, M. Maneiro, M. Rey, M. Vazquez, O.L. Hoyos, J.C. Garcıa-Monteagudo, Electrochemical synthesis of neutral Mn(III) complexes with asymmetrical N2O2 Schiff base ligands, Inorganica Chimica Acta, 2000, 307, 106–114. [55] Alparslan Atahan, Sefa Durmus, 1-Amino-2-hydroxy-4-naphthalenesulfonic acid based Schiff bases or naphtho[1,2-d]oxazoles: Selective synthesis and photophysical Properties, Spectrochimica Acta Part A: Molecular and Biomolecular Spectroscopy, 2015, 144, 61–67. [56] D.M. Kweeke et al., Pharmacology of oxaliplatin and the use pharmacoge nomics to individualize therapy. Cancer Treatment Reviews, 2005, 31, 90– 105. [57] B. Rosenberg, L. Van Camp, J. E. Trosko and V.H. Mansour, Platinum Compounds: a New Class of Potent Antitumour Agents, Nature, 1969, 222, 385–386. [58] Bernard Desoize, Claudie Madoulet, Particular aspects of platinum compounds used at present in cancer treatmen, critical reviews in oncology/hematology, 2002, 42, 317–325. [59] Shaloam Dasari, Paul Bernard Tchounwou, Review cis-platin in cancer therapy: Molecular mechanisms of action. European Journal of Pharmacology, 2014, 740, 364–378 [60] Mehmet Sönmez, Metin Çelebi, Yavuz Yardım, Zühre Şentürk, Palladium(II) and platinum(II) complexes of a symmetric Schiff base derived from 2,6,diformyl-4-methylphenol with N-aminopyrimidine: Synthesis, characteri- zation and detection of DNA interaction by voltammetry, European Journal of MedicinalChemistry, 2010, 45, 4215–4220. [61] V. Selvarani, B. Annaraj, M.A. Neelakantan, S. Sundaramoorthy, D. Velmurugan, Synthesis and crystal structure of hydroxyacetophenone Schiff bases containing propargyl moiety: Solvent effects on UV-visible spectra, Spectrochimica Acta Part A, 2012, 91, 329–337. [62] S. S. Sreejith, S.S. Sreejith, Nithya Mohan, N. Aiswarya, M.R. Prathapachandra Kurup, Inclusion, pseudo-inclusion compounds and coordination polymer of Pd(II), Zn(II) and Cd(II) from salen-type Schiff base 148 ligand with a 1,3-diimino spacer group: Crystal structures, spectroscopic and thermal studies, Polyhedron, 2016, 115, 180–192. [63] Beata Cristóvão, Barbara Miroslaw, Julia Kłak, New mononuclear CuII and tetranuclear CuII2–LaIII2 Schiff base complexes – Physicochemical properties, Polyhedron, 2013, 62, 218–226. [64] Seema Yadav, Musheer Ahmad, K.S. Siddiqi. Metal-ion directed synthesis of N2O2 type chelate complexes of Ni(II), Cu(II) and Zn(II): Spectral, thermal and single crystal studies, Spectrochimica Acta Part A, 2012, 98, 240–246. [65] Monami Maiti, Dipali Sadhukhan, Santarupa Thakurta, Ennio Zangrando, Antonio Bauzá, Antonio Frontera, Bülent Dede, Samiran Mitra, Guillaume Pilet, Synthesis, structural characterization, theoretical calculations and catecholase mimetic activity of manganese-Schiff base complexes, Polyhedron, 2014, 75, 40–49. [66] Hiroto Achira, Yuki Hoga, Isao Yoshikawa, Toshiki Mutai, Kazunari Matsumura, Hirohiko Houjou, Effects of a semiflexible linker on the mechanochromic photoluminescence of bis(Pt-salen) complex, Polyhedron, 2016, 113, 123–131. [67] Ali Ourari, Djouhra Aggoun, Lahcène Ouahab, A novel copper(II)-Schiff base complex containing pyrrole ring: Synthesis, characterization