Bài thuyết trình Tìm hiểu về chất kháng sinh enrofloxacin trong nguyên liệu tôm

Nguyên liệu tôm được phát triển theo 2 hình thức. Đánh bắt Nuôi trồng Trong đó, tôm sú, tôm thẻ chân trắng là những đối tượng nuôi quan trọng . S ản lượng tôm nuôi liên tục tăng cao trong các năm, bình quân đạt 12,77 %/ năm . Đ óng góp đáng kể vào tăng trưởng tổng sản lượng thủy sản của cả nước .   H oạt động khai thác tăng khá thấp với mức tăng bình quân 6,42%/năm . 2. Tình hình xuất khẩu hiện nay Việt Nam đang gặp khó khăn khi đưa các mặt hàng tôm vào Châu Âu do tồn dư kháng sinh cấm. T ừ năm 2014 đến nay đã có gần 32.000 tấn hàng bị trả về . Việt Nam có đến 582 lô hàng bị 38 nước trả về , trung bình mỗi công ty có năm lô trả về . Các lô hàng bị trả về chủ yếu do nguồn nguyên liệu không sạch . II. Tìm hiểu về chất kháng sinh Định nghĩa: L à những chất được chiết xuất từ các vi sinh vật, nấm, được tổng hợp hoặc bán tổng hợp, có khả năng tiêu diệt  vi khuẩn  hay kìm hãm sự phát triển của vi khuẩn gram âm – gram dương một cách đặc hiệu. Mục đích: N găn chặn và xử lý các mầm gây bệnh cho thủy, hải sản để đáp ứng nhu cầu của con người. Phân loại: gồm 11 nhóm chủ yếu β- Lactam (Peniciline, Amoxycilline, Cloxaciline, Cephalosporins,...) Aminoglucosides (Apramycin, Gentamycin, Kanamycin, Neomycin, Spectinomycin, Streptomycin) Macrolides (Erythromycin, Josamycin, Spiramycin, Tylosin). Tetracyclin (Tetracyclin, Oxytetracyclin, Doxycyclin, Chlotetracyclin) Fluoroquinolones (Flumequine, Enrofloxacin, Norfloxacin, Oxolinic acid, Marbofloxacin, Danofloxacin, Difloxacin...) Phenicol (Florfenicol, Thiamphenicol) Polymyxins (Colistin) Pleuromutilins (Tiamulin) Lincosamides ( Lincomycin) Sulfamid ( Sulfachlorpiridazine, Sulfadiazine, Sulfadimethoxine,....) Diaminopyrimidine ( Trimethoprim)  Tìm hiểu về Enrofloxacin L à một tác nhân hóa học được tổng hợp từ các fluoroquinolone dẫn xuất axit cacboxylic.Nó có tác dụng kháng khuẩn đối với một loạt các vi khuẩn. Công thức hóa học: C 19 H 22 FN 3 O 3 Trọng lượng phân tử: 359.4 g/mol Nhiệt độ nóng chảy: 219-212 0 C Tính chất vật lý: Là tinh thể màu vàng nhạt vị đắng, tan trong NaOH, methane, methanol , dung môi hữu cơ và xyanua.   Tan nhẹ một phần trong nước ở pH = 7 Có 2 giá trị pKa: khoảng 5 và 8 – 9 Ảnh hưởng của dư lượng kháng sinh Mất thị lực, mù vĩnh viển. Nhức đầu, mệt mỏi, mất ngủ. Gây phản ứng nghiêm trọng: phù mặt, phù thanh quản, khó thở tính mạng con người. T ích lũy lâu : gây suy gan, suy thận , suy tủy, thậm chí gây ung thư, đột biến gen . III. Nguyên nhân lây nhiễm Enrofloxacin trong tôm Quản lý lỏng lẻo Chưa nắm bắt được danh mục thuốc cấm Ý thức của người nuôi tôm Nhiễm kháng