and its modified electrodes applied in oxidation of aliphatic alcohols, Inorganic Chemistry Communications, 2013, 33, 118–124. [68] Leon Dyers Jr., Steven Y. Que, Donald Van Derveer, Xiu R. Bu, Synthesis and structures of new salen complexes with bulky groups, Inorganica Chimica Acta, 2006, 359, 197–203. [69] Abdel-Nasser M.A. Alaghaz, Yousry A. Ammar, Hoda A. Bayoumi, Sharah A. Aldhlmani, Synthesis, spectral characterization, thermal analysis, molecular modeling and antimicrobial activity of new potentially N2O2 azo- dye Schiff base complexes, Journal of Molecular Structure, 2014, 1074, 359– 375. [70] D. Tomczyk, L. Nowak, W. Bukowski, K. Bester, P. Urbaniak, G. Andrijewski, B. Olejniczak, Reductive and oxidative electrochemical study and spectroscopic properties of nickel(II) complexes with N2O2 Schiff bases derived from (±)-trans-N,N-2-bis(salicylidene)-1,2-cyclohexanediamine, Electrochimica Acta, 2014, 121, 64– 77. [71] W. Schilf, B. Kamienski, Z. Rozwadowski, K. Ambroziak, B. Bieg, T. Dziembowska, Solid state 15N and 13C NMR study of dioxomolybdenum (VI) complexes of Schiff bases derived from trans-1,2-cyclohexanediamine, Journal of Molecular Structure, 2004, 700, 61–65. [72] Maria Proetto, Wukun Liu, Adelheid Hagenbach, Ulrich Abram, Ronald Gust, Synthesis, characterization and in vitro antitumour activity of a series 149 of novel platinum(II) complexes bearing Schiff base ligands, European Journal of Medicinal Chemistry, 2012, 53, 168–175. [73] Akmal S. Gaballa, Mohsen S. Asker, Atiat S. Barakat, Said M. Teleb, Synthesis, characterization and biological activity of some platinum(II) complexes with Schiff bases derived from salicylaldehyde, 2-furaldehyde and phenylenediamine, Spectrochimica Acta Part A, 2007, 67, 114–121. [74] Mohamed I. Ayad, Synthesis, characterization and catechol oxidase biomimetic catalytic activity of cobalt(II) and copper(II) complexes containing N2O2 donor sets of imine ligands, King Saud University Arabian Journal of Chemistry, 2016, 9 (2), S1297–S1306. [75] Ali Hossein Kianfar, Liala Keramat, Morteza Dostani, Mojtaba Shamsipur, Mahmoud Roushani, Farzad Nikpour, Synthesis, spectroscopy, electro- chemistry and thermal study of Ni(II) and Cu(II) unsymmetrical N2O2 Schiff base complexes, Spectrochimica Acta Part A, 2010, 77, 424–429. [76] Khosro Mohammadi, Mahmood Niad, Tahereh Jafari, New 3,4-diaminobenz- oic acid Schiff base compounds and their complexes: Synthesis, characteri- zation and thermodynamics, Spectrochimica Acta Part A, 2014, 122, 179– 185. [77] Ying-Zhong Shen, Yi Pan, Le-Yong Wang, Gang Dong, Xiao-Ping Jin, Xiao- Ying Huang, Hongwen Hu, Synthesis and characterisation of alkyl-N,N’- bis(salicylidene)ethylenediamino- and alkyl-N,N’-bis(salicylidene)-1,2-phenyl enediaminogallium or indium complexes: crystal structure of methyl-N,N’- bis(salicylidene)-1,2-phenylenediaminoindium, Journal of Organo- metallic Chemistry, 1999, 590, 242–247. [78] Yan Chen, YaojuLiu, Xingmei Zhang, Zhao Zhang, Lin Liu, Daidi Fan, LiqinDing, Xingqiang Lü, Stereo-regulated methyl methacrylate (MMA) polymerization catalyzed by asymmetric Salen-type Schiff-base Cu(II) complexes, Inorganic Chemistry Communications, 2015, 53, 1–3. [79] Christopher T. Lyons, T. Daniel P. Stack. Recent advances in phenoxyl radical complexes of salen-type ligands as mixed-valent galactose oxidase models, Coordination Chemistry Reviews, 2013, 257, 528–540. [80] Liqin Ding, Zeng Chu, Leilei Chen, Xingqiang Lü, Biao Yan, Jirong Song, Daidi Fan, Feng Bao, Pd-Salen and Pd-Salan complexes: Characterization and application instyrene polymerization, Inorganic Chemistry Communications, 2011, 14, 573–577. [81] Jie Zhang, Guoliang Dai, Fengshou Wu, Dan Li, Dongchun Gao, Haiwei Jin, Song Chen, Xunjin Zhu, Chenxiu Huang, Deman Han, Efficient and tunable phosphorescence of new platinum(II) complexes based on the donor–π– acceptor Schiff bases, Journal of Photochemistry and Photobiology A: Chemistry, 2016, 316, 12–18. 150 [82] Joana Fonseca, Javier Martinez, Luís Cunha-Silva, Alexandre L. Magalhães, M. Teresa Duarte, Cristina Freire, Insights into electronic and structural properties of novel Pd(II) salen-type complexes, Inorganica Chimica Acta, 2010, 363, 4096–4107. [83] Mozaffar Asadi, Zahra Asadi, Leila Zarei, Somaye Barzegar Sadi, Zahra Amirghofran, Affinity to bovine serum albumin and anticancer activity of some new water-soluble metal Schiff base complexes, Spectrochimica Acta Part A, 2014, 133, 697–706. [84] Elham S. Aazam, Waleed Ahmed El-Said. Synthesis of copper/nickel nanoparticles using newly synthesized Schiff-base metals complexes and their cytotoxicity/catalytic activities, Bioorganic Chemistry, 2014, 57, 5–12. [85] Noor-ul Hasan Khan, Nirali Pandya, K. Jeya Prathap, Rukhsana Ilays Kureshy, Sayed Hasan Razi Abdi, Sandhya Mishra, Hari Chandra Bajaj, Chiral discrimination asserted by enantiomers of Ni(II), Cu(II) and Zn(II) Schiff base complexes in DNA binding, antioxidant and antibacterial activities, Spectrochimica Acta Part A, 2011, 81, 199–208. [86] Soleiman Hisaindee, Rabah Iratni, Leena Al-Kaabi, Na’il Saleh, Suad Ajeb, Synan F. AbuQamar, Yaser Torky, Antipathogenic effects of structurally- related Schiff base derivatives: Structure–activity relationship, Arabian Journal of Chemistry, 2015, 8, 828–836. [87] Cleiton M. da Silva, Daniel L. da Silva, Luzia V. Modolo, Rosemeire B. Alves, Maria A. de Resende, Cleide V.B. Martins, Angelo de Fatima, Schiff bases: A short review of their antimicrobial activities, Journal of Advanced Research, 2011, 2, 1–8. [88] Muhammad Shabbir, Zareen Akhter, Iqbal Ahmad, Safeer Ahmed, Hammad Ismail, Bushra Mirza, Vickie McKee, Copper (II) complexes bearing ether based ON donor bidentate Schiff bases: Synthesis, characterization, biological and electrochemical investigations, Polyhedron, 2017, 124, 117– 124. [89] Zahra Kazemi, Hadi Amiri Rudbari, Mehdi Sahihi, Valiollah Mirkhani, Majid Moghadam, Sharam Tangestaninejad, Iraj Mohammadpoor-Baltork, Gholamhassan Azimi, Sajjad Gharaghani, Abolghasem Abbasi Kajani. Synthesis, characterization and separation of chiral and achiral diastereo- mers of Schiff base Pd(II) complex: A comparative study of their DNA- and HSA-binding, Journal of Photo chemistry & Photobiology, B: Biology 2016, 163, 246–260. [90] Zhen Li, Hui Yan, Guoliang Chang, Min Hong, Jianmin Dou, Meiju Niu, Cu(II), Ni(II) complexes derived from chiral Schiff-base ligands: Synthesis, characterization, cytotoxicity, protein and DNA–binding properties, Journal of Photochemistry & Photobiology, B: Biology, 2016, 163, 403–412. 