sinh Kiểm soát lỏng lẻo  Hiện nay, việc mua bán kháng sinh nguyên liệu thú y thủy sản giữa các doanh nghiệp trên thị trường và thành phẩm ở các đại lý, cửa hàng đang rất bát nháo, lộn xộn. “ Mê hồn trận" kháng sinh nguyên liệu  Ý thức của người nuôi tôm  Lạm dụng thuốc Tại Việt Nam, người nuôi tôm vẫn đang sử dụng phổ biến E nrofloxacin trộn với thức ăn để trị bệnh cho tôm trong giai đoạn nuôi, đặc biệt đối với tôm chân trắng. Đặc biệt là con tôm, người nuôi dùng thuốc kháng sinh không kiểm soát dẫn tới tồn dư kháng sinh. Phương Pháp Xác Định Enrofloxacin Trong Thủy Sản QUINOLONE ELISA KIT 1.Thành Phần Bộ Kits Elisa - 1 khay Microwell phủ kháng thể - 6 lọ dung dịch chuẩn - Dung dịch cộng hợp - Dung dịch rửa - Cơ chất 2.Thiết Bị Và Dụng Cụ Hóa Chất Hóa chất: + NaCl + HCl + NaOH + Methanol + Hexane + N ước cất Chuẩn Bị Dung Dịch Mẫu Đồng hóa mẫu 1 phút với tốc độ 10.000v/p - Cân 2g mẫu đã đồng hóa cho vào ống ly tâm 25ml, thêm 6ml dịch chiết trộn đều 5 – 10 phút - Ly tâm tốc độ 4000v/p thời gian 5 phúc ở 20 -25°C . - Hòa tan 1ml trên bề mặt với 45µL dd NaOH. 1 M , điều chỉ pH 7-8 - Dùng Mcropipette hút 50 µL dd lỏng đem chuẩn bị phân tích Tiến Hành Phân Tích Bằng Phương Pháp Elisa 100 μ L cộng hợp Lắc đều Ủ ở 27 ̊C, 40P Tiến Hành Phân Tích Bằng Phương Pháp Elisa Giữ và lắc nhẹ trộn đều dd, để yên 20p, 27 ̊C Tiến Hành Phân Tích Bằng Phương Pháp Elisa Lắc nhẹ, Đọc kết quả trên máy đọc elisa trong 5p Tiến Hành Phân Tích Bằng Phương Pháp Elisa Diễn giải kết quả Màu đậm = ít kháng sinh Màu nhạt = nhiều kháng sinh So sánh màu hoặc mật độ quang của các giếng mẫu với màu hoặc mật độ quang của các giếng đối chứng âm. Từ đó xác định được mức độ nhiễm Tiến Hành Phân Tích Bằng Phương Pháp Elisa Hoặc chính xác hơn ta vẽ đồ thị đường chuẩn của Quinolone và dựa vào đó định lượng mức độ nhiễm của mẫu Tính toán theo công thức sau : %ức chế = [1 – ( A 0 /A x )] x 100 Trong đó : - Ao : mật độ quang tại giếng đối chứng âm - Ax: mật độ quang tại giếng mẫu Câu hỏi củng cố  Kháng sinh Enrofloxacin nằm trong nhóm nào? Sulfamid Macrolides Aminoglucosides Fluoroquinolones  2. Nguyên nhân nhiễm Enrofloxacin vào tôm? Người dân dùng thuốc kiểm soát môi trường và chữa bệnh cho tôm Sự quản lí lỏng lẻo của cơ quan có thẩm quyền Sự thiếu hiểu biết về danh mục thuốc cấm, hạn chế sự dụng Tất cả đáp án trên  3. Kháng sinh Enrofloxacin tiêu diệt hay kiềm hãm sự phát của vi khuẩn nào? Vi khuẩn gram dương Vi khuẩn gram âm Cả 2 đều đúng Cả 2 đều sai  4. Kháng sinh gồm....nhóm? 10 8 11 14  5. Cách diễn giải kết quả phù hợp? Màu nhạt chứng tỏ....kháng sinh Nhiều Ít Không có kháng sinh Không thể hiện gì cả  Cảm Ơn Thầy Cô Và Các Bạn Đã Lắng Nghe