151 [91] Eliene Leandro de Araújo, Hellen Franciane Gonc¸ alves Barbosa, Edward Ralph Dockal, Éder Tadeu Gomes Cavalheiro, Synthesis, characterization and biological activity of Cu(II), Ni(II) and Zn(II) complexes of biopolymeric Schiff bases of salicylaldehydes and chitosan, International Journal of Biological Macromolecules, 2017, 95, 168–176. [92] Alyssa E. Patterson, Jessica J. Miller, Brittany A. Miles, Erin L. Stewart, Josée-Marie E.J. Melanson, Christopher M. Vogels, Amanda M. Cockshutt, Andreas Decken, Pier Morin Jr., Stephen A. Westcott, Synthesis, characterization and anticancer properties of (salicylaldiminato)platinum(II) complexes, Inorgani fca Chimica Acta, 2014, 415, 88–94. [93] Mohamed Ramadan El Sayed Aly, Hamadah Hamadah Abd El Razek Fodah, Sherif Yousef Saleh, Antiobesity, antioxidant and cytotoxicity activities of newly synthesized chalcone derivatives and their metal complexes, European Journal of Medicinal Chemistry, 2014, 76, 517–530. [94] Halime Güzin Aslan, Servet Özcan, Nurcan Karacan, Synthesis, characteri- zation and antimicrobial activity of salicylaldehyde benzenesulfonylhyd- razone (Hsalbsmh) and its Nickel(II), Palladium(II), Platinum(II), Copper(II), Cobalt(II) complexes, Inorganic Chemistry Communications, 2011, 14, 1550–1553. [95] Meiju Niu, Min Hong, Guoliang Chang, Xiao Li, Zhen Li, A comparative study of cytotoxicity and interaction with DNA/protein offive transition metal complexes with Schiff base ligands, Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2015, 148, 232–241. [96] C.E. Satheesh, P. Raghavendra Kumar, P. Sharma, K. Lingaraju, B.S. Palakshamurthy, H. Raja Naika, Synthesis, characterisation and antimi- crobial activity of new palladium and nickel complexes containing Schiff bases, Inorganica Chimica Acta, 2016, 442, 1–9. [97] Reyhan Kag it, Osman Dayan, Namik Özdemir, Palladium(II) and Ruthenium(II complexes bearing arylsulfonate based ligands: synthesis, structural characterization and catalytic properties, Polyhedron, 2016, 117, 504–512. [98] Hadi Amiri Rudbari, Mohammad Reza Iravani, Vahid Moazam, Banafshe Askari, Mahsa Khorshidifard, Neda Habibi, Giuseppe Bruno, Synthesis, characterization, X-ray crystal structures and antibacterial activities of Schiff base ligands derived from allylamine and their vanadium(IV), cobalt(III), nickel(II), copper(II), zinc(II) and palladium(II) complexes, Journal of Molecular Structure, 2016, 1125, 113–120. [99] Mahsa Khorshidifard, Hadi Amiri Rudbari, Zahra Kazemi-Delikani, Valiollah Mirkhani, Reza Azadbakht. Synthesis, characterization and X-ray crystal structures of Vanadium(IV), Cobalt(III), Copper(II) and Zinc(II) complexes 152 derived from an asymmetric bidentate Schiff-base ligand at ambient temperature, Journal of Molecular Structure, 2015, 1081, 494–505. [100] S.M. Pradeepa, H.S. Bhojya Naik , B. Vinay Kumar, K. Indira Priyadarsini, Atanu Barik, M.C. Prabhakara, DNA binding, photoactivated DNA cleavage and cytotoxic activity of Cu(II) and Co(II) based Schiff-base azo photosensitizers, Spectrochimica Acta Part A, 2015, 141, 34–42. [101] Mukul Kalita, Kashyap Jyoti Tamuli, Pranjit Barman, Bipul Sarma, Reshita Baruah, Hari Prasanna Deka Boruah, Synthesis, crystal structure, bioactivities of Ni(II), Cu(II), Co(II) and Pd(II) complexes with unsymmetrical thioether donor Schiff base: Phosphinefree Pd(II) complex catalyzed Suzuki reaction, Polyhedron, 2015, 97, 140–147. [102] Emad Yousif, Jumat Salimon, Ahmed Majeed, Bashar Abdullah, Khulood Al-Sammarrae, Nadia Salih, Metal complexes of Schiff base: Preparation, characterization and antibacterial activity, Arabian Journal of Chemistry, 2017, 10, S1639–S1644. [103] V.T. Kasumov, F. Suzergoz, E. Sahin, O. Celik, M. Aslanoglu, Synthesis, characterization and effect of the fluorine substitution on the redox reactivity and in vitro anticancer behaviors of N-polyfluorophenyl-3,5-di-tert butylsalicylaldimines and their Cu(II) complexes, Journal of Fluorine Chemistry, 2014, 162, 78–89. [104] Veli T. Kasumov, Seniz Ozalp-Yaman, Esref Tas¸ Synthesis, spectroscopy and electrochemical behaviors of nickel(II) complexes with tetradentate shiff bases derived from 3,5-But2-salicylaldehyde, Spectrochimica Acta Part A, 2005 62, 716–720. [105] Yongming Cui, Xiongwei Dong, Yuguang Li, Zuowen Li, Wu Chen, Synthesis, structures and urease inhibition studies of Schiff base metal complexes derived from 3,5-dibromosalicylaldehyde, European Journal of Medicinal Chemistry, 2012, 58, 323–331. [106] S. Jone Kirubavathy, R. Velmurugan, R. Karvembu, N.S.P. Bhuvanesh, Israel V.M.V. Enoch, P. Mosae Selvakumar, D. Premnath, S. Chitra, Structural and molecular docking studies of biologically active mercaptopyrimidine Schiff bases, Journal of Molecular Structure, 2017, 1127, 345–354. [107] Lei Shi, Hui-Ming Ge, Shu-Hua Tan, Huan-Qiu Li, Yong-Chun Song, Hai- Liang Zhu, Ren-Xiang Tan, Synthesis and antimicrobial activities of Schiff bases derived from 5-chloro-salicylaldehyde, European Journal of Medicinal Chemistry, 2007, 42, 558–564. [108] Ahmed Nuri Kursunlu, Ersin Guler, Fatih Sevgi, Birol Ozkalp, Synthesis, spectroscopic characterization and antimicrobial studies of Co(II), Ni(II), Cu(II) and Zn(II) complexes with Schiff bases derived from 5-bromo- salicylaldehyde, Journal of Molecular Structure, 2013, 1048, 476–481. 153 [109] Serenella Medici, Massimiliano Peana, Valeria Marina Nurchi, Joanna I. Lachowicz, Guido Crisponi, Maria Antonietta Zoroddu, Noble metals in medicine: Latest advances, Coordination Chemistry Reviews, 2015, 284, 329–350. [110] Runting Yin, Shaohua Gou, Xia Liu, Liguang Lou. Antitumor activities and interaction with DNA of oxaliplatin-type platinum complexes with linear or branched alkoxyacetates as leaving groups, Inorganic Biochemistry, 2011, 105, 1095–1101. [111] C. Monneret, General Review Platinum anticancer drugs. From serendipity to rational design, Annales Pharmaceutiques Françaises, 2011, 69, 286–295. [112] A. M. Di Francesco, A. Ruggiero and R. Riccardi, Drugs of the Future: Review Cellular and molecular aspects of drugs of the future: Oxaliplatin. CMLS Cellular and Molecular Life Sciences, 2002, 59, 1914–1927. [113] Lloyd R. Kelland. New platinum antitumor complexes, Critical Reviews in Oncology/Hematology, 1993, 15, 191–219. [114] Federica Trudu, Filippo Amato, Petr Vanhara, Tiziana Pivetta, E.M. Peña-ra Méndez, Josef Havel, Coordination compounds in cancer: Past, present and perspectives, Journal of applied biomedicine, 2015 , 13, 79–103. [115] Tim Mosmann. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: Application to proliferation and cytotoxicity assay. Journal of immunological methods, 1983, 65, 55–63. [116] Scudiero D.A., Evaluation of a soluable tetrazolium/formazan assay for cell growth and drug sensitivity in culture using human and other tumor cell lines. Cancer Reseach. 1988, 48: 4827–4833. [117] Cos P, Vlietinck AJ, Vanden BD, Maes L. Anti-infective potential of nature products: How to develop a stronger in vitro ‘proof-of-concept’. Journal of Ethnopharmacology, 2006, 106 (3), 290–302. [118] Pual Cos, et al., Bioassay for antibacterial and antifungal activities, Laboratory for Microbiology, Parasitology and Hygien, Faculty of Pharmaceutical, Biomedical and Veterinary Sciences, University of Antwerp, Belgium, 2005, 1–13. [119] Franz Hadacek, Harald Greger. Testing of Antifungal Natural Products: Methodologies, Comparability of Results and Assay Choice, Phytochemical analysis, 2000, 11, 137–147. [120] G. Tweedy, Possible mechanism for reduction of elemental sulfur by monilinia fructicola, Phytopathology, 1964, 55, 910–914. [121] Yu-Xing Tan, Zhi-Jian Zhang, Yang Liu, Jiang-Xi Yu, Xiao-Ming Zhu, Dai- Zhi Kuang, Wu-Jiu Jiang, Synthesis, crystal structure and biological activity of the Schiff base organotin(IV) complexes based on salicylaldehyde-o- aminophenol, Journal of Molecular Structure, 2017, 1149, 874–881 154 [122] MohammadMehdi Haghdoost, Golara Golbaghi, Myriam Letourneau, Shunmoogum A. Patten, Annie Castonguay, Lipophilicity-antiproliferative activity relationship study leads to the preparation of a ruthenium(II) arene complex with considerable in vitro cytotoxicity against cancer cells and a lower in vivo toxicity in zebrafish embryos than clinically approved cis-platin, European Journal of Medicinal Chemistry, 2017, 132, 282–293 [123] Jee-Young Lee, Min-Cheol Jeong, Dasom Jeon, Yeongjun Lee, Woo Cheol Lee, Yangmee Kim, Structure-activity relationship-based screening of antibiotics agains Gram-negative Acinetobacter baumannii, Bioorganic & Medicinal Chemistry, 2017, 25, 372–380 [124] Chandravadivelu Gopi, Vedula Girija Sastry, Magharla Dasaratha Dhanaraju, Synthesis, spectroscopic characterization, X-ray crystallography, structural activity relationship and antimicrobial activity of some novel 4-(5-(10-(3-N, N-dimethylamino)propyl)-10H-phenothiazine3-yl)-1,3,4-thiadiazole-2-yl) Azo dye/Schiff base derivatives, Future Journal of Pharmaceutical Sciences, 2017, 3, 79–89. [125] Chandravadivelu Gopi, Vedula Girija Sastry, Magharla Dasaratha Dhanaraju, Microwave-assisted synthesis, structural activity relationship and biological activity of some new quinoxaline Schiff base derivatives as highly potent spirochete bactericidal agents, Beni-Suef University Journal of Basic and Applied Sciences 2017. 6, 39–47 [126] Sayan Dutta Gupta, B. Revathi, Gisela I. Mazaira, Mario D. Galigniana, C.V.S. Subrahmanyam, N.L. Gowrishankar, N.M. Raghavendra, 2,4- dihydroxy benzaldehyde derived Schiff bases as small molecule Hsp90 inhibitors: Rational identification of a new anticancer lead, Bioorganic Chemistry 2015, 59, 97–105. [127] Krzysztof Sztanke, Agata Maziarka, Anna Osinka, Malgorzata Sztanke, An insight into synthetic Schiff bases revealing antiproliferative activities in vitro, Bioorganic & Medicinal Chemistry, 2013, 21, 3648–3666. [128] Kannan Balan, Periyasamy Ratha, Govindan Prakash, Periyasamy Viswanathamurthi, Thayumanavan Palvannan, Sirichai Adisakwattana, Evaluation of invitro α-amylase and α-glucosidase inhibitory potential of N2O2 schiff base Zn complex, Arabian Journal of Chemistry, 2017, 10, 732- 738 . [129] Gholamhossein Grivani, Sara Husseinzadeh Baghan, Mohammad Vakili, Aliakbar Dehno Khalaji, Vida Tahmasebi, Václav Eigner, Michal Dušek, A new copper(II) Schiff base complex containing asymmetrical tetradentate N2O2 Schiff base ligand: Synthesis, characterization, crystal structure and DFT study, Journal of Molecular Structure, 2015, 1082, 91–96. [130] Ali Hossein Kianfar, Roghayeh Hashemi Fath, Theoretical study of the 155 structures of Schiff base compounds and thermodynamic study of the tautomerism reactions byab initio calculations, Egyptian Journal of Petroleum, 2016. [131] Omima M.I. Adly, Ali Taha, Shery A. Fahmy, Spectroscopic and structural studies of new mononucleating tetradentate Schiff base metal chelates derived from 5-acetyl-4-hydroxy-2H-1,3-thiazine-2,6(3H)-dione and 1,3- diaminopropane, Journal of Molecular Structure, 2015, 1093, 228–238. [132] S. Sobha, R. Mahalakshmi, N. Raman, Studies on DNA binding behaviour of biologically active transition metal complexes of new tetradentate N2O2 donor Schiff bases: Inhibitory activity against bacteria, Spectrochimica Acta Part A, 2012, 92, 175–183. [133] Kamel Ouari, Sabrina Bendia, Jean Weiss, Corinne Bailly, Spectroscopic, crystal structural and electrochemical studies of zinc(II)-Schiff base complex obtained from 2,3-diaminobenzene and 2-hydroxynaphthaldehyde, Spectro- chimica Acta Part A, 2015, 135, 624–631. [134] T. Arun, S. Packianathan, M. Malarvizhi, R. Antony, N. Raman, Bio-relevant complexes of novel N2O2 type heterocyclic ligand: Synthesis, structural elucidation, biological evaluation and docking studies, Journal of Photo- chemistry and Photobiology B: Biology, 2015, 149, 93–102. [135] Soraia Meghdadi, Mehdi Amirnasr, Mona Majedi, Maryam Bagheri, Ahmad Amiri, Soheila Abbasi, Kurt Mereiter, Template synthesis, and X-ray crystal structures of copper(II) and nickel(II) complexes of new unsymmetrical tetradentate Schiff base ligands. Electrochemistry, antibacterial properties, and metal ion effect on hydrolysis recondensation of the ligand, Inorganica Chimica Acta, 2015, 437, 64–69. [136] Neslihan Beyazit, Berna Catıkkas, Sahin Bayraktar, Cahit Demetgül, Synthesis, characterization and catecholase-like activity of new Schiff base metal complexes derived from visnagin: Theoretical and experimental study, Journal of Molecular Structure, 2016, 1119, 124–132. [137] E. Akila, M. Usharani, S. Ramachandran, P. Jayaseelan, G. Velraj, R. Rajavel, Tetradentate-arm Schiff base derived from the condensation reaction of 3,3’-dihydroxybenzidine, glyoxal/diacetyl and 2-aminophenol: Designing, structural elucidation and properties of their binuclear metal(II) complexes, Arabian Journal of Chemistry, 2017, 10, S2950–S2960 [138] Arun Kumar, Monika Agarwal, Ajai K. Singh, R.J. Butcher, Palladium(II), platinum(II), ruthenium(II) and mercury(II) complexes of potentially tridentate Schiff base ligands of (E, N, O) type (E=S, Se, Te): Synthesis, crystal structures and applications in Heck and Suzuki coupling reactions. Inorganica Chimica Acta. 2009, 362, 3208–3218. [139] Takashi Tsuno, Haruka Iwabe, Henri Brunner, Synthesis and structural 156 characterization of isomeric palladium(II) complexes with chiral N,O- bidentate ligands, Inorganica Chimica Acta, 2013, 400, 262–266. [140] Amalina Mohd Tajuddin, Bohari M. Yamin, El Hassane Anouar, Abdulrahman I. Alharthi, Kalavathy Ramasamy, Hadariah Bahron, DFT analysis and bioactivity of 2-((E)-(4methoxybenzylimino)methyl)phenol and its Ni(II) and Pd(II) complexes, Arabian Journal of Chemistry, 2017, 10, 769–780. [141] Chetan T. Prabhakara, Sangamesh A. Patil, Shivakumar S. Toragalmath, Synthesis, characterization and biological approach of metal chelates of some first row transition metal ions with halogenated bidentate coumarin Schiff bases containing N and O donor atoms, Journal of Photochemistry & Photobiology, B: Biology, 2016, 157, 1–14 [142] H. Saleem, S. Subashchandrabose, Y. Erdogdu, V. Thanikachalam, J. Jayabharathi, FT-IR, FT-Raman spectral and conformational studies on (E)- 2-(2-hydroxybenzylidenamino)-3-(1H-indol-3yl) propionic acid, Spectro chimica Acta Part A, 2013, 101, 91–99. [143] Mukesh Choudhary, R.N. Patel, S.P. Rawat, Synthesis, electrochemical, structural, spectroscopic and biological activities of mixed ligand copper (II) complexes with 2-{[(Z)-(5-bromo-2 hydroxyphenyl)methylidene]amino}ben- zoic acid and nitrogenous base, Journal of Molecular Structure, 2014, 1060, 197–207. [144] I. Mohamed Mustafa, M.A. Hapipah, Mahmood Ameen Abdulla, T. Robinson Ward, Synthesis, structural characterization, and anti-ulcerogenic activity of schiff base ligands derived from tryptamine and 5-chloro, 5-nitro, 3,5-ditertiarybutyl salicylaldehyde and their nickel(II), copper(II), and zinc(II) complexes, Polyhedron 28, 2009, 3993–3998. [145] Ganesh More, Darshana Raut, K. Aruna, Sakina Bootwala, Synthesis, spectroscopic characterization and antimicrobial activity evaluation of new tridentate Schiff bases and their Co(II) complexes, Journal of Saudi Chemical Society 2017. [146] Md. Azharul Arafath , Farook Adam , Mohd. R. Razali , Loiy E. Ahmed Hassan , Mohamed B. Khadeer Ahamed , Amin Malik S.A. Majid, Synthesis, characterization and anticancer studies of Ni(II), Pd(II) and Pt(II) complexes with Schiff base derived from N-methylhydrazinecarbothioamide and 2- hydroxy-5-methoxy-3-nitrobenzaldehyde, 2017, 1130, 791–798